兔肺炎雙球菌病的研究進展

逯 勇

（南召縣動物疫病預防控制中心，河南 南召 474650）

1 病原學

兔肺炎雙球菌病的病原是鏈球菌科，鏈球菌屬的肺炎雙球菌，肺炎雙球菌屬于格蘭氏陽性菌陽性菌，有莢膜，無芽孢，不能自由運動，在光學顯微鏡下，大部分肺炎雙球菌的形狀似瓜子，多數情況下成對排列。肺炎雙球菌的生長條件也非常高，在人工培養的條件下需要在培養基中添加血液、血清和葡萄糖等基本物質。肺炎雙球菌屬于兼性厭氧菌，有研究表明此菌在5%的二氧化碳中可以生長的很好，培養出來的菌落多數情況下呈灰白色，半透明、光滑濕潤、凸起、針尖狀的圓形菌落，當培養時間超過24小時的時候，菌落呈扁平狀。肺炎雙球菌有溶血的特性，在鮮血的培養基上可以很好地生長，并形成草綠色的溶血環，肺炎雙球菌對環境的抵抗力非常弱，當溫度升高到 56℃，15到30min的時間即可以殺死該菌。此外，一般的化學消毒劑如漂白粉、苯酚等對該均均具有殺菌作用。但是肺炎雙球菌對干燥的環境有一定的抵抗力。

2 流行病學

兔肺炎雙球菌病是由肺炎雙球菌引起的兔的一種呼吸道疾病，肺炎雙球菌病的臨床癥狀主要是體溫升高，咳嗽，流鼻涕和突然死亡。該病沒有明顯的季節性，一年四季均可發生，但是在冬季和春季多為散發。主要是因為在這個時間段，氣候條件發生了明顯的變化，兔的整體抵抗力下降很大，兔的上呼吸道常在菌，尤其是肺炎雙球菌會大量的繁殖，從而使兔發生內源性感染。該病的傳染源主要是患病的兔，帶菌的兔以及嚙齒類動物。傳播媒介主要是被污染的飼料、墊料、籠具、和空氣。本病對于兔沒有種屬和年齡的差異，也就是說不同品種、不同年齡段的兔均已感染本病，其中抵抗力較弱的仔兔、幼兔和懷孕的母兔最易感。肺炎雙球菌多為散發或者地方流行性，多數感染病例屬于最急性型，本病發病急、傳播快、死亡率高，給我國的養兔業造成很大的經濟損失。

3 致病機制

肺炎雙球菌在自然界當中廣泛存在，在健康人和動物的呼吸道當中均有寄生，屬于條件性致病菌，大部分肺炎雙球菌沒有致病性，少數具有致病性。有研究發現，在健康的人群當中，有40%以上的人上呼吸道和多數動物的咽喉部有肺炎雙球菌的寄生，人和動物均可以感染肺炎雙球菌，但是小于5周歲或者大于65周歲的人感染率會更高一些。當機體的免疫力低下的時候，肺炎雙球菌可以從定植的部位直接達到感染的部位，引起中耳炎、鼻炎和支氣管炎，還可以進入到血液循環系統，引起敗血癥。

4 危害

有調查顯示，肺炎雙球菌具有廣泛的宿主，可以感染很多種動物，如豬，羊，兔，狐貍大熊貓等多種動物。肺炎雙球菌的侵襲部位主要是上呼吸道，從上呼吸道的黏膜入侵下行到肺組織或者血液當中，會引起細菌性肺炎或者敗血癥，少數的病例中有中耳炎、腦膜炎和乳房炎的癥狀。肺炎雙球菌的易感動物大多數為幼齡動物和懷孕動物，幼齡動物發病后長表現為急性肺炎、敗血癥和急性腸炎；懷孕動物發病后常引起動物的流產和死胎。關于肺炎雙球菌的報道最早是在1955年，在一例仔羊中發現的。1993年我國科研人員在湖北省嘉裕縣發現了多種動物均可以感染肺炎雙球菌，且有的地區呈爆發性流行。隨后的幾年當中，我國各個地區均有肺炎雙球菌的報道并呈現爆發性流行。

5 檢測方法

兔肺炎雙球菌病可以通過典型的臨床癥狀和病例變化進行初步的判定，但是在生產實踐當中，由諸多因素會造成患病兔有很多種臨床癥狀、混合感染以及繼發感染的情況，因此，要想確診還需要通過實驗室進行檢測。

5.1 病原學檢測

根據肺炎雙球菌的培養特性，無菌采集組織器官，分泌物以及血液，用鮮血培養基進行培養，選取菌落進行染色鏡檢，根據顯微鏡下肺炎雙球菌的形態特征即可判定。在上個世紀初期，國外學者首次報道了奧卜托新可以區分肺炎雙球菌和其他α-溶血性鏈球菌，直到50年代，實驗室才開始普遍將這種鑒定方法應用起來。隨著科學的發展，其后的研發當中，對于傳統的病原學檢測方法不斷的進行改進，雖然這些方法簡單，易操作，廉價，但是病原的檢出率不高，因此，臨床上并沒有很大的應用。

5.2 酶聯免疫吸附實驗

該實驗又被簡稱為ELISA實驗，是一種應用較為廣泛的免疫學檢測方法，它的敏感性和特異性都非常高。常用的ELISA實驗主要有兩種，也即是PsaA-ELISA實驗和PLYELISA實驗。前者是采用天然的或者重組得到的肺炎雙球菌表面黏附素制備的免疫球蛋白做ELISA實驗來檢測血漿、腦脊液和尿液等標本中是否有肺炎雙球菌。后者是用天然的或者重組的肺炎雙球菌溶血素制備的免疫球蛋白檢測患病動物尿液當中的PLY分子。

5.3 聚合酶鏈式反應（PCR）

聚合酶鏈式反應主要是應用肺炎雙球菌的血清素基因片段作為靶基因進行引物設計和擴增，但是由于個別的α-溶血性鏈球菌也存在該基因的因素，故PCR檢測易出現假陽性。