AECOPD 患者外周血嗜酸性粒細胞水平與IgE 及FeNO 的相關性分析

田文景

（河南省神火集團職工總醫院呼吸內科，河南 永城476600）

慢性阻塞性肺疾病 （chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一種全球范圍內常見的多發病，全球40 歲以上人群發病率高達9%～10%，且病死率和致殘率較高[1]。 COPD 以持續性氣流受限為主要特征，表現為慢性氣道炎癥和肺氣腫。 目前研究表明，其病因多于吸煙、化學物質、粉塵、空氣污染等外部因素和氣道高反應性、遺傳等內部因素有關，發病機制涉及CD8+T 淋巴細胞、巨噬細胞、中性粒細胞等[2]。 近年來研究報道，慢性阻塞性肺疾病急性加重期（Acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD） 患者外周血中嗜酸性粒細胞（eosinophil，EOS）增多，而嗜酸粒細胞氣道炎癥預示著患者對吸入性或系統性糖皮質激素反應良好，與預后改善有關[3]。 呼出氣一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide，FeNO）由 EOS、中性粒細胞等產生，是氣道炎癥情況的靈敏檢測指標[4]。 免疫球蛋白 E（immuneglobulin E，IgE）是介導超敏反應的介質，研究表明，氣道高反應性、超敏反應可能是AECOPD 患者糖皮質激素有效治療的重要基礎[5]。目前尚未見有關AECOPD 患者外周血EOS 與FeNO、IgE 的關系研究，本研究分析AECO PD 患者外周血 EOS%與 FeNO、IgE 的相關性，探討其意義，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇 2017 年 1 月-2018 年 3 月本院收治的83 例AECOPD 患者作為病例組， 男56例，女 27 例，年齡 42～76 歲，平均年齡 60.53±11.81歲，其中全身炎癥表型45 例，頻發急性加重表型38 例。納入標準：⑴均符合慢性阻塞性肺疾病診斷標準[6]；⑵呼吸道癥狀急性加重；⑶患者及家屬知情并自愿參與;⑷經醫院倫理委員會批準。 排除標準：⑴因AECOPD 再次住院者；⑵支氣管哮喘、肺結核、肺炎、肺癌等其他肺部疾病；⑶合并心臟、腎臟、肝臟等其他臟器慢性疾病；⑷合并自身免疫系統及血液系統疾病; ⑸近期內使用過糖皮質激素。另選擇 50 例健康者為對照組，男 32 例，女 18 例，年齡 40～80 歲，平均年齡 61.15±12.76 歲。 兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義（P＜0.05）。

1.2 方法

1.2.1 外周血EOS 和IgE 檢測 采集患者外周血5 ml，分成兩份：一份采用流式細胞術檢測EOS，方法:加入 4～10mol/L 茶堿、4～10mol/L 地塞米松中，37℃下預處理 24h， 然后加入 20μl CD16 PEmAb 和20μl CD62L mAb-FITC 中進行雙標記染色，準確找到EOS， 采用FAC SCalibur 流式細胞儀 （美國BD公司）分析EOS 陽性比例。 根據EOS 檢測結果，將患者分為兩組：EOS%≤2%組40 例，EOS%＞2%組43 例，兩組性別、年齡、體重、吸煙史等一般資料比較差異無統計學意義（P＜0.05），最大呼氣第一秒呼出的氣量容積占預估值的百分數（FEV1%）、FEV1與用力肺活量FVC 比值（FEV1/FVC）等一般資料比較差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。另一份離心后收集血清， 采用酶聯免疫吸附法檢測IgE 水平，人IgE ELISA 試劑盒購于上海樊克生物科技有限公司。

1.2.2 FeNO 檢測 采用Niox Mino FeNO 檢測儀檢測患者FeNO，方法參照美國胸科學會/歐洲呼吸學會推薦的FeNO 標準化測定指南。 患者在檢測前1h 禁食、禁水、禁劇烈運動，測定時控制流速50 ml/s，呼出時間 10 s，反應 90 s～100 s 后讀數。

1.3 統計學分析 統計學軟件SPSS22.0 用于統計分析數據，外周血IgE 和FeNO 水平等計量資料用平均數±標準差表示， 兩組比較采用兩獨立樣本t檢驗，死亡率、再住院率等計數資料用百分數表示，組間行 χ2檢驗，Pearson 相關系數（r）法分析 AECOPD 患者外周血 EOS%與 IgE 和 FeNO 的相關性，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

表1 EOS%不同分組臨床資料

2.1 病例組和對照組外周血EOS、IgE 和FeNO 水平 病例組外周血EOS 比例高于對照組，IgE 和FeNO 水平高于對照組， 病例組和對照組外周血EOS、IgE 和 FeNO 水平比較差異有統計學意義（P＜0.05）。 見表2。

2.2 EOS%不同分組IgE 和FeNO 水平 EOS%＞2%組患者外周血IgE 水平高于EOS%≤2%組患者，兩組外周血IgE 水平比較差異有統計學意義 （P＜0.05）； EOS%＞2%組患者外周血 FeNO 水平高于EOS%≤2%組患者，但兩組外周血FeNO 水平比較差異無統計學意義（P＞0.05）。 見表3。

表2 病例組和對照組外周血EOS、IgE 和FeNO 水平比較

2.3 病例組 EOS 與 IgE、FeNO 的關系 病例組外周血EOS%與IgE 水平呈顯著正相關關系(r=0.655，P=0.000)， 與 FeNO 呈顯著正相關關系 (r=0.501，P=0.006)。 見圖1。

表3 EOS%不同分組IgE 和FeNO 水平比較

圖1 病例組EOS%與IgE、FeNO 的相關性

2.4 病例組EOS%與患者預后的關系 83 例AECOPD 患者經治療，死亡8 例，死亡率9.64%，治療后隨訪1 年，再次住院45 例，再次住院率54.22%。其中EOS%≤2%組，死亡7 例，死亡率17.50%，再次住院27 例， 再次住院率67.50%；EOS%＞2%組，死亡1 例，死亡率2.33%，再次住院18 例，再次住院率41.86%。 EOS%≤2%組死亡率和再次住院率均高于EOS%＞2%組，兩組死亡率和再次住院率比較差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

全球COPD 流行病學調查顯示，2010 年全球COPD 患病率為11.7%，其中城市居民患病率13.6%高于農村居民9.7%， 成年男性總患病率14.3 %高于女性7.6%，預計至2020 年COPD 將上升成為全球疾病死因的第三位[7]。 COPD 急性加重對患者肺功能、疾病進展產生嚴重不良影響，是COPD 患者死亡的重要原因。 以往研究表明，AECOPD 與中性粒細胞性炎癥有關，近年來研究發現，10%～45%的AECOPD 患者存在嗜酸粒細胞性炎癥， 且誘導痰EOS 增多與患者吸入糖皮質激素治療效果有關[8，9]。 但臨床上誘導痰 EOS 檢測不適合誘導咳痰困難、呼吸困難患者，存在一定局限性。 外周血EOS便于檢測， 研究報道，AECOPD 患者外周血EOS%≥2%預測誘導痰EOC≥3%的ROC 曲線下面積為0.85，敏感性為90%，特異性為60%，證實外周血EOS 能夠高效識別 AECOPD 患者嗜酸性炎癥[10，11]。

氣道慢性炎癥反應是COPD 進展的重要原因之一， 炎癥反應過程中T 淋巴細胞分泌白細胞介素，可調節氣道IgE 和EOS，產生氣道高反應，同時B 淋巴細胞產生 IgE 可使 EOS 活化[12，13]。 IgE 是淋巴細胞等與變應原接觸后，引發漿細胞反應而產生的免疫球蛋白，IgE 升高提示過敏性反應。COPD 急性發作時，多種細胞在肺部感染因子的刺激下過表達誘導型一氧化氮合成酶， 導致一氧化氮合成增多，造成氣道炎癥及組織損傷，研究表明，FeNO 是評估氣道嗜酸性炎癥的臨床指標[14]。 本研究結果，AECOPD 患者外周血 EOS%、IgE 和 FeNO 均顯著高于對照組，證實 AECOPD 患者 EOS、IgE 和 FeNO增多，與以往研究結果一致。 本研究根據外周血E OS%將AECOPD 患者分為兩組，EOS%＞2%組患者外周血IgE 顯著高于EOS%≤2%組患者，FeNO 高于EOS%≤2%組但差異無統計學意義。 病毒等病原體刺激機體，引起漿細胞分泌IgE 可作用于肥大細胞，使其脫顆粒產生白三烯、組胺等炎性介質，并使EOS 增多，機體處于致敏狀態。當機體再次受到變應原刺激后，EOS 活化產生氣道高反應、呼吸困難、 咳嗽加劇等。 本研究相關性分析顯示，AECOPD 患者外周血EOS%與IgE、FeNO 分別呈顯著正相關關系。

臨床研究表明，EOS 減少標志著COPD 患者細菌感染強度增加，與COPD 急性期患者預后不良有關[15]。 何浪濤等研究報道，EOS 減少與AECOPD患者病死率、 再入院率及機械通氣率增加有關[16]。提示EOS 可用于預測AECOPD 患者預后。 本研究結果，AECOPD 患者外周血EOS%≤2%組，治療期間死亡發生率17.50%，治療后再次住院率67.50%，而EOS%＞2%患者，治療期間死亡發生率2.33%，再次住院率41.86%，EOS%≤2%患者死亡率和再次住院率均顯著高于EOS%＞2%患者， 與何浪濤、張瑩瑩等研究結果一致[17]。越來越多的研究證實，EOS水平與COPD 患者病情嚴重程度有關。 George 等研究表明，EOS 計數在穩定期和急性期COPD 患者之間存在明顯差異， 痰EOS 增多患者表現出對皮質類固醇治療的良好反應[18]。 吳艷等研究報道，血EOS 增多的AECOPD 患者對糖皮質激素治療反應較快， 血EOS 檢查有助于對患者病情進行分層，以優化治療方案，提高治療效率[19]。

綜上所述，AECOPD 患者外周血EOS 比例升高，IgE 和 FeNO 水平升高， 且 EOS 比例與 IgE 和FeNO 水平呈顯著正相關關系，提示AECOPD 患者嗜酸粒細胞性炎癥水平可能與氣道炎癥反應、過敏反應有關。 高EOS 比例患者對糖皮質激素等治療反應增強，可有效降低氣道炎癥和過敏反應，改善預后，降低AECOPD 患者死亡率和再入院率。本研究不足之處在于納入樣本量較少，未進行綜合因素分析，下一步將繼續擴大樣本量，探討外周血EO S 水平在COPD 進展中的意義，及對AECOPD 患者臨床治療的指導意義。