串聯質譜技術在新生兒遺傳代謝性疾病篩查中的應用及對篩查效率的影響分析

廣東省吳川市婦幼保健計劃生育服務中心（524500）康健泉 呂川

遺傳代謝性疾病又稱為先天代謝異常或者遺傳代謝異常，主要是機體正常代謝的某種受體、酶、膜以及載體蛋白的基因編碼突變并且產物發生改變現象，血液中的表現主要為相應代謝物含量增高、代謝物不斷蓄積，進而出現相應病理癥狀。我國每年出生的缺陷兒較多，其中在出生缺陷疾病中遺傳代謝病所占比例較大，在臨床具有嚴重危害，甚至會加重家庭以及社會的經濟負擔，當前進行預防的有效措施為新生兒疾病篩查[1]。在進行篩查的過程中，最主要的篩查內容就是遺傳代謝性疾病，在新生兒出生之后進行早期篩查并給予有效治療可促進其健康成長，當前進行新生兒遺傳代謝性疾病篩查所選用的方式為串聯質譜技術，通過篩查可有效明確脂肪酸、有機酸以及氨基酸代謝異常等疾病[2]。本次研究對新生兒遺傳代謝性疾病篩查中應用串聯質譜技術，總結如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2018年6月～2019年6月期間的新生兒360例進行研究，其中男新生兒190例，女新生兒170例，出生時間為70h～6d，平均時間（5.23±1.04）d；其中正常出生體重兒240例，低體重兒50例，巨大兒70例；早產兒60例，足月兒300例。家屬均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 新生兒出生3d之后采集足跟血，充分哺乳之后采用濃度為75%的乙醇對其足跟外側以及足跟內側進行充分消毒，然后分別穿刺采血3滴，將所采集的足跟血放置于濾紙片上，保證每張濾紙片至少有2個血斑，每個血斑直徑要大于8mm，血斑的濃度要均勻一致并且要充分滲透濾紙片雙面，將標本晾干之后統一進行收集，然后密封后送檢，對于檢查結果為陽性的標本要進一步予以復查或者進行基因診斷[3]。

1.2.2 串聯質譜技術檢測 實施串聯質譜技術檢測所選用的儀器為美國生物應用系統公司生產的型號為API4000 型串聯質譜儀以及Perkin Elmer公司提供的試劑盒、美國疾病控制與預防中心提供的質控品，測定濾紙片中的有機酸、多項氨基酸以及脂肪酸指標以及比值[4]。該項檢測主要通過電離學原理將被檢測的物質分子電離成為質荷比m/s的帶電粒子，并且保證以上帶電粒子的質荷比大小可在空間或者時間上生成分離排列的圖譜。對離子峰的強度進行測定，以此來確定待測化合物的分子式以及相對分子質量。將測得的兩個質譜串聯通過質譜儀的不同掃描方式獲取串聯質譜圖[5]。

1.3 觀察指標 分析篩查結果以及不同胎齡新生兒的氨基酸濃度。氨基酸類型主要包括ALA（新生兒丙氨酸）、MET（甲硫氨酸）、ARG（精氨酸）、GLY（甘氨酸）、PHE（苯丙氨酸）、CIT（瓜氨酸）、ORN（鳥氨酸）、PRO（脯氨酸）、TYR（酪氨酸）、VAL（纈氨酸）。

1.4 統計學方法 采用SPSS19.0分析處理數據，計量資料采用t檢驗，計數資料采用X2檢驗，P＜0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 篩查結果 研究中的360例新生兒中，篩查結果為可疑陽性的有8例，占比2.22%（6/360），確診3例，確診率為0.83%，其中包括1例氨基酸代謝障礙類，1例有機酸代謝障礙類，1例脂肪酸代謝障礙類，各項占比均為33.33%；假陽性的352例新生兒中，氨基酸代謝異常228例，占比64.77%，有機酸代謝障礙類75例，占比21.31%，脂肪酸代謝障礙類49例，占比13.92%。

2.2 不同胎齡新生兒的氨基酸濃度 早產兒ALA與MET濃度與足月兒之間無顯著差異，P＞0.05；早產兒ARG、GLY、PHE濃度高于足月兒，CIT、ORN、PRO、TYR、VAL濃度低于足月兒，P＜0.05。詳見附表。

附表 不同胎齡新生兒的氨基酸濃度比較(±s)

附表 不同胎齡新生兒的氨基酸濃度比較(±s)

氨基酸種類 早產兒（n=60） 足月兒（n=300） t P ALA 426.85±89.75 425.19±88.25 0.132 0.894 ARG 18.78±6.73 16.14±5.28 3.366 0.000 CIT 13.93±4.36 15.39±4.53 2.292 0.022 GLY 464.18±132.74 428.48±115.35 2.132 0.033 MET 24.58±6.72 24.33±6.66 0.265 0.791 ORN 151.66±44.72 164.34±41.83 2.118 0.034 PHE 56.16±7.91 51.79±7.17 4.234 0.000 PRO 184.35±41.66 211.66±43.31 4.486 0.000 TYR 106.78±33.27 116.18±31.47 2.091 0.037 VAL 119.84±34.62 139.73±37.54 4.004 0.000

3 討論

遺傳代謝性疾病主要是遺傳代謝出現異常所導致的疾病，會導致重要生理活性物質缺失，甚至會引起機體代謝物沉積，進而誘發較多臨床癥狀，本病在新生兒中的發病率較高，病情呈進行性發展，會誘發不可逆性神經系統損害，進而導致患兒死亡，所以早期篩查以及及時有效的治療至關重要。

遺傳代謝在與機體部分受體、酶以及膜生物合成的過程中出現遺傳缺陷，進而導致體液以及細胞中的大量毒性中間代謝產物聚集于體內，血液中的氨基酸以及乙酰肉堿等相應代謝產物的含量會不斷升高，進而引起遺傳代謝性疾病。串聯質譜技術是對多種指標進行檢測、對多種疾病進行篩查的技術，可在2min內快速檢測出同一血斑上的氨基酸、酰基肉堿以及游離肉堿，然后根據相關疾病指標可快速篩查脂肪酸、氨基酸以及有機酸的氧化代謝病。串聯質譜技術主要是在干血濾紙片上分析氨基酸以及卡尼汀的過程，可對脂肪酸代謝紊亂、有機酸代謝紊亂以及氨基酸代謝紊亂等40余種遺傳代謝性疾病進行篩查。多項研究表明[6]，遺傳代謝性疾病的出現會嚴重影響到新生兒的生長發育，就苯丙酮尿癥新生兒來說，其在出生時無明顯臨床表現，在3個月之后主要表現為生長發育落后以及智力落后現象，并且在年齡不斷增長的情況下，所表現出的癥狀會越來越嚴重，病情嚴重的患兒智商在50以下，并且多數患兒會出現腦電圖異常現象，采用串聯質譜技術進行早期診斷可有效避免患兒出現智力障礙。研究中采用該種技術診斷效果較好，可快速診斷出新生兒所患有的疾病，這與劉桂紅等[7]的研究結果基本一致。

綜上所述，在新生兒遺傳代謝性疾病篩查中應用串聯質譜技術效果較好，可有效提高篩查率，有助于遺傳代謝性疾病的早期篩查與診斷。