新生兒ABO 溶血病試驗結果與日齡的關系分析

薛雷，王俊杰，軒海華

（周口市中心醫院輸血科，河南 周口 46600）

新生兒溶血病 （hemolytic disease of newborn，HDN） 是指由于母嬰血型不合引起胎兒或新生兒的免疫性溶血性疾病。孕婦的IgG 血型抗體經胎盤進入胎兒血液循環， 與胎兒紅細胞表面抗原相結合，最后這些抗體致敏的紅細胞被單核吞噬細胞系統破壞，引起胎兒貧血、水腫、死胎、早產及新生兒溶血病[1，2]。 目前臨床應用最廣的 HDN 診斷試驗主要為新生兒溶血病三項試驗，包括直接抗人球蛋白試驗、游離試驗和抗體釋放試驗[3]。 隨著患兒日齡的增加，單核吞噬細胞系統對致敏紅細胞的破壞，血漿中膽紅素升高，紅細胞減少，不同的采樣時間，血清學試驗將會有完全不同的結果[4]。 在臨床工作中， 我們發現有些新生兒溶血篩查試驗標本送檢時，新生兒日齡已達到10 天以上。為了分析日齡對新生兒溶血篩查血清學三項試驗結果特別是對有著確診意義的抗體放散結果的影響，我們對科室近兩年來收到的新生兒ABO 溶血篩查試驗標本進行了篩選和分類，報告如下。

1 對象與方法

1.1 對象

1.1.1 研究對象 2016 年 6 月到 2018 年 8 月我科室收到的臨床診斷高膽紅素血癥且母嬰ABO 血型不合RhD 均為陽性的送檢標本756 例。 由于患兒年齡太小，再次抽取標本依從性差，我們與我院檢驗科血常規室合作，從2016 年6 月到2018 年8 月送檢血常規標本中篩選出符合條件標本146 例。篩選條件： 新生兒且在我科ABO 溶血篩查試驗中確診。 以上標本均為 EDTA-K2 抗凝全血 2～3ml。

1.1.2 試劑與儀器 抗A 抗B 血型正定型試劑、人ABO 血型反定型用紅細胞試劑盒、RhD（IgM）血型定型試劑均來自上海血液醫藥有限公司，抗人球蛋白檢測卡來自長春博迅生物技術有限責任公司。以上試劑均在有效期內使用。 恒豐HH-W 恒溫水浴箱、BASO2005-1 離心機等。

1.2 方法

1.2.1 新生兒血型鑒定及ABO 溶血篩查 試驗參照《輸血技術操作規程》[5]采用抗人球蛋白檢測卡進行檢測。

1.2.2 新生兒ABO 溶血病確診標準[6]⑴母嬰AB O 血型不合； ⑵新生兒早期出現高膽紅素血癥；⑶直接抗人球蛋白試驗和（或）紅細胞抗體釋放試驗陽性。 滿足上述三項者即可確診。

1.2.3 統計方法 運用SPSS20.0 統計軟件進行計算， 組間比較采用卡方檢驗，P＜0.05 顯示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同日齡組患兒HDN 陽性率及差異 符合篩選條件標本 756 例， 確診 HDN453 例， 陽性率59.9%。 新生兒日齡≤7d 組天陽性率為39.0%；新生兒日齡 8～10d 組陽性率 17.3%； 新生兒日齡＞10d 組陽性率3.6%。不同日齡組的HDN 陽性率有著顯著差異（日齡＞10d 組與日齡≤7d 組比較，χ2=346.042，P＜0.05; 日齡＞10d 組與日齡 7～10d 組比較，χ2=82.916，P＜0.05）。 見表1。

表1 不同日齡組患兒溶血三項試驗結果及各組HDN 陽性率

新生兒日齡≤7d 組內陽性率85.5%。 新生兒日齡7～10d 組內陽性率47.5%。 新生兒日齡＞10d組內陽性率20.0%。 隨著日齡的增長，HDN 陽性率呈快速下降趨勢。 見表2。

表2 不同日齡組患兒HDN 確診例數及各組內陽性率

2.2 不同日齡組患兒再次確診HDN 陽性率及差異146 例符合篩選條件患兒再次進行新生兒ABO 溶血篩查試驗，不同日齡組的HDN 陽性率有著顯著差異，見表3。 日齡＞10d 組與日齡≤7d 組比較，χ2=9.403，P＜0.05; 日齡＞10d 組與日齡 7-10d 組比較，χ2=13.156，P＜0.05。 見表3。

表3 不同日齡組患兒再次確診HDN 例數及各組內陽性率

3 討論

HDN 可有多種原因引起，其中母嬰ABO 血型不合最為常見。 HDN 的確診依賴于血清學的三項試驗即直抗試驗、抗體游離試驗、抗體釋放試驗[7]。游離試驗用于檢測患兒血清中來自母體的血型抗體，由于未致敏紅細胞，只能作為診斷HDN 的參考條件。 直抗試驗和抗體釋放試驗主要檢測患兒紅細胞是否被來自母體的抗體所致敏。 但由于新生兒紅細胞上的抗原發育尚未成熟，結合位點少，密度低，導致直抗試驗敏感性較低[8]。 抗體釋放試驗實質是直接抗人球蛋白試驗的放大實驗，也是判定HDN 最有力的證據，抗體釋放試驗出現陽性結果，理論上即可明確HDN 診斷[9]。 我們的試驗也是將抗體釋放試驗作為HDN 的確診試驗。 本報告中母嬰ABO 血型不合標本756 例，確診453 例，陽性率為59.9%，這與郭瑩瑩等報道[10]一致。

血樣的采集時間與HDN 的陽性率存在密切相關，日齡越小，陽性率越高[11]。本報告顯示新生兒日齡≤7d、8～10d、＞10d 的三組患兒，HDN 陽性率分別為：39.0%、17.3%、3.6%。

不同日齡組內的新生兒HDN 陽性率隨著日齡的增加則快速地下降。 本報告顯示新生兒日齡≤7d、8～10d、＞10d 的三組患兒， 其組內的 HDN陽性率分別為：85.5%、47.5%、20%。

本報告中已經確診HDN 的新生兒再次進行溶血三項試驗時，結果也存在著因日齡的增加而產生的不同。 146 例已經確診HDN 的新生兒再次進行新生兒ABO 溶血篩查試驗時，確診 119 例，陽性率為 81.5%。 新生兒日齡≤7d、8～10d、＞10d 的三組患兒， 再次試驗時其組內的HDN 陽性率分別為：100%、92.9%、66.7%。 因此對于日齡＞10d 的患兒ABO 溶血篩查三項試驗結果陰性時，一定要結合臨床表現，不能輕易排除新生兒ABO 溶血病。

新生兒溶血病患兒多伴有貧血，少數高危患兒會出現膽紅素腦病等危及生命的嚴重并發癥。 而且新生兒貧血可導致患兒發育遲緩，易患感染性疾病，增加死亡風險[12]。 而ABO 新生兒溶血的早期診斷能夠指導臨床上及時進行藍光治療，改善高膽紅素血癥表現，降低多器官損害并發癥的發生[13，14]。 因此臨床醫生應加強意識，對疑似新生兒溶血病的患兒應盡早采集標本，及時送檢，以提高新生兒溶血病的檢出率[15]。 達到早診斷、早發現、早治療的目的，盡力減少HDN 對患兒的危害。