康 樂,吳星亮,王 銳(翻譯),曲向陽(校對)
(南京博維特健康管理有限公司,江蘇 南京 211800)
薦 語:文章對豬群豬藍耳病狀態監控的采樣方法、采樣數量、檢測方案及結果解讀做了詳細的分析,非常具有臨床實踐意義,故譯出此文并推薦。希望對養豬場的豬藍耳病凈化工作有幫助。
為了判斷豬場是否處于豬藍耳病穩定狀態,必須確定新生仔豬是否具有病毒血癥。豬藍耳病病毒(PRRSV)很容易通過胎盤傳播,尤其是在母豬妊娠的后期。因此,若母豬群具有豬藍耳病病毒血癥,子宮內胎兒將非常可能發生被感染。
因此,必須對產房內豬藍耳病感染狀態進行監控。最好對新生仔豬進行采樣檢測,但因為對新生仔豬采樣較困難,通常對臨近斷奶的仔豬進行檢測。若檢測結果為陰性,那么說明基礎母豬群不存在豬藍耳病的循環傳播。若檢測結果為陽性,則應該對新生仔豬進行檢測,以判斷仔豬是出生時已經被感染還是因為哺乳期間存在交叉污染而導致了被感染。
血清是用來判斷是否存在豬藍耳病病毒的最佳樣品。開始時,可以共采集30頭仔豬血清樣品(假設疾病的流行率是10%、結果的置信區間是95%的隨機采樣數量)。若所采樣樣品的豬只已經表現出臨床癥狀,那么敏感性會高很多。若豬群中豬藍耳病病毒的循環量很低,如:豬群正處于豬藍耳病凈化的最后階段或豬群處于臨床穩定階段,此時采樣的數量可能是不足夠的,建議將采樣的仔豬數量增加至60個,這樣可以對流行率5%以上的疾病進行監測。若病毒的循環載量很低,就需要在一段時間內進行系統性、連續性的采樣,這樣可能從連續多個月陰性的豬場檢測到陽性樣品。一旦開始監測到陽性的結果,至少應對一個完整繁殖周期的仔豬PRRSV狀態進行監控。
由于對仔豬采血比較困難,且有損動物福利,在豬藍耳病病毒血癥流行率較低在仔豬群中,需要采集大量的樣品進行檢測,現在大多采用其他替代性采樣方法。 一種方法是使用處理液——仔豬閹割睪丸和斷尾的滲出液。由于這種滲出液主要由血漿和血液組成,如果仔豬被感染,就會及時檢測到病毒,其與血清樣本幾乎保持一樣良好的靈敏度,并且可以增加樣本數量。應該注意的是,仔豬處理液的使用只適用于進行常規性閹割的豬場,如果僅靠檢測斷尾浸出液,靈敏度要低得多,不能確切地判斷豬場PRRSV的感染狀態(vilalta等,2018)。
已證明臍帶血是檢測新生仔豬PRRSV的可選樣品(martinvalls等,2018)。雖然這個樣品比較容易獲得,但是需要在仔豬出生前后收集,而且應該注意采樣時避免環境污染。這是一個可靠的采樣替代性方案,在母豬分娩時很容易采樣監測,比僅僅采用仔豬斷尾浸出液好得多。
口腔液也被認為是合適的樣本。但問題是,哺乳仔豬通常對采樣繩不感興趣,所以取樣時間長,代表性也低,使這種采樣方法在哺乳仔豬變得不可行。為了提高這項技術的可行性,母豬也被包含在所謂的家庭體液中,母豬帶頭咀嚼繩子,刺激仔豬模仿,增加了采集樣品的檢測靈敏度。然而,對這種采樣體系仍在研究中,通常認為不是最好的選擇。此外,還討論了用浸濕的毛巾從母豬乳房表面取樣的可能性,其理論基礎是,如果小豬被感染,它們會在唾液中排出病毒,污染母豬乳房。雖然目前使用這種技術的經驗不多,而且評價這種系統的價值還為時過早,但從產房采集的乳房表面樣品所獲得的檢測結果令人鼓舞。然而,在這種情況下,正如在討論臍帶血方法時提到的,可能從陰性群體中會采集到陽性樣本,這表明可從污染的環境中檢測到病毒 RNA,因此對檢測結果必須仔細分析(vilalta等,2019)。
最后,使用組織樣本,特別是舌頭的混合樣本,來確定死胎中是否存在病毒的可能性目前正在探索中 (Baliellas, 2020)。
另一個關鍵點是檢測后備母豬群。在豬群引種前和隔離期結束 前,都 要 進 行ELISA和RTPCR的檢測,以確認豬群的健康狀況、馴化的效果,或者了解發生被感染的時間(如果被感染的話)。如果檢測到病毒,可通過測序來確定在適應期內所發現病毒是疫苗毒還是野毒。雖然這不能完全確保這些母豬不會對豬場造成危害,但至少通過檢測,確定這些母豬在進入妊娠舍前不存在病毒血癥。
另一方面,對繁殖母豬群進行監測是極其困難的。血清學檢測幾乎沒有價值,因為市場上沒有豬藍耳病標記疫苗,且S/P值在個體豬之間差別很大,這取決于被感染毒株的毒力強弱(kim等,2007) ,而且豬群在被感染后會維持幾個月的抗體陽性。此外,再次被感染后,豬群通常沒有二次反應,且再次被感染呈一過性,非常迅速,因此采集成對樣本檢測在確定病毒循環方面通常沒有什么用處。同樣,用RT-PCR監測病毒血癥也是不現實的,因為在任何特定時間里,病毒血癥的豬只數量都很少,且病毒血癥在有免疫力的成年豬只中維持時間很短,這使得檢測在實踐中沒有價值。綜上所述,可以得出結論,對生產母豬進行監測只有在陰性豬場和診斷豬藍耳病暴發時才有價值。
相比之下,對生長育肥豬群的豬藍耳病監測非常容易,幾乎各類樣本和技術都可以使用。唯一需要考慮的是根據預期的疾病流行率來決定采樣數量和采樣方案,以能夠很好地代表整個豬群的被感染狀態。
(文章摘選自www.pig333.com,原 文 作 者:Cinta Prieto Suárez)