血培養(yǎng)雙側(cè)雙瓶送檢對(duì)病原菌和污染菌判斷的應(yīng)用價(jià)值探討

古旭東 薛春玲 羅科城

（河源市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 廣東 河源 517000）

血培養(yǎng)是臨床上診斷血流微生物感染的關(guān)鍵性指標(biāo)，也是重癥感染、敗血癥等病癥確診的常用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)。血培養(yǎng)陽(yáng)性樣本內(nèi)微生物的檢測(cè)數(shù)據(jù)是臨床疾病診斷的參考性參數(shù)，會(huì)對(duì)醫(yī)生的診斷產(chǎn)生極大影響，并因此影響患者治療效果[1]。通常來(lái)說(shuō)，能夠由血培養(yǎng)內(nèi)進(jìn)行分離，并因此獲得真正菌血癥或真菌血癥的病原菌。但是在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中，血培養(yǎng)污染菌的比重相對(duì)較大，這就會(huì)使得實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的成本提升，極大地影響診斷質(zhì)量。凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）是臨床上一種常見(jiàn)的病原菌，可是因?yàn)槠涫瞧つw的正常菌群，在采樣期間，被污染的幾率相對(duì)較高，因此也是一種出現(xiàn)幾率相對(duì)較高的血培養(yǎng)污染菌?，F(xiàn)今，學(xué)界并未研究出有效的方法來(lái)鑒別CNS 是否為致病菌，或是污染菌[2]。鑒于此，本研究以本院近12 個(gè)月內(nèi)血培養(yǎng)病原菌為例，采取回顧性分析的方式，分析污染菌有關(guān)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)技術(shù)的可實(shí)施性與實(shí)際運(yùn)用效果。

1.資料與方法

1.1 一般資料

標(biāo)本血培養(yǎng)選自2018 年某醫(yī)科大學(xué)住院患者。

1.2 儀器

山東鑫科LABSTAREX 自動(dòng)血液細(xì)菌培養(yǎng)儀及配套血瓶，梅里埃BACT/ALERT3D60 自動(dòng)血液細(xì)菌培養(yǎng)儀，MicroScanWalkAway96全自動(dòng)細(xì)菌鑒定/藥敏測(cè)試系統(tǒng)及配套上機(jī)板。質(zhì)控菌株：ATCC25922 大腸埃希菌；ATCC27853 銅綠假單胞菌；ATCC25923 金黃色葡萄球菌；ATCC29212 糞腸球菌等[3]。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集與處理 在無(wú)菌條件下獲得血樣本之后，要及時(shí)將其注至血培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，并進(jìn)行編號(hào)，在血培養(yǎng)儀中完成培養(yǎng)處理，培養(yǎng)瓶中微生物會(huì)進(jìn)行生長(zhǎng)代謝，并且代謝后的CO2會(huì)充斥培養(yǎng)基內(nèi)，和含熒光染料的感應(yīng)器之間會(huì)產(chǎn)生反應(yīng)，導(dǎo)致其中的熒光物質(zhì)出現(xiàn)相應(yīng)變化，并產(chǎn)生熒光現(xiàn)象，若是設(shè)備的光源檢測(cè)到這種現(xiàn)象，就能夠根據(jù)相關(guān)運(yùn)算方法，判斷是否達(dá)到陽(yáng)性培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，若是達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，就自動(dòng)觸發(fā)陽(yáng)性警報(bào)。

1.3.2 雙側(cè)雙瓶定義 雙側(cè)雙瓶系指由一個(gè)位置采血，并且將其接種到一套培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，之后由另一位置進(jìn)行采血處理，并將其接種到另一套培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，也就是說(shuō)，一套血培養(yǎng)的構(gòu)成包括需氧瓶及厭氧瓶各一個(gè)。

1.3.3 疑似污染定義 依照CLSI-M47-A 中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)可知，若是檢測(cè)出對(duì)血培養(yǎng)污染的微生物，就應(yīng)該聯(lián)系臨床醫(yī)師，基于患者的體溫、WBC 水平及感染有關(guān)癥狀等信息，有效分析疑似污染菌的可能性。

1.3.4 病原菌鑒定 陽(yáng)性標(biāo)本，若是出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)警，就要立即在血瓊脂平板、中國(guó)藍(lán)平板以及巧克力平板上進(jìn)行接種，還要進(jìn)行涂片行革蘭氏染色、鏡檢等處理，詳細(xì)記錄涂片數(shù)據(jù)，運(yùn)用菌株，嚴(yán)格根據(jù)操作流程完成鑒定與藥敏檢測(cè)，1d 之后將最終報(bào)告的陰性標(biāo)本發(fā)出，并且進(jìn)行5d 的血培養(yǎng)之后，若是還是陰性結(jié)果，就表示沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)[4]。

1.3.5 提示污染菌的實(shí)驗(yàn)室技術(shù) 根據(jù)操作規(guī)程進(jìn)行血培養(yǎng)的采集處理，一些病患以左右臂雙側(cè)雙瓶的方式完成采集工作，單瓶報(bào)警，檢測(cè)之后，分析污染菌的可能性，并在報(bào)告中詳細(xì)贅述，為臨床醫(yī)生的診斷提供可靠數(shù)據(jù)；雙瓶都在2d 內(nèi)報(bào)警，則顯示導(dǎo)致血流感染的病原菌生長(zhǎng)。

2.結(jié)果

根據(jù)表1 顯示，血培養(yǎng)病原菌檢出率中共檢測(cè)血培養(yǎng)標(biāo)本1000 份，陽(yáng)性為份109，陽(yáng)性檢出率為10.90%，其中采用雙側(cè)雙瓶采血的血培養(yǎng)標(biāo)本為90 份，陽(yáng)性為21 份，陽(yáng)性檢出率為23.33%。見(jiàn)表1。

表1 單、雙側(cè)瓶血培養(yǎng)陽(yáng)性檢出率結(jié)果的對(duì)比

3.討論

血培養(yǎng)是敗血癥等判斷的關(guān)鍵性方式及診斷技術(shù)，如今，血流感染是醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)感染及病患死亡的常見(jiàn)原因，血流感染測(cè)定需求也呈現(xiàn)出較為明顯的提升趨勢(shì)[5]。如今，全自動(dòng)血培養(yǎng)儀等設(shè)備已經(jīng)得到廣泛運(yùn)用，血培養(yǎng)陽(yáng)性率也逐漸提升。本組1000 份血培養(yǎng)病例中，奠定病原菌共109 株，檢出率是12.23%。根據(jù)相關(guān)報(bào)道可知，血培養(yǎng)陽(yáng)性樣本內(nèi)病原微生物包括大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌、銅綠假單胞菌等，并且在醫(yī)療機(jī)構(gòu)中并不存在空間及時(shí)間上的集中分布特點(diǎn)，這就表明院內(nèi)感染的可能性相對(duì)較小。

如今臨床上往往針對(duì)住院患者及危重癥病患廣泛運(yùn)用廣譜抗生素，再加上常常運(yùn)用侵襲性治療方式，這就導(dǎo)致CNS 發(fā)生率提升[6]。此外，CNS 同樣是血培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)幾率最高的污染菌，在血液樣本采集期間，人體皮膚的正常菌群被攜帶的幾率相對(duì)較高，這就會(huì)使得血培養(yǎng)呈現(xiàn)出陽(yáng)性的結(jié)果；留置導(dǎo)管同樣會(huì)使得血培養(yǎng)污染幾率提升；CNS 能夠生成黏滯物，并因此于醫(yī)療設(shè)備的表層產(chǎn)生生物膜，若是不能科學(xué)地開(kāi)展消毒工作，血標(biāo)本污染幾率也會(huì)顯著提升。所以，研究出一種科學(xué)、有效的技術(shù)，判斷CNS 屬于致病菌還是污染菌非常重要。本研究的樣本數(shù)量為1000 份，其中21 份的最終檢查結(jié)果是病原菌，而接受雙側(cè)雙瓶血液樣本采集的樣本共90 份，因此檢出率是23.33%，明顯高于單瓶血培養(yǎng)樣本。陽(yáng)性血培養(yǎng)內(nèi)，凝固酶陰性葡萄球菌檢出率為22.7%，而單瓶報(bào)警檢出率為18.1%，相對(duì)于雙瓶報(bào)警方式而言明顯較高，而若是采取雙臂血液樣本采集的方式，若是陽(yáng)性結(jié)果中僅有一瓶樣本，而另一瓶樣本5d 的時(shí)間內(nèi)都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)細(xì)菌存在的現(xiàn)象，這就表明單瓶血培養(yǎng)內(nèi)測(cè)定的CNS 結(jié)果,有很大概率是樣本采集等操作內(nèi)所產(chǎn)生的污染菌，因此臨床工作者務(wù)必聯(lián)系病患的實(shí)際癥狀展開(kāi)評(píng)估，還要依照現(xiàn)有資料進(jìn)行分析。此外，針對(duì)血培養(yǎng)報(bào)警時(shí)長(zhǎng)進(jìn)行分析，能夠?yàn)樵\斷結(jié)果提供一定參考，這是因?yàn)榫Y的陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間若是明顯短于污染現(xiàn)象，通常都會(huì)引發(fā)48h 內(nèi)血培養(yǎng)陽(yáng)性報(bào)警的事件，若是報(bào)警事件超出48h，那么極有可能就是污染菌，但是此種判斷方式僅在排除真菌性菌血癥之后具備一定參考性[7]。

怎樣提升血培養(yǎng)陽(yáng)性率，使得實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的準(zhǔn)確率以及效率得到提升，是當(dāng)前學(xué)界關(guān)注的重點(diǎn)問(wèn)題?，F(xiàn)今，鑒定致病菌與污染菌的檢測(cè)技術(shù)并不完善，如果運(yùn)用全套的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)針對(duì)污染菌展開(kāi)檢驗(yàn)，會(huì)使得實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)員的工作量加重，并且會(huì)顯著提升經(jīng)濟(jì)成本，所以，應(yīng)該運(yùn)用科學(xué)的檢測(cè)技術(shù)，并且結(jié)合患者的實(shí)際情況進(jìn)行系統(tǒng)性評(píng)估[8]。運(yùn)用雙側(cè)雙瓶的樣本采集方式，并且在48h 內(nèi)完成陽(yáng)性報(bào)警的鑒定任務(wù)，構(gòu)建科學(xué)的血培養(yǎng)三級(jí)報(bào)告機(jī)制，是一種較為科學(xué)且便捷的檢測(cè)技術(shù)，具備較大的可行性，易推廣[9]?？墒?，單單憑借上述兩點(diǎn)來(lái)確診CNS 菌血癥，可信度相對(duì)較低，并且根據(jù)有關(guān)報(bào)道可知，48h內(nèi)血培養(yǎng)陽(yáng)性的樣本中包括35.8%的污染菌，并且48h 之后均為污染菌。所以，CNS 菌血癥務(wù)必結(jié)合臨床、流行病學(xué)與微生物學(xué)等信息及資料進(jìn)行診斷[10]。

終上所述，雙側(cè)雙瓶樣本采集技術(shù)能夠使得陽(yáng)性檢出率及污染菌判斷的準(zhǔn)確性明顯優(yōu)化，提升實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)的正確性，為患者的臨床治療提供有效保障。