丹參提取物中有效成分的質量

程相前

摘? 要：中藥在我國有著數千年傳承歷史，是我國最為重要的文化之一，隨著時代不斷改變，中藥如今已經得到廣大醫務人員的認可，并在臨床方面得到了廣泛的應用。但由于中藥成為較為復雜，為能夠更好的發揮其作用，會對其成分進行檢測。本文以丹參為例，采用薄層層分析法對丹參提取物中的有效成分質量進行鑒定，以便能夠更好的了解其成分和在臨床方面的應用，并根據檢測結果采取相應措施控制其質量。

關鍵詞：丹參;提取物;有效成分質量

丹參主要是由鼠尾草屬植物丹參的根制成，在臨床質量方面具有祛瘀止痛，活血通絡，清心除煩的療效，屬于較為常見的中藥之一。丹參中含有的化學成分可以分為兩類，其一是脂溶性，其二是水溶性。二萜類化合物是脂溶性中主要成分，其中大部分都是丹參酮型的二萜類化合物。本文主要對丹參提取物中含有的脂溶性成分隱丹參酮、丹參酮I和丹參酮IIA采取相應的方式進行鑒定，將這三種成分最終檢測結果作為丹參提取物有效成分質量標準，從而為新藥研發工作提供科學性參考資料。

1 儀器與試藥

Agilent 1100 Series液相色譜儀，電子天平（十萬分之一）隱丹參酮、丹參酮I、丹參酮IIA對照品自制;丹參提取物20050901批、20051102批、20051201批（3批中試產品）;硅膠G板（自制）;甲醇（分析純、色譜純）;水為重蒸餾水;醋酸乙酯為分析純。

2 薄層鑒別

2.1 供試品溶液制備

在丹參提取物中稱量適當的藥品粉末，將粉末放置于專用器皿當中，結合實際情況選取5ml醋酸乙酯放入于器皿當中，使藥末得到充分溶解，利用醋酸乙酯定容到指定刻度，通過上述操作即可得到適用于本次研究過程的試品溶液。

2.2 對照品溶液制備

在選取的樣品當中結合實際情況稱量適當的隱丹參酮、丹參酮I和丹參酮IIA等藥品成分，將它們分別放置于專用檢測器皿當中，分別向每個器皿當中加入酷酸乙醋，使其與藥品成分混合，從而完全溶解于酷酸乙醋當中，通過上述操作即可得到適用于本次研究過程的對照品溶液。

2.3 測定方法

參照我國有關醫療單位編寫的《中國藥典》中記錄的薄層色譜法開展試驗，從試品溶液當中與對照品溶液當中分別抽取5μL液體，并從中抽取一滴液體放置同一硅膠薄層板之上，以石油醚（60～90℃）一醋酸乙酯（7：3）作為此次研究過程的展開劑，準備工作完成之后將先前抽取的液體平鋪在薄層板之中，取出，放在通風之處將其晾干。之后將薄層板放在陽光下觀察液體變化情況，發現在丹參提取物供試品色譜當中有許多斑點出現，在對照品色譜中同樣有許多斑點出現，且兩方斑點位置，顏色均相同。

3 含量測定

3.1 色譜條件與系統適用性實驗

迪馬DiamonsiTM（鉆石）C18（250mm×4.6mm，5μm）柱;甲醇-水（85：15）為流動相;檢測波長為270nm。柱溫：25℃;流速：1mL/min;進樣量10 uL。在上述色譜條件下隱丹參酮、丹參酮I丹參酮IA與其他組分能得到很好的分離。

3.2 供試品溶液的制備

在事先準備的丹參提取物中稱量大約20mg藥品粉末，使其符合實驗要求，將這些粉末放置在容量瓶當中，向其中加入適量的甲醇，放在超聲環境當中，直至溶液溫度與室內溫度保持一致，向容量瓶中加入甲醇直至指定刻度，搖晃容器使內部藥品混合在一起，當藥品粉末充分溶解之后將液體倒入過濾器具當中，在過濾之后的藥品溶液當中稱量5ml液體，將其注入在25ml容量器皿當中，再次向其中加入甲醇直至指定刻度，搖晃過濾之后的藥品溶液即可得到供試品溶液。

3.3 線性范圍考察

精密稱取經五氧化二磷減壓干燥36h的隱丹參酮9.70mg、丹參酮I11.02mg和丹參酮IIA9.99mg分別于50mL量瓶中，加甲醇溶解，搖勻并用甲醇定容至刻度。分別精密吸取對照品貯備液各2ml至10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，即得混合對照品溶液。分別精密吸取混合對照品溶液適量，用甲醇配制成系列濃度的對照品溶液。精密吸取上述溶液各10μL進樣，以進樣溶液的濃度（μg/mL，x）為橫坐標、峰面積（y）為縱坐標，繪制標準曲線。

3.4 實驗

3.4.1 精密度實驗

依照本次實驗流程，在相同供試品溶液之內根據試驗需求稱量合適溶液10μL，將此操作重復執行六次，記錄色譜峰峰面積，并根據操作流程計算其平均峰面積。根據計算結果得出隱丹參酮、丹參酮I丹參酮IIA的RSD分別為1.12%、1.00%和0.99%。從而表明本次實驗過程中使用的儀器在精密度方面沒有任何問題。

3.4.2 重現性實驗

依照供試品溶液制作過程再次制作六份相同的藥品溶液，制成之后從各個樣品當中抽取適量的溶液，其重量大約為10μL，并對其進行檢測，根據此次檢測結果發現樣品中隱丹參酮、丹參酮I丹參酮IIA的RSD分別為0.76%、1.33%和0.95%，此項數據表明該檢測方法具有良好的重現性。

3.4.3 穩定性實驗

在同一品供試品溶液中抽取適量的藥液，其重量大約為10μL，將這份溶液分別放置在4個實驗器皿當中放置12小時，并觀察此期間藥品溶液變化情況，重復精密度實驗操作流程，得到色譜峰峰面積，記錄其面積并計算得到丹參提取物中含有的隱丹參酮、丹參酮I和丹參酮IIA的RSD分別為2.67%、2.44%和2.38%，此次結果表明12小時之內供試品溶液不會發生任何變化。

3.4.4 加樣回收率實驗

取已知含量的樣品適量（批號20050901），精密稱定，分別精密加入80%、100%、120%的對照品，按照"供試品溶液的制備"項下方法制備，進樣測定，以加入法計算回收率。結果樣品中隱丹參酮、丹參酮I和丹參酮IIA的平均回收率分別為95.44%（RSD=1.75%）、97.59%（RSD=1.03%）、97.07%（RSD=1.60%）。

3.5 樣品的測定

精密吸取供試品溶液10μL，注入液相色譜儀，測定，記錄峰面積，計算隱丹參酮、丹參酮I、丹參酮IIA的含量。

4 討論

4.1 薄層色譜展開劑的選擇

本次實驗采用了不同比例的石油醚一丙酮、氯仿一丙酮及石油醚-醋酸乙酯系統來作為對照品及樣品的薄層展開劑，最終以石油醚-醋酸乙酯（7：3）展開為最佳。

4.2 提取溶劑的選擇

本次實驗考察了不同的溶劑及不同的提取方法處理樣品，分別采用了乙醇回流法、滲漉法、傳統水煎煮法、乙醇和甲醇的超聲提取法，最后確定用甲醇超聲（30min）提取的方法為最佳。藥品溶液制作方法雖然簡單便捷，但只能夠適用于此次實驗，這就意味上述溶液只能用于檢測丹參提取物中有效成分質量，無法用于其他中藥檢測過程。

4.3 檢測波長的選擇

經在200～400nm范圍內光譜掃描確認隱丹參酮、丹參酮I、丹參酮IIA均在200～290nm波段有吸收，隱丹參酮最大吸收波長為262nm，丹參酮I最大吸收波長為245nm，丹參酮IIA最大吸收波長為270nm。為保證各成分都具合適的靈敏度和精密度，選用了3種成分均有較好吸收且吸收曲線平坦處的270nm作為檢測波長。

5 結束語

綜上所述可以看出，中藥當中含有許多化學成分，正因如此，重要才能夠在臨床治療過程中發揮出顯著的療效，本文通過實驗對丹參中提取物中有效成分進行分析，實驗表明單種成分含量情況并不能夠真實表明中藥本身具體療效，實驗根據丹參本身藥理確定丹參酮IIA、丹參酮I、隱丹參酮和二氫丹參酮為有效成分質量測定指標，通過多種體系來評價藥材本身質量情況，將我國中醫藥整體情況以及作用體現出來。該方法操作簡單便捷無需復雜流程，實驗結果準確可以反映出丹參提取物中有效成分的質量。

參考文獻

[1]郭增軍.丹參提取物中有效成分的質量控制及藥動學研究[M].沈陽藥科大學，2008.

[2]楊洋.丹參提取物中有效成分的質量控制及藥動學研究[J].科學與財富，2019，000（002）：120.

[3]苑宏亮.丹參提取物中有效成分的質量控制及藥動學研究[J].東方食療與保健，2015，000（010）：193-193.