4 例ABO 正反定型不一致原因分析

盛梅芳，朱輝，王長奇，胡樂君，熊慧瑩，鄧逸群

(樂平第二醫(yī)院，江西 樂平 333300）

ABO 血型系統(tǒng)在臨床輸血中具有非常重要的意義，正確的血型鑒定是保證臨床輸血安全的首要條件[1，2]。 許多原因可致血型鑒定正反定型不一致，影響血型判定。 ABO 血型鑒定傳統(tǒng)的血清學(xué)方法包括正反定型試驗、吸收放散試驗和唾液血型物質(zhì)中和抑制試驗等[3]。在實際工作中，需要分析出現(xiàn)正反定型不一致原因，通過相應(yīng)的處理措施得到正確的血型結(jié)果。 現(xiàn)將本院正反定型不一致的4 例標(biāo)本進(jìn)行分析，報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 例 1，例 2，男，46，52 歲，江西樂平人，均患多發(fā)性骨髓瘤（MM）已有 3～4 年，現(xiàn)全身皮膚水腫，骨髓涂片顯示有16% 和25%骨髓瘤細(xì)胞，符合MM 改變，在免疫固定電泳中檢出γ 區(qū) M成分，IgG 型。尿本周氏蛋白陰性。例 3，例 4，女，72，80歲，江西樂平人，例3 患左股骨粗粉碎性骨折，例4右股骨頸骨折而入院，過去患慢性支氣管炎，阻塞性肺氣腫，經(jīng)手術(shù)治療輸血。

1.2 材料 RhD 單克隆抗體試劑（批號20160323）、抗篩細(xì)胞和抗人球蛋白試劑（產(chǎn)品批號20160807）和ABO 血型反定型細(xì)胞（批號20160901）由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供。 抗A、抗B 標(biāo)準(zhǔn)血清(批號2016043001)由北京金豪制藥股份公司提供。ABO、RhD 血型定型檢測卡（單克隆抗體）批號為20160401、抗人球蛋白檢測卡(不規(guī)則抗體)批號為20160205 和抗人球蛋白檢測卡（交叉配血）批號為20160411， 由長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供。

1.3 方法 每例抽取EDTA-K2 抗凝全血標(biāo)本4ml，不抗凝標(biāo)本3ml，要求無溶血的新鮮標(biāo)本。 ABO 血型正、反定型采用試管法及微柱凝膠法，試管法加做正反定型加強性實驗[4，5]。 不規(guī)則抗體篩查、直接抗球蛋白試驗、交叉配血試驗采用微柱凝膠法，當(dāng)進(jìn)行血型鑒定及交叉配血時， 出現(xiàn)血型正反定型不符及交叉配血不合樣本時結(jié)合加強性試驗分析樣本正確血型。

2 結(jié)果

2.1 微柱凝膠法血型結(jié)果 例1～4 均為正定型為A 型，反定型為AB 型，正反定型不一致。 見表1。

表1 4 例正反定型血型結(jié)果

2.2 試管法血型結(jié)果 例1、2 均為試管法正定型為A 型，反定型顯微鏡鏡下可見A1、O 紅細(xì)胞呈緡錢狀凝集，加生理鹽水后凝集散開[6]。 例 3、4 試管法正定型為A 型，反定型顯微鏡鏡下可見A1、O 紅細(xì)胞呈聚集趨勢，加生理鹽水后凝集散開血型鑒定均為A 型。

2.3 試管法正反定型加強性實驗 結(jié)果四例均為抗-A 血清和患者紅細(xì)胞懸液成4+強陽性，例1 例2 患者血漿和B 紅細(xì)胞懸液成2+陽性， 例3 例4，患者血漿和B 紅細(xì)胞懸液成3+陽性， 患者血漿和A 紅細(xì)胞都為陰性。

表2 正反定型加強性實驗結(jié)果

2.4 4 例不規(guī)則抗體篩查 直接抗球蛋白試驗、交叉配血試驗、直抗及抗篩采用微柱凝膠卡，直抗均為陰性，抗篩篩查結(jié)果均陰性。 交叉配血試驗采用微柱凝膠法及試管抗人球蛋白法， 采用ABO 同型配血，微柱凝膠法交叉配血主側(cè)、次側(cè)均陰性，試管抗人球蛋白法交叉配血主次側(cè)均相合。 四例微柱凝膠法配血結(jié)果，見圖1。

圖1 4 例微柱凝膠法配血結(jié)果

2.5 采取增強抗原抗體反應(yīng)的技術(shù) 采取增強抗原抗體反應(yīng)的技術(shù)，加大血清量、置4℃增強反應(yīng)，用O 型紅細(xì)胞或自身細(xì)胞作為陰性對照[7]，均能做出正確判斷，見圖2、圖3。

圖2 未加大血清量圖

圖3 加大血清量，置4℃增強反應(yīng)圖

2.6 輸血情況 例1～4 患者均當(dāng)天輸注A 型去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞2U， 輸血后紅細(xì)胞總數(shù)和血紅蛋白均有上升，證明輸血有效。 見表3。

3 討論

輸血目前已成為現(xiàn)代醫(yī)療中救治的重要手段之一，特別是對于一些先天原因、外傷等造成的血液成分缺乏，輸血是有效的治療措施。 正確鑒定紅細(xì)胞血型是確保輸血安全的先決條件。

表3 輸血前后實驗室結(jié)果變化

本文中， 例 1 例 2 是 MM ，MM 是一種惡性漿細(xì)胞病，分泌異常單克隆免疫球蛋白（M 蛋白)，使血清蛋白濃度異常，可使紅細(xì)胞呈緡錢狀而產(chǎn)生假凝集，干擾血型鑒定及交叉配血[8，9]。 一些 MM 患者缺乏相對應(yīng)的血型抗體，可能是因正常免疫球蛋白和特異性抗體水平明顯下降所致。抗-A 或抗-B 特異性僅僅與M 蛋白的某一部分有關(guān)， 并不是每例出現(xiàn)M 蛋白單克隆株峰的MM 患者都缺乏抗-A或抗-B。 本文患者即是這種情況，出現(xiàn)血型抗體減少或缺乏。 微柱凝膠卡血型鑒定及交叉配血的局限性在于其無法對血清蛋白紊亂引起的血型正反定型不符及交叉配血進(jìn)行鑒定。MM 患者由于血液中各種免疫球蛋白成分的影響導(dǎo)致ABO 血型鑒定困難，主要原因是患者抗體減弱。 故在輸血科工作中，除了要求操作者要有責(zé)任心外，還應(yīng)掌握常見的血型血清學(xué)技術(shù)，包括手工試管抗人球蛋白法，以排除各種干擾因素，對臨床可疑標(biāo)本進(jìn)行準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配血。

本文例3 例4 抗體減弱或缺失主要見于老年患者。 老年人隨年齡增加其抗體水平會逐漸減弱[10]，作者采取增強抗原抗體反應(yīng)的技術(shù)，如加大血清量、置4℃增強反應(yīng)等，把O 型紅細(xì)胞或自身細(xì)胞作為陰性對照，也能做出正確判斷。 反定型出現(xiàn)假陰性，與反定型細(xì)胞B 抗原太弱和患者抗-A 效價太低有關(guān)。

綜上所述， 正確鑒定ABO 血型在提高臨床輸血安全方面有著重要意義。 當(dāng)血型鑒定出現(xiàn)正反定型不一致時，首先應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行復(fù)查試驗，在排除人為因素和技術(shù)因素后，根據(jù)出現(xiàn)的問題分析原因并采取相應(yīng)處理措施，正確鑒定血型及得出準(zhǔn)確的配血結(jié)果，以保證臨床輸血安全。