細(xì)腳蟲草多糖液體發(fā)酵及分離純化工藝研究

王小愛 梁建東 高小嬌蔡遠(yuǎn)俊 秦宇蒙 田維毅

(1. 貴州中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；2. 貴州中醫(yī)藥大學(xué)菌物藥研究中心，貴州 貴陽 550025)

細(xì)腳蟲草[Cordycepstenuipes(Peck) Kepler, B. Shrestha & Spatafora]為蟲草菌科蟲草菌屬，其同物異名包括高雄山蟲草(Cordycepstakaomontana)、細(xì)腳棒束孢(Isariatenuipes)、細(xì)腳擬青霉(Paecilomycestenuipes)[1]，在日本和韓國已被開發(fā)成保健食品[2]。多糖是細(xì)腳蟲草的主要生物活性成分之一[3]，具有抗腫瘤、抗抑郁、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫等生物活性[4]。根據(jù)其存在位置可分為胞內(nèi)多糖(從菌絲體或子實體中獲取)和胞外多糖(從發(fā)酵液中獲取)[5]。目前，國內(nèi)外對于細(xì)腳蟲草多糖化學(xué)結(jié)構(gòu)、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用等已有相關(guān)報道[6-9]，但對細(xì)腳蟲草多糖提取工藝優(yōu)化方面報道較少，有學(xué)者[10]利用神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)—遺傳算法優(yōu)化細(xì)腳擬青霉胞內(nèi)多糖超聲提取工藝，但多糖提取效率較低，最高僅有2.37%。而蟲草多糖常用的提取方法有水提醇沉法、超聲波輔助提取法和微波提取法等[11-12]，其中最常用的方法為水提醇沉法，具有操作簡單、成本低、對多糖的破壞性較小等優(yōu)點。

研究擬采用水提醇沉法提取細(xì)腳蟲草多糖，對蟲草多糖的發(fā)酵工藝、水提醇沉工藝及脫蛋白工藝進(jìn)行優(yōu)化，以期為細(xì)腳蟲草有效成分的研究及開發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 菌種

細(xì)腳蟲草：課題組分離自野外采集的標(biāo)本，經(jīng)鑒定后保藏在貴州中醫(yī)藥大學(xué)菌物藥研究中心，菌種號A1721。

1.1.2 試劑

葡萄糖：分析純，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)網(wǎng)；

硫酸：分析純，重慶川動化工集團(tuán)有限公司；

苯酚：分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；……