王 勝,李其松,吳春陽,吳玉龍
(南京新九州農牧科技有限公司 江蘇 南京 211100)
自2018年8月非洲豬瘟首次在中國發現以來,一年多來非洲豬瘟給養豬業造成幾乎毀滅性的打擊,市民們深感菜籃子中豬肉之沉重,豬價及生豬產業的發展多次出現在國家領導人的關注之下。各種鼓勵養豬政策不斷出臺,各大研究院所專家及集團企業發布了諸多的復養方案,復養方案中豬場生物安全的建設都會提高到最為重要的環節,然而在針對非洲豬瘟壓力下,消毒劑的選擇還存在不少謬誤,筆者就非洲豬瘟壓力下豬場的消毒劑選擇作一論述。
非洲豬瘟(ASF)是由非洲豬瘟的病毒(ASFV)感染家豬和野豬引起的一種烈性傳染病。非洲豬瘟病毒在脂質溶劑、洗滌劑、氧化劑里面很容易失活,比如次氯酸鹽和苯酚。如ASFV與2.3%的氯和3%的鄰苯基苯酚,或者合成的碘溶液接觸30min就會失活。其他使ASFV失活的有效措施包括福爾馬林、氫氧化鈉等。總之,肥皂水、洗滌劑、堿性物質對畜舍、器具、衣物、工具、人類居所等消毒非常有效。飛機上的消毒劑推薦使用衛可。被病毒污染的飼料、飲水和肥料應被掩埋或焚燒。被ASFV污染豬糞可用1%氫氧化鈉或氫氧化鈣4 ℃處理3 min或0.5%濃度處理30 min。ASFV在pH 4~10的溶液中比較穩定,但在pH小于4或大于11.5的條件下,并且培養基中不含血清會立刻失活;在25%的含有血清的培養基,且pH為13.4的條件下可以存活數天;5 ℃的血清中可以存活6年以上。非洲豬瘟病毒對溫度敏感,在60 ℃的條件下持續30 min,或者56 ℃持續70 min都能滅活;在豬的糞便中保持感染性能達到數周,在腐敗的血液中可存活15周,在室溫保存的血清或血液中可存活18個月。
總之,ASFV是有囊膜病毒,沒有有機物保護是很容易被滅活,但在有機物保護下,該病毒對環境及消毒劑抵抗力又變得很強大,養殖場環境中ASFV總是被有機物保護,消毒劑選擇必須考慮到這一點。
消毒與滅菌是不同數量級的清除殺滅微生物的概念。
消毒是指殺滅或去除外環境中各種病原微生物,目標是達到無害化的過程。正常消毒的標準要求是微生物滴度降低量達到103量級就可以,即消毒的結果是殺滅或者清除微生物達到99.9%就是符合消毒要求。若用消毒對象污染的自然微生物的殺滅率來評定消毒效果,一般以殺滅或清除率達到90%為合格。
滅菌是指殺滅或去除外環境中一切微生物(包括且不限于病原微生物)的過程。因此目前國際上規定,滅菌過程必須使滅菌物品污染的微生物的存活概率降低到10-6。而針對非洲豬瘟這個特定疫病的危害嚴重性,顯然常規的消毒標準是不適合的,針對非洲豬瘟病毒的殺滅要力爭采用滅菌級的標準。
2.2.1 化學消毒劑的特性
1)化學消毒劑的種類
消毒劑的選擇必須針對要處理或者消滅的微生物的特點來確定,例如細菌芽孢或者非囊膜病毒必須選用滅菌級消毒劑,選用低效消毒劑(單鏈季銨鹽)效果就很差。非洲豬瘟病毒為有囊膜病毒,在沒有有機物保護的裸病毒時很容易被季胺鹽類滅活,10%癸甲溴銨稀釋3200倍,20 ℃,作用10 min病毒滴度降低3.6 Log。
2)消毒劑的配方
優異的消毒劑配方能顯著提高消毒效果。復方消毒劑的代表產品是衛可(Virkon? S)[3],其主要成分是過硫酸氫鉀復合物能產生生物殺滅劑——高活性氧;偏磷酸鹽能中和硬水中的金屬離子;烷基苯磺酸鈉起到表面活性劑作用,濕潤消毒物體表面;蘋果酸能降低pH,增效生物殺滅劑;氨基磺酸降低pH,氧化因子和氯化鈉通過化學反應產生氯化因子,綜合具有“氧化、氯化、酸化”三合一功效,并佐劑成分有效去除了有機物和硬水的影響,有效性的顏色指示劑。復配后成效顯著:殺菌譜廣,性質穩定,速效,可在低溫下使用,不易受有機物、酸、堿及其他物理、化學等因素的影響,對金屬器械無腐蝕,無毒無殘留,溶于水能飲用。
3)消毒劑的濃度劑量
消毒劑的濃度劑量是操作過程中的基本條件之一。首要是保障消毒劑的劑量,在配比濃度時一般都是以有效成分凈含量來進行配比,不正規生產企業標簽中往往有陷阱,導致配比濃度往往達不到應有比例。
2.2.2 外界因素
1)環境溫度
總所周知,大部分消毒劑隨著溫度的降低,活性下降,溫度越高消毒劑效率越好。溫度高低對消毒效果的影響,往往隨消毒方法、化學成分及微生物種類不同而不同。例如,戊二醛在低溫的使用效果就不如在高溫的使用效果,因此低溫季不建議使用戊二醛。
2)環境相對濕度
氣霧噴霧消毒和熏蒸消毒受環境相對濕度的影響十分明顯,環境中的濕度過大會降低消毒劑的濃度,直接導致消毒劑效果失效。例如甲醛熏蒸消毒的最佳相對濕度為80%~90%。
3)消毒劑的作用時間
國標中評價消毒劑的作用時間一般為30 min,可是現場操作中往往達不到30 min,直接導致消毒劑對微生物的殺滅效果下降,例如部分消毒池人經過時不到1 min,這種即時接觸是達不到效果的,而對這方面的研究國內還較少。
4)消毒時環境的酸堿度
酸堿度的變化對消毒的效果影響很大:一方面部分消毒劑只有在特定的酸或堿環境中才有效;另一方面酸堿環境中微生物的存活強度也不同。例如ASFV在pH 4~10的溶液中比較穩定,但在pH小于4或大于11.5、不含血清的培養基中ASFV會立刻失活。
5)表面活性和稀釋用水的水質
在使用表面活性劑消毒時應格外小心,例如陰離子表面活性劑會影響單鏈季銨鹽類的消毒作用;例如部分地區的硬水(水中含鈣、鎂離子高)等也容易消耗消毒劑的消毒成分。

表1 農業農村部推薦的防控非洲豬瘟的消毒劑應用范圍
6)有機物質類的干擾
養豬場的環境中會殘留大量的有機物,例如蛋白質、尿液、血液、油脂等物質,這類物質不但是微生物的保護傘,還會消耗化學消毒劑,容易使消毒劑與有機物質產生化學反應,導致消毒效果的下降。例如普通的氯制劑、季銨鹽及過氧化物類的消毒劑受有機物干擾比較明顯,醛制劑受有機物的影響相對較小。因此,在消毒前,建議先做消毒對象表面的清理和清潔工作,清除消毒對象的表面有機物和生物膜。同時要注意選擇消毒劑有效性測試時的模擬現場的有機物的環境。
7)滲透性
消毒環境的表面往往是凹凸不平的,而且還存在大量的縫隙,作為消毒劑必須要能夠滲透到所有消毒物品的表面,達到消毒的全方位。不同消毒劑的滲透性不同,例如用作熏蒸時甲醛蒸汽比環氧乙烷穿透力差。優秀的消毒劑必須具備很強的滲透有機物表面的能力。
8)消毒設備
在實際的畜牧生產過程中,消毒都是借助消毒設備來實現。消毒設備對消毒效果的影響主要是,噴霧霧滴的大小,霧滴的懸浮時間,一般來說,霧滴越小,懸浮時間越長,和有害微生物的接觸時間越久,消毒效果就越好。
9)微生物種類特性和數量級
因為不同微生物的自身特性對不同類型的消毒劑的抗性也不同,因此消毒劑選擇還要考慮環境中的主要微生物的種類和數量級,污染嚴重和高數量級的環境必須選擇高效的消毒劑。
世界動物衛生組織(Office International Des Epizooties OIE)建議對AFSV可使用0.8%氫氧化鈉、2.3%次氯酸鹽、0.3%福爾馬林、3%鄰苯基苯酚和碘混合物進行消毒,但均需作用30 min可滅活病毒。農業農村部推薦的防控非洲豬瘟的消毒劑見表1。
3.2.1 注重消毒“藥”的概念
不同的消毒“藥”對ASHV殺滅比例也存在著極大差異,非瘟壓力下選擇消毒“藥”也需要根據ASFV的特點選擇有效的產品。除了有效外還要考慮殺滅的程度,據中國獸醫協會編寫的《非洲豬瘟知識手冊》,國外有實驗室用高毒力或中等毒力的ASFV感染豬只后,血液中最高病毒滴度可達109HAD50/mL,口腔液、尿液和糞便中最高滴度可達105HAD50/mL。另有研究表明,水是非??焖俚母腥就緩?,在水里面含量只要有一個TCID50就會引起感染。因此對防控ASFV飲水消毒不能是有效,而是要滅菌級。
3.2.2 注重“用藥量”的概念
上面所提到消毒劑需要合理的配比比例,確保有效的問題;對于現場用量來說,還需要考慮豬舍的空間和面積,例如空舍消毒按地面面積×2.5作為整棟舍的面積,墻面、天花板、地面的消毒藥的用量為300 ml/m2,噴霧消毒40~80 ml/m2(注意消毒霧滴大?。?。
3.2.3 綜合各方面因素,準確用“藥”

表2 國外獨立試驗室對非洲豬瘟有效消毒劑數據
從表2可以看出針對非洲豬瘟病毒,消毒劑的種類不同、使用劑量、作用時間、環境溫度及有機物污染等,造成病毒滴度降低量差異顯著,生產上可根據消毒的對象和目的,選擇合適的比例。如人穿雨鞋在腳踏盆消毒,考慮有機物干攏,如停留時間短于1 min,可以選擇1∶100衛可;如停留10 min,則可按1∶800稀釋。另ASFV在有機物存在下抗力增強,所以在消毒前清洗就更為重要。
3.2.4 高效消毒劑定義有別于養豬生產中高效的消毒劑
化學消毒劑可分為高效、中效和低效消毒劑[5]。高效消毒劑能殺滅包括細菌芽孢和真菌孢子在內的外界環境中的各種微生物的消毒劑,又稱滅菌劑。例如,在化學消毒劑的劃分上,醛類是高效消毒劑,因為2%戊二醛30 min可以殺滅破傷風的芽孢;針對非洲豬瘟病毒,某醛制劑產品(12.74%戊二醛+4.84%癸甲氯銨)在20 ℃、1%有機物中加磷酸緩沖液(pbs)作用30 min,稀釋比例為1∶50,非洲豬瘟病毒滴度降低量為4.6 log。如生產中使用國內常見的一種2%的稀戊二醛則濃度理論上至少應該為1∶8稀釋,而且非復方的顯然影響滅活效果。因此高效消毒劑只是代表其主要成分,在生產實踐中還因考慮多種因素。
3.2.5 要了解產品主要成分和特性,避免盲目使用
生產中要了解產品性能,除了對ASFV有效,同時要根據表3避免用刺激性強的消毒劑進行帶豬消毒,若使用不當會刺激豬的眼睛、呼吸道黏膜,豬的呼吸道黏膜受損會讓ASFV更容易入侵豬體。

表3 消毒劑類別及毒副作用
由于豬舍存在如灰塵、糞便、尿液及血液等大量有機物,這些有機物大大提高了非洲豬瘟病毒對環境的抗性,消毒前使用專用的泡沫清洗劑有利于提高消毒效果。
中國農業科學院蘭州畜牧與獸醫研究所編制《非洲豬瘟防控清潔消毒技術要點》,列出非洲豬瘟消毒效果評價方案。
1)設置消毒指示微生物評價消毒效果
消毒前,將枯草桿菌芽孢涂于棉布或紗布,作為消毒指示微生物,置于待消毒場所。消毒結束后,檢測芽孢殺滅率。殺滅率達到99.9%以上,判定消毒合格。
枯草桿菌芽孢抗性是強于朊病毒(瘋牛病病原)以外的所有微生物,非洲豬瘟病毒是有囊膜病毒,對消毒劑抗力較弱,故可以枯草桿菌芽孢作為消毒指示微生物評價滅殺非洲豬瘟病毒的效果。
2)檢測非洲豬瘟病毒評價消毒效果
消毒后,在養殖場、交易市場、屠宰場、無害化處理場點、疫區臨時檢查站點等高風險場所,采集樣品,并進行非洲豬瘟病毒的檢測。針對病毒消毒效果的評價方法主要包括分子生物學評價法和細胞培養評價法[6],養殖場只能采用分子生物學評價法,但由于被滅活病毒的核酸有可能檢測出陽性,存在假陽性現象。
3)采用哨兵豬來評價消毒成效
恢復生產前,可以選擇10~20頭非洲豬瘟陰性健康的豬,作為“哨兵”,進場自由活動30 d,并每天觀察臨床癥狀,采集樣品進行檢測,確保豬場消毒徹底衛生。
2008年FAO/OIE/世界銀行發布了針對養殖業的生物安全(Biosecurity)的定義是:為降低病原體傳入和散布風險而實施的措施。生物安全的中心思想是隔離、消毒和防疫。應用到非洲豬瘟防控的方案就是隔離和消毒,消毒需要根據現場環境和消毒劑等綜合因素進行考慮,選擇好消毒劑,規范使用 ,才能建立起針對非洲豬瘟的生物安全網。