雷貝拉唑鈉腸溶微丸研究

鐘雪彬，柏 峰，黃 洋，李 緯

(南京長澳醫藥科技有限公司，江蘇 南京 210038)

雷貝拉唑(Rabeprazole sodium)為苯并咪唑類化合物，是繼奧美拉唑、蘭索拉唑、泮托拉唑后第四個上市的新一代質子泵抑制劑，本品是由日本衛材公司開發，于1997年首先在日本上市，1999年在美國上市，商品名：Pariet?，劑型為腸溶片[1-2]。2007年波利特腸溶片進入中國。

雷貝拉唑鈉在胃酸中極其不穩定，目前其口服制劑多開發為腸溶片或者腸溶膠囊，但是該類劑型不適合吞咽有困難的特定病人群體，因此，本研究擬將雷貝拉唑鈉開發為口崩片，極大的提高服用順應性，同時以市售的雷貝拉唑鈉腸溶片作為參比制劑，進行體外溶出曲線和體內生物等效性研究。

本研究擬先制備雷貝拉唑鈉腸溶微丸，然后通過壓片的方法制備雷貝拉唑鈉口腔崩解片，因口腔崩解片要求在口腔內能夠迅速崩解、無沙礫感、口感良好、容易吞咽，對口腔黏膜無刺激性[3]。因此，關鍵中間體腸溶微丸相較于普通的腸溶膠囊中的微丸粒徑要求更細小，同時需要更有韌性才能經受壓片過程而不被破壞。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Mini Glatt5流化床(德國Glatt公司)；BT100-2J 蠕動泵驅動器(保定蘭格恒流泵有限公司)；TD20002C電子天平(天津天馬衡基儀器有限公司)；AL204電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)；Agilent780+850DS自動溶出儀(安捷倫)；U3000高效液相色譜儀(戴安)；Milli-Q純水儀(密理博)；S220 pH計(梅特勒-托利多儀器有限公司)；UV-2700紫外可見光光度計(島津公司)。

1.2 藥品與試劑

雷貝拉唑鈉(常州康麗制藥有限公司);雷貝拉唑鈉腸溶片(日本衛材公司)；蘇麗芯TM250/355(上?？房蛋录夹g有限公司)；羥丙甲纖維素E3LV(陶氏化學公司)；滑石粉(廣西龍勝華美滑石開發有限公司)；檸檬酸三乙酯(上海冒為醫藥輔料技術有限公司)；二氧化鈦(江蘇宏遠藥業有限公司)；甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物水分散體L 30D-55(Evonik Rohm GmbH公司)；氫氧化鈉(湖南爾康制藥有限公司)；氧化鎂(湖南新綠方藥業有限公司)；聚乙二醇6000(山東瑞升藥用輔料有限公司)；磷酸氫二鉀(分析純)，氫氧化鉀(分析純)，磷酸(色譜純)，甲醇(色譜純)，乙腈(色譜純)。

2 方法與結果

2.1 測定方法

2.1.1 有關物質和含量測定方法

供試品溶液配制：精確稱取適量腸溶微丸(約含雷貝拉唑鈉10mg)，加入100 mL棕色容量瓶中，加入0.01 mol/L氫氧化鈉60 mL超聲溶解，完全溶解用乙腈定容至刻度線，搖勻即得供試品溶液。

對照品溶液配制：取雷貝拉唑鈉對照品10mg于100 mL棕色容量瓶中，加0.01 mol/L氫氧化鈉60 mL超聲溶解完全后用乙腈定容至刻度線，搖勻即得對照品溶液。

空白輔料溶液配制：按處方配比取空白輔料適量(相當于雷貝拉唑鈉10mg)置于100 mL棕色容量瓶中，加0.01 mol/L氫氧化鈉60 mL超聲溶解完全溶解用乙腈定容至刻度線，搖勻即得空白輔料溶液。

有關物質、含量按以下色譜方法進行測定。參照《中國藥典》2015版雷貝拉唑鈉腸溶膠囊及腸溶片的有關物質標準，單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積1.0%，各雜質峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積的2.0%。有關物質測定色譜條件采用梯度洗脫，洗脫方法見下表。

表1 有關物質、含量色譜條件

表2 有關物質液相洗脫梯度

2.1.2 耐酸力的測定[4]

耐酸力的測定按照《中國藥典》2015版XC第二法，以0.1mol/L鹽酸溶液500 ml 為溶出介質，轉速為100 r/min，2 h后，棄去溶出介質，用水沖洗溶出杯內顆粒，照2.1.1中含量的測定方法測定取出的微丸含量，每個顆粒中雷貝拉唑鈉含量應不低于標示量的90%。

2.1.3 溶出度測定[5]

pH值為1.0鹽酸溶液：取自制微丸及市售原研片(批號：1706085)，照釋放度測定法(中國藥典2015年版四部通則0931第一法方法1)，采用溶出度測定法(中國藥典2015年版二部通則0931第一法)的裝置，以pH值為1.2鹽酸、pH值為6.0磷酸鹽緩沖液、pH值為6.8磷酸鹽緩沖液溶液900mL為釋放介質，轉速為 50r/min，依法操作，分別于5,10,15,30,45,60,90、120min時，取溶液5mL，濾過，作為供試品溶液；另取雷貝拉唑鈉對照品適量，用相應溶出介質配制0.01mg/mL的對照品溶液。照紫外-可見分光光度法(中國藥典2015版四部通則0401)測定吸光度，pH值為1.2鹽酸溶液在299nm測定；pH值為6.0磷酸鹽緩沖液在295nm測定；pH值為6.8磷酸鹽緩沖液在285nm測定。每批樣品各測定6份。計算每份樣品各時間點的釋放量，繪制釋放曲線。

2.2 處方篩選與優化

雷貝拉唑鈉微丸設計為三層包衣，采用微丸(250～350μm)為內核，第一層包衣為含藥層，第二層包衣為隔離層，第三層包衣為腸溶層，并且優化了各層的處方。以下處方篩選均以100g微丸為例。

2.2.1 含藥層包衣

按照表3稱取處方量羥丙甲纖維素慢慢分散至攪拌狀態下的純化水中，溶脹完全后，加入氧化鎂和滑石粉，攪拌均勻后，加入雷貝拉唑鈉使其溶解完全，過200目篩，按照表4中包衣參數進行包衣。

表3 含藥層包衣處方

表4 含藥層包衣工藝

含藥層包衣過程，考察了不同粘合劑用量對上藥率的影響，上藥率通過包衣結束后檢測藥物含量計算得到。結果表明：隨著HPMC濃度的提高，上藥率逐步增加，當HPMC濃度為4.5g時在包衣過程中粘丸現象嚴重，故包衣處方選擇粘合劑用量為3.0gHPMC，詳細結果見表5。

表5 粘合劑用量對上藥率的影響

2.2.2 隔離層包衣

按照表6取處方量羥丙甲纖維素慢慢分散至攪拌狀態下的純化水中，溶脹完全后，加入檸檬酸三乙酯、聚乙二醇6000和滑石粉，攪拌均勻后，過200目篩，按照表7中工藝參數進行包衣。

表6 隔離層包衣處方

表7 隔離層包衣工藝

隔離層主要起到增加穩定性的作用，因此，本研究考查了不同增重對雷貝拉唑鈉腸溶微丸的穩定性[6]，將隔離層微丸放置在60℃，RH75%條件下放置5天后進行觀察并取樣檢測有關物質。結果表明：隔離層中羥丙甲基纖維素用量在12g以上有利于微丸的穩定，最終選擇12g，此處方隔離層增重約為15%，詳細結果見表8。

表8 隔離層對含藥層的保護

2.2.3 腸溶層包衣

按照表9取處方量甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物水分散體，在攪拌狀態下慢慢加入氫氧化鈉溶液，檸檬酸三乙酯，攪拌均勻，過300目篩；稱取處方量的水，攪拌狀態下，加入處方量滑石粉，二氧化鈦，攪拌混合均勻后，過200目篩，備用；上述兩溶液混合均勻，按照表10中工藝參數進行包衣。

表9 腸溶層包衣處方

表10 腸溶層層包衣工藝

腸溶層包衣過程，考察甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物水分散體用量對微丸耐酸力的影響，測定方法參考文獻[7]，結果表明(表11)：隨著甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物水分散體用量提高微丸的耐酸能力增強，當其用量在120g以上具有較好的耐酸性能，且包衣效率較高，因此，最終選擇用量為120g，此處方腸溶層增重約為50%。

表11 腸溶層微丸的耐酸力

2.3 自制雷貝拉唑鈉腸溶微丸釋放行為與市售品對比

按最佳處方工藝制備三批微丸，并且與日本衛材公司研制的雷貝拉唑鈉腸溶片(商品名為波利特，規格10mg)進行溶出曲線比較，釋放度實驗采用2.1.3中所述溶出度測定方法，分別選擇pH值為1.2鹽酸溶液，pH值為6.0磷酸鹽緩沖液，pH值為6.8磷酸鹽緩沖液三種不同的介質進行，轉速為50 r/min，結果表明：按照最佳處方工藝制備的三批微丸批間重復性高，在pH值為1.2鹽酸條件下市售品和自制品的各時間點的平均釋放量均小于10%，溶出行為相似。由表12可知，pH值為6.0磷酸鹽和pH值為6.8磷酸鹽介質中自制品和市售片釋放曲線的f2均大于50，兩者釋放行為相似。詳細結果見圖1、圖2、圖3、表12。

圖1 pH值為1.2鹽酸介質中的釋放度曲線

圖2 pH值為6.0磷酸鹽介質中的釋放度曲線

圖3 pH值為6.8磷酸鹽介質中的釋放度曲線

表12 pH值為6.0和pH6.8值 為磷酸鹽介質下的f2因子結果

3 討論

在本研究中，采用流化床包衣工藝，設計并制備了可用于雷貝拉唑鈉口腔崩解片的腸溶微丸，研究了不同處方工藝對制備雷貝拉唑鈉腸溶微丸的影響并確定了最優處方工藝。

本實驗微丸包衣過程中，由于微丸較小(粒徑0.3 mm左右)，比表面積較大，微丸靜電現象嚴重。在處方中加入聚乙二醇6000后，靜電現象得到改善；包衣過程中粘丸現象較明顯，最終通過選擇低粘度HPMC，控制增塑劑用量，合理控制包衣過程工藝參數，以保持良好的流化狀態。

通過本實驗篩選的最優處方工藝制備的雷貝拉唑鈉腸溶微丸，批間重復性好，產品質量穩定，體外釋放行為與市售品雷貝拉唑鈉腸溶片相似，在后期研究中筆者擬采用該微丸進行雷貝拉唑鈉口腔崩解片的處方和工藝的研究。