番茄蛋白酶類劣變因子熒光傳感器陣列檢測技術研究

李夢瑤, 王書雅, 謝云峰, 劉云國, 翟 晨*

1. 中糧營養健康研究院營養健康與食品安全北京市重點實驗室，北京 102209 2. 新疆大學生命科學與技術學院，新疆 烏魯木齊 830002 3. 臨沂大學生命科學學院，山東 臨沂 276000

引 言

過氧化氫酶(catalase，CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、多酚氧化酶(polyphenol oxidase，PPO)、果膠酶(pectinases，PE)和羧酸酯酶 (carboxylesterase, CXE) 等蛋白酶類的活性的變化是評判果蔬等農副產品劣變程度的一個重要指標。CAT和SOD可以消除過氧化氫、活性氧等細胞代謝的有害物質，PPO催化多酚物質形成醌類化合物形成，具有提高植物光合作用、增強植物防御能力和延緩衰老等作用[1-2]。PE分解果膠質，其主要與果蔬的后熟、果肉軟化、質地、色澤及果汁的含量有關，有研究表明果膠酶與果蔬貯藏期間劣變程度呈負相關，其活性的高低可以間接反映農副產品新鮮程度。CXE是一類廣泛存在于動植物及微生物中具有α/β折疊結構域的水解酶類，能有效地催化酯類和酰胺類化合物水解，與多種藥物、環境毒物及致癌物的解毒和代謝有關，并參與脂質運輸和代謝[3-4]。目前，對CAT，SOD，PPO，PE和CXE等相關蛋白酶類的檢測方法有很多，如色譜法、化學發光法、比色法、電化學分析法等[5-8]。通過實際應用，發現其操作繁瑣、費時費力較難實現多酶同時檢測。

免疫熒光法和熒光探針法因其具有簡便性和較高的靈敏度等特點而得到了廣泛的應用[9, 11]。Zhou等[9]報道了一種新型溶酶體靶向熒光探針，其發射波長為575 nm，用于檢測活細胞、血清和組織中羧酸酯酶；Jin等[10]制備了一種新的近紅外熒光探針，用于檢測活細胞和小鼠內源性羧酸酯酶；……