MEIS1在子宮內膜樣腺癌中的表達及其臨床意義

王茂彩?李驍?王敏儀?陳姍?陳勍

【摘要】目的 探討骨髓嗜病毒整合位點1（MEIS1）在子宮內膜樣腺癌中的表達及其臨床意義。方法 選取45例子宮內膜樣腺癌患者的病變組織（內膜癌組），以及12例非內膜病變患者的正常子宮內膜組織（對照組），采用免疫組織化學染色檢測2組組織中MEIS1蛋白的陽性率，分析內膜癌組MEIS1蛋白與臨床病理特征、雌激素受體（ER）和孕激素受體（PR）間的關系。結果 子宮內膜樣腺癌組織中，MEIS1蛋白主要表達于腺上皮細胞胞核中。內膜癌組的MEIS1蛋白陽性率高于對照組（P < 0.05）。子宮內膜樣腺癌組織中，MEIS1的表達與腺癌細胞分化級別、分期、肌層浸潤深度、淋巴結轉移、臟器轉移等均無關（P均> 0.05），與ER、PR的表達有關（P均< 0.05）。結論 MEIS1在子宮內膜樣腺癌中呈高表達，并與ER、PR的表達相關，可能參與了子宮內膜樣腺癌的發生機制。

【關鍵詞】骨髓嗜病毒整合位點1;子宮內膜樣腺癌;雌激素受體;孕激素受體

Expression and significance of MEIS1 in the endometrial adenocarcinoma Wang Maocai， Li Xiao， Wang Minyi， Chen Shan， Chen Qing. Department of Gynecology， the Sixth Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University， Guangzhou 510655， China

Corresponding author， Chen Qing， E-mail： chenq6@ mail. sysu. edu. cn

【Abstract】Objective To investigate the expression and clinical significance of myeloid ecotropic viral integration site 1 （MEIS1） in the endometrial adenocarcinoma. Methods The diseased endometrial tissues were collected from 45 patients with endometrial adenocarcinoma （endometrial adenocarcinoma group） and normal endometrial tissues were obtained from 12 patients with non-endometrial lesions （control group）. The positive rate of MEIS1 in two groups was detected by immunohistochemical staining. The correlation between MEIS1 protein， clinicopathological features， estrogen receptor （ER） and progesterone receptor （PR） in the endometrial adenocarcinoma group was analyzed. Results MEIS1 protein was mainly expressed in the nuclei of glandular epithelial cells in the endometrial adenocarcinoma tissues. The positive expression rate of MEIS1 protein in the endometrial adenocarcinoma group was significantly higher than that in the control group （P < 0.05）. In the endometrial adenocarcinoma tissues， MEIS1 expression was not correlated with the differentiation grade of adenocarcinoma cells， stages， myometrial infiltration， lymph node metastasis or organic metastasis （all P > 0.05）， whereas it was significantly associated with the expression of ER and PR （both P < 0.05）. Conclusions MEIS1 is highly expressed in endometrial adenocarcinoma， which is associated with ER and PR expression. In addition， MEIS1 might be involved with the pathogenesis of endometrial adenocarcinoma.

【Key words】Myeloid ecotropic viral integration site 1;Endometrial adenocarcinoma;

Estrogen receptor;Progesterone receptor

子宮內膜癌（EMC）是常見的女性生殖道惡性腫瘤之一，占女性生殖道惡性腫瘤的20%～30%。在EMC所有的組織類型中，子宮內膜樣腺癌約占70%。目前，與EMC的形成和發展相關的癌基因與抑癌基因主要包括PTEN、P27、P53、P16等，但具體機制尚不明確[1-2]。骨髓嗜病毒整合位點1（MEIS1）基因定位于人染色體中2p13.14，屬于同源盒（HOX）基因的三氨基酸環延伸家族，廣泛表達于正常人體組織中，其中在子宮內膜、子宮肌層中表達水平最高。研究表明，MEIS1介導子宮內膜容受性的建立等環節，其表達異常可能參與了EMC的發生和發展[3-4]。目前尚未有報道MEIS1在EMC的發生發展過程中，與雌激素受體（ER）和孕激素受體（PR）的聯合調節作用。因此，本研究擬采用免疫組織化學染色（免疫組化）檢測MEIS1蛋白在子宮內膜樣腺癌組織中的表達，并探討MEIS1、ER、PR在EMC的發生發展過程中的相互調節作用和相關性，現報告如下。

對象與方法

一、研究對象

收集2003年1月至2010年12月在中山大學孫逸仙紀念醫院婦科行子宮切除的57例患者病歷資料及術中切除組織病理標本，所有病理標本均經病理科醫師復核確診。其中45例為子宮內膜樣腺癌患者（內膜癌組），均行根治性或姑息手術切除子宮，術前未接受化學治療、放射治療及激素等治療，年齡為（54.0±9.4）歲，所取組織為高分化腺癌19例、中分化腺癌14例、低分化腺癌12例。對照組為因子宮肌瘤、宮頸上皮內瘤變行子宮切除的12例患者，均排除其他系統性疾病，且近期均未服用過任何激素類藥物，年齡（40.8±7.3）歲，所取組織為增生期內膜4例、分泌期內膜6例、絕經期內膜2例。本研究經中山大學孫逸仙紀念醫院倫理委員會批準，所有入組患者或其家屬均已簽署知情同意書。

二、方 法

1. 臨床病理資料的收集

收集內膜癌組45例患者的臨床病理資料，包括臨床-手術分期（根據FIGO2010標準修訂）、術后包括ER、PR病理的結果、肌層浸潤、淋巴結轉移等。

2. MEIS1蛋白的檢測

采用非生物素二步法免疫組化染色，具體步驟：10%甲醛固定的子宮內膜標本，石蠟包埋后切片（4 μm），脫蠟，3% H2O2去離子水孵育10 min，磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗2 min共3次，滴加MEIS1多克隆抗體（1∶25，ABCAM），PBS（中杉金橋）沖洗2 min共3次，滴加兔IgG抗體-過氧化物酶（HRP）多聚體（PV-6001，中杉金橋），室溫孵育30 min，PBS沖洗2 min共3次，二氨基聯苯胺（DAB）顯色，蒸餾水充分沖洗，脫水，透明樹膠封片。以MEIS1陽性的子宮內膜切片作為陽性對照，用PBS代替一抗作為陰性對照。PR、ER 結果來源于患者病理結果。

3. 結果評價

以腺上皮細胞中出現黃色至棕黃色顆粒為MESI1蛋白陽性。在光鏡下計數400個細胞，采用半定量雙評分。陽性細胞數評分：陽性細胞數< 5%為0分、5% ～ 25%為1分、26% ～ 50%為2分、> 50%為3分。顯色度評分：細胞核無顯色為0分、淡黃色為1分、棕黃色為2分、棕褐色為3分。2項評分相加之和等于0分為陰性（-），1 ～ 2分為低表達（+），3 ～ 4分為中表達（++），5 ～ 6分為高表達（+++）。陽性例數為中表達例數與高表達例數之和。

三、統計學處理

采用SPSS 26.0分析數據。計數資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher確切概率法，ER、PR與MEIS1表達的關系采用配對χ2檢驗。P < 0.05為差異有統計學意義。

結果

一、MEIS1在不同子宮內膜組織中的表達

在子宮內膜樣腺癌組織中，MEIS1蛋白主要表達于腺癌細胞胞核中，基質細胞中未見明顯表達或弱表達。在正常子宮內膜組織中，MEIS1蛋白主要表達于子宮內膜腺上皮細胞及基質細胞胞核中，胞漿中未見明顯陽性表達，且在基質細胞中MEIS1表達強于腺上皮細胞，見圖1。

二、MEIS1在子宮內膜樣腺癌組織中的表達

內膜癌45例子宮內膜腺樣癌組織中，MEIS1蛋白陽性18例（中表達13例、高表達5例），陽性率為40%。對照組12例正常子宮內膜組織中，MEIS1蛋白陽性1例、陰性或低表達11例，陽性率為8%。內膜癌組MEIS1蛋白陽性率高于對照組（χ2 = 4.275，P = 0.039）。

三、子宮內膜樣腺癌組織MEIS1蛋白表達與臨床病理特征的關系

MEIS1蛋白的陽性率與腺癌細胞分化級別、分期、肌層浸潤深度、淋巴結轉移、臟器轉移均無關（P均> 0.05），見表1。

四、子宮內膜樣腺癌組織MEIS1蛋白與ER、PR表達的關系

在子宮內膜樣腺癌中，MEIS1蛋白與ER、PR的陽性率存在一定關系（P均< 0.05）。

討論

EMC是女性生殖道常見的惡性腫瘤之一，其中80%～90%的病理類型為子宮內膜樣腺癌。近年來，其發病率有所上升，且呈年輕化趨勢。目前研究顯示細胞生長周期調節失控可能對子宮內膜癌的發生發展起著重要的調控作用。MEIS1屬于HOX基因的三氨基酸環延伸家族，定位于人染色體中的2p13.14。作為HOX的不可缺失的輔助因子，MEIS1在巨核和紅細胞生成中起關鍵作用[5]。HOXA/MEIS1/前B細胞白血病HOX基因3（PBX3）的過表達是混合譜系白血病（MLL）重排的急性髓細胞白血病（AML）標志。HOXA9和MEIS1被認為是MLL融合的最關鍵目標，它們的共表達可快速誘導AML[6]。但是在前列腺癌研究中，MEIS1-HOXB13轉錄調控抑制前列腺癌細胞增殖和轉移[7]。本研究表明，正常子宮內膜組織中MEIS1在基質細胞中的表達水平強于腺上皮細胞，與Sarno等[8]的研究結果一致。本研究同時顯示，子宮內膜樣腺癌組織中MEIS1蛋白主要表達于腺上皮細胞的細胞核，正常子宮內膜組織的MEIS1蛋白陽性率低于內膜癌組，說明在異常增生的子宮內膜組織中MEIS1呈現高表達。Zhong等[9]發現子宮內膜癌中HOX10的表達低于正常子宮內膜。MEIS1與HOX10表達的不一致性，我們推測可能與其他抑癌基因的調控有關。

本研究對MEIS1蛋白的表達情況與子宮內膜樣腺癌的不同分化級別、分期、肌層浸潤深度、淋巴結轉移、臟器轉移等因素進行了分析，結果顯示MEIS1蛋白在不同分化級別、分期、肌層浸潤深度、有無淋巴結轉移、有無臟器轉移中的陽性率均未見明顯差異，這提示MEIS1可能與子宮內膜樣腺癌的轉移和預后關系不太明確，但尚需要擴大樣本量進一步驗證。

子宮內膜癌的預后與ER和PR存在著明確的關系[10]。本研究也對MEIS1、ER、PR在子宮內膜樣腺癌組織中的表達情況進行了檢測和分析，結果顯示在子宮內膜樣腺癌的病變組織中，MEIS1與PR、ER的陽性率有關，但具體的關系需進一步研究證實。

綜上所述，MEIS1作為癌基因，其過表達可能通過HOX蛋白參與了子宮內膜樣腺癌的發生和發展，MEIS1可能與子宮內膜樣腺癌的進展及侵犯無關，不能作為子宮內膜樣腺癌的預后評價指標。當然，這些結論尚需要大量的研究加以證實。

參 考 文 獻

[1] Stelloo E， Bosse T， Nout RA， MacKay HJ， Church DN， Nijman HW， Leary A， Edmondson RJ， Powell ME， Crosbie EJ， Kitchener HC， Mileshkin L， Pollock PM， Smit VT， Creutzberg CL. Refining prognosis and identifying targetable pathways for high-risk endometrial cancer; a TransPORTEC initiative. Mod Pathol， 2015， 28（6）：836-844.

[2] 王麗娟， 巴音吉力， 盧淮武， 李晶， 林仲秋. CRP+1444 C/T基因多態性與子宮內膜癌的相關性研究. 新醫學， 2015， 46（8）：515-519.

[3] Hu L， Li H， Huang CL， Chen H， Zhu G， Qian K. Regulation of myeloid ecotropic viral integration site 1 and its expression in normal and abnormal endometrium. Fertil Steril， 2014， 102? （3）：856-863.

[4] Xu Y， Lu J， Wu J， Jiang R， Guo C， Tang Y， Wang H， Kong S， Wang S. HOXA10 co-factor MEIS1 is required for the decidualization in human endometrial stromal cell. J Mol Endocrinol， 2020， 64（4）：249-258.

[5] Miller ME， Rosten P， Lemieux ME， Lai C， Humphries RK. Meis1 is required for adult mouse erythropoiesis， megakar-yopoiesis and hematopoietic stem cell expansion. PLoS One， 2016， 11（3）：e0151584.

[6] Li Z， Chen P， Su R， Hu C， Li Y， Elkahloun AG， Zuo Z， Gurbuxani S， Arnovitz S， Weng H， Wang Y， Li S， Huang H， Neilly MB， Wang GG， Jiang X， Liu PP， Jin J， Chen J. PBX3 and MEIS1 cooperate in hematopoietic cells to drive acute myeloid leukemias characterized by a core transcriptome of the MLL-rearranged disease. Cancer Res， 2016， 76（3）：619-629.

[7] Johng D， Torga G， Ewing CM， Jin K， Norris JD， McDonnell DP， Isaacs WB. HOXB13 interaction with MEIS1 modifies proliferation and gene expression in prostate cancer. Prostate， 2019， 79（4）：414-424.

[8] Sarno JL， Kliman HJ， Taylor HS. HOXA10， Pbx2， and Meis1 protein expression in the human endometrium： formation of multimeric complexes on HOXA10 target genes. J Clin Endocrinol Metab， 2005， 90（1）：522-528.

[9] Zhong G， Wang Y， Liu X. Expression of HOXA10 in endo-metrial hyperplasia and adenocarcinoma and regulation by sex hormones in vitro. Int J Gynecol Cancer， 2011， 21（5）：800-805.

[10] 艾紅英， 劉愛珍， 王磊. ER、PR在子宮內膜癌組織中的表達及其與臨床病理特征的關系.實用癌癥雜志， 2019， 34 （5）：756-758.

（收稿日期：2020-07-26）

（本文編輯：林燕薇）