


生乳(原料乳)是乳制品的基礎原料,一般情況下,生乳中的微生物主要是一些無害的細菌,但在后續的成品生產過程仍需經殺菌處理。因此,《食品安全國家標準 生乳》(GB 19301-2010)中并沒有規定生乳的致病菌檢測標準,僅要求菌落總數限量≤2×106cfu/mL(g)。
實際上,監控食品中微生物的種類有利于尋找污染源頭,把控產品質量。在常見的微生物種類中,芽孢桿菌屬廣泛存在于牧場環境和動物飼料中,故在生乳中的檢出頻率較高。其中,部分致病菌會產生非常耐熱的毒素。以蠟樣芽孢桿菌為例,其芽孢需在100℃的高溫下持續20min以上才能被殺死。同時,蠟樣芽孢桿菌是條件致病菌,且產生腸毒素的條件較為苛刻,大多數情況下菌量保持在較高水平,即≥105CFU/mL(g)【《蠟樣芽胞桿菌食物中毒診斷標準及處理原則》(WS/T 82-1996)】,少數情況下較低菌量也會引起食物中毒。由于生乳營養豐富,且在適宜溫度(28~35℃)下極易使蠟樣芽孢桿菌大量生長繁殖,因此,將該菌的檢測納入風險監控對保證乳品安全具有重要意義。
目前,生乳中蠟樣芽孢桿菌的檢測主要有如下兩項難點。
1 MYP平板中的菌落容易蔓延
《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 蠟樣芽胞桿菌檢驗》(GB 4789.14-2014)選用甘露醇卵黃多粘菌素(MYP)培養基,其中的典型菌落為微粉紅色(表示不發酵甘露醇),周圍有白色至淡粉紅色沉淀環(表示產卵磷脂酶),經過純化培養后再進行鏡檢和生化鑒定。
然而,由于MYP特異性較低,且在檢測諸如生乳這種微生物種類及含量均較多的樣品時,卵磷脂酶分解培養基中的卵黃會產生沉淀帶,容易使菌落之間漫延連接,導致部分非目標種類菌發酵甘露醇將整個平板“染成”黃色,進而難以鑒定和計數,致使不能準確出具檢測報告。……