王立民 呂 品* 于志民 張繼舟
1 黑龍江省科學院自然與生態研究所 哈爾濱 150040
2 濕地與生態保育國家地方聯合工程實驗室 哈爾濱 150040
中藥赤芍主要來源為毛茛科芍藥(Paeonia lactifolraPall.)野生種群的根,為我國傳統大宗藥材,藥用歷史悠久,具有活血化瘀、清熱涼血、散瘀止痛功效[1]。由于近年來對野生資源破壞而導致藥材匱乏,國內許多地區開展了栽培赤芍的嘗試和探索。國內學者在芍藥藥效分類、人工栽培及生物性狀、土壤養分環境評價及芍藥成分分析方面進行了一系列的研究[2~14]。雖然國內對栽培赤芍研究開展領域較多,但在產量品質等關鍵技術方面還不夠深入。本研究針對栽培赤芍產量和芍藥苷含量提升進行有機物料(褐煤)、氮、磷施肥量配比優化,以探索達到產量品質俱佳的赤芍優化施肥模式,為中藥材規模化種植提供科技支撐,為中藥產業健康發展提供技術支持。
試驗地點在黑龍江省集賢縣太平鎮三苗圃。
供試土壤類型為黑鈣土,耕層(0 ~20 cm)土壤基本肥力:有機質含量23.68 g/kg,pH 5.74,堿解氮含量178 mg/kg,速效磷含量50.46 mg/kg,速效鉀含量311 mg/kg。
供試肥料,氮肥為尿素(含N 46%);磷肥為過磷酸鈣(含P2O516%);有機物料為褐煤,產自黑龍江省孫吳縣,在施入前將其粉碎到20 目大小的顆粒,褐煤中的總腐植酸含量28%,黃腐酸含量2.27%,pH 為3.6,有機質含量≥50%,其中含N 1.95 g/kg,P2O50.31 g/kg,K2O 0.25 g/kg(均為干基)。
1.2.1 試驗設計
試驗采用氮、磷、有機物料三因素二次飽和D-最優回歸設計[15],共設置10 個處理,各處理編碼值和實際施肥量列于表1。
試驗用磷肥、有機物料于播種前整地時一次施入,氮肥分兩次施用,其中第1 年以基肥施入1/3,第2 年返青時以追肥施入2/3;赤芍種苗定植時間2018 年9 月—10 月,將選好的3 年生種苗按株距30 ~45 cm 定植,芽朝上,覆土5 ~8 cm,稍壓,其他為常規田間管理措施,2019 年9 月—10 月收獲。

表1 試驗因素水平設置Tab.1 Test factor level setting
1.2.2 測定方法
收獲時按小區計產(鮮重),折算成畝產量,隨機量取50 株赤芍的根長、根粗,并測定根部芍藥苷含量。
芍藥苷含量采用液相色譜法,色譜條件為C18色譜柱;流動相為乙腈和0.1%磷酸水溶液,流動相梯度洗脫條件為0 min,0%乙腈;0 ~40 min,0 ~50%乙腈;40 ~42 min,50%~0 乙腈;42 ~50 min,0%乙腈;體積流量1.0 mL/min;檢測波長230 nm;柱溫30 ℃;進樣量為10 μL。芍藥苷在230 nm 附近有吸收峰。
采用SPSS 16.0、DPSv 15.10 和Excel 2007 等軟件對試驗測定數據進行整理、統計分析及圖表制作。
表2 為不同處理赤芍根系性狀、產量及芍藥苷含量。由表中數據可以看出,不同處理對赤芍根長、根粗、產量和芍藥苷含量影響不同。處理4、處理5 的赤芍根長大于其他處理,與處理1、處理2、處理6、處理7、處理9、處理10 差異顯著,與處理3 和處理8 差異不顯著;處理2、處理5 的赤芍根粗大于其他處理,與處理8 之外的其他處理差異顯著;處理6 的赤芍產量最高,與處理8之外的其他處理差異顯著;處理3、處理7 的芍藥苷含量高于其他處理,與處理9 之外的其他處理差異顯著。

表2 不同處理赤芍根系性狀、產量及芍藥苷含量Tab.2 Root traits, yield and paeonif lorin content of Radix Paeoniae Rubra in different treatments
根據表2 的試驗結果,通過數學模擬[15],建立赤芍產量效應函數和芍藥苷含量效應函數。
赤芍產量(Y)與氮(x1)、磷(x2)、有機物料(x3)的碼值效應函數為:

對該方程進行F檢驗,F=36.91**>F0.01(9,1)=5.56,決定系數R2=0.9999,產量與氮、磷、有機物料施用量之間存在極顯著的回歸關系,所獲得施肥的效應函數擬合性好,在指導生產上具有較好的可靠性。
芍藥苷含量(Y)與氮(x1)、磷(x2)、有機物料(x3)的碼值效應函數為:


對該方程進行F檢驗,F=39.29**>F0.01(9,1)=5.56,決定系數R2=0.9999,芍藥苷含量與氮、磷、有機物料施用量之間也存在極顯著的回歸關系,所獲得芍藥苷含量效應函數擬合性好,說明能較好地指導實際施肥情況。
2.2.1 赤芍產量和芍藥苷含量碼值效應函數的單因素效應分析
為分別探討氮、磷、有機物料施用量對赤芍產量和芍藥苷含量的影響,固定其中任意2 個碼值自變量為零水平,對方程(1)和(2)使用徐中儒等[16]提出的降維法,得到兩組單因子效應方程(3)、(4)、(5)和(6)、(7)、(8),并分別作圖(圖1、圖2)。
(1)氮、磷、有機物料與產量的單因子效應方程。


圖1 赤芍產量因子效應曲線Fig.1 Yield factor effect curve of Radix Paeoniae Rubra
由圖1 中可看出,3 條曲線都是開口朝下的拋物線,說明氮、磷、有機物料與赤芍產量的關系符合先上升后下降的E.Mitscherlich 學說[17],根據圖1 及方程(3)、(4)、(5)可得出,在低水平(氮0 ~90 kg/hm2、 磷0 ~100 kg/hm2、 褐 煤0 ~3700 kg/hm2)施用量情況下,氮肥、磷肥、有機物料適量施用促產效果顯著,而過高及超過一定用量(氮>110 kg/hm2、磷>150 kg/hm2、褐煤>4200 kg/hm2)其減產作用也很顯著;施鉀肥對赤芍產量的影響并不顯著。因此必須注意其合理施用量范圍,否則將會導致肥料的嚴重浪費,并顯著降低經濟效益。
(2)氮、磷、有機物料與芍藥苷含量的單因子效應方程。


圖2 赤芍芍藥苷因子效應曲線Fig.2 Paeonif lorin factor effect curve of Radix Paeoniae Rubra
芍藥苷是一種單萜類糖苷化合物,具有多種生物活性,如抗氧化、抗自由基損傷、抗血小板聚集、改善微循環、免疫調節等,且毒副作用小[18~20]。由圖2 可知,芍藥苷含量隨施氮量的遞增而近乎線性下降,一定量施氮引起的芍藥苷含量下降可能和產量提高引起的“稀釋作用”有關;但芍藥苷含量隨施氮量增加而下降,說明施氮對其積累有不利影響。由于氮代謝是一切生命活動的基礎,也是植物體內糖類、脂類、氨基酸等物質代謝的基礎。可能施氮過多導致赤芍體內某些酶或輔酶的含量發生較大變化,從而對其次生代謝產生明顯影響,不利于赤芍芍藥苷積累。隨磷肥和有機物料施用量增加,芍藥苷含量的變化均為開口向下的拋物線。赤芍芍藥苷含量的極大值點分別出現在磷肥編碼值為0.2312 和有機物料編碼值為0.3008 時,即過磷酸鈣和有機肥施用量分別為613 kg/hm2和4650 kg/hm2時,說明對于赤芍芍藥苷的積累需要一個最適宜的土壤營養環境,土壤養分含量不足會影響其積累,但施肥過量同樣會導致其含量下降。同時也說明磷和有機質能夠影響芍藥苷的形成和積累,適量施用對芍藥苷含量提升有促進作用。
2.2.2 施肥模型尋優結果
采用頻率分析法[21]對赤芍產量-施肥模型進行尋優,在95%的置信區間內,當x1取-0.4987~-0.2929,x2取-0.7123 ~-0.4169,x3取-0.2564 ~0.0548,對應的優化施肥量為尿素174~240 kg/hm2,過磷酸鈣437~687 kg/hm2,褐煤3700 ~4500 kg/hm2時,可以實現目標產量在2800 ~3200 kg/hm2范圍內。
同理,在赤芍芍藥苷含量3%~4%的約束條件下,采用頻率分析法[21]對赤芍苷含量-施肥模型進行尋優,在95%的置信區間內,當x1取0.7076 ~0.4170;x2取0.6694 ~0.3740;x3取-0.3050 ~0.0718,對應的優化施肥量為尿素200 ~350 kg/hm2,過磷酸鈣550 ~750 kg/hm2,褐煤2490 ~4200 kg/hm2。
將上述肥料施用量取交集,得:尿素200 ~240 kg/hm2,過 磷 酸 鈣550 ~687 kg/hm2,褐 煤3700 ~4200 kg/hm2,可以實現赤芍產量2800 ~3200 kg/hm2,芍藥苷含量3%~4%。
研究結果表明,氮、磷、有機物料合理施用能促進赤芍的生長發育,并對赤芍的產量和品質產生影響。在施用量相對少的情況下氮肥、有機物料對產量的促進作用很明顯,但超過一定用量以后,減產作用也很明顯;施磷肥對赤芍產量的影響不顯著。磷和有機物料(褐煤)能夠參與單萜類糖苷化合物的形成和積累,一定量的施用對芍藥苷含量提升有促進作用。本結果同時證明,有機物料(褐煤)表現出增產、增質的良好效應。
結合試驗數據及肥效分析,赤芍的施肥應在保證充足有機肥(有機物料)的基礎上,實現氮、磷肥的合理配施。為保證栽培赤芍高產優質,建議配方肥合理范圍:尿素200 ~240 kg/hm2,過磷酸鈣550 ~687 kg/hm2,褐煤3700 ~4200 kg/hm2,可實現產量2800 ~3200 kg/hm2,芍藥苷含量3%~4%。在赤芍的種植過程中,由于赤芍生長的地理環境與土壤環境會有一些變化,本模型的參數可根據土壤肥力狀況進行調整和優化,以實現氮、磷、有機物料的平衡配施,達到高產優質效果。