非洲豬瘟病毒傳播媒介研究進展及豬場高效消毒劑的選用

張靖菊 陳孝杰 張志博 李秀波徐 飛

（中國農業科學院飼料研究所，國家飼料藥物基準實驗室，北京 100081）

據文獻記載，非洲豬瘟于1921年在肯尼亞首次暴發，這種在豬種群間高度傳染的病毒，其強毒株的致死率高達100%[1]。在過去的10年間，非洲豬瘟病毒蔓延到高加索山脈、俄羅斯和東歐附近的許多國家，表現出遠距離傳播的高風險[2]。2018年以前，非洲豬瘟從未在我國出現，但在2018年8月該病傳入我國，且短時間內迅速擴散全國，死亡率極高，造成豬肉價格的大幅上漲和養豬業巨大的經濟損失。2019年1月至9月間，世界動物衛生組織已經公布了26個新暴發或正在流行非洲豬瘟病毒的國家，包括13個歐洲國家、10個亞洲國家以及3個非洲國家[3]。目前針對非洲豬瘟的有效疫苗尚未研制出，短期內對于疫病發生地僅采取捕殺、處理和掩埋方式控制疫情，有效的生物安全防控是重中之重。

1 非洲豬瘟病毒病原學特點

非洲豬瘟病毒是非洲豬瘟病毒屬的雙鏈DNA病毒，也是唯一已知的DNA蟲媒病毒[3]。除了結構、基因和復制特點與其他核質大DNA病毒相似外，不同的是非洲豬瘟病毒擁有多層結構和20面體的空間形態[4]。非洲豬瘟病毒有5層結構[1]，可分為胞內4層和胞外1層，從內到外依次是包含遺傳信息的基因組、包裹住基因組的核心殼層、包裹住核心殼層的雙層內膜、20面體的衣殼蛋白，最后是包裹在病毒外的外膜。外膜和大體積使其對外界環境抵抗力高，具體表現為pH耐受范圍是4～13，在56℃可存活超過1小時[5]，在0℃以下或者4℃時依然保持長時間的感染力；可在血液、糞便和組織中存活時間長達半年；在感染的生的或者未完全煮熟的豬肉制品中存活時間長達3個月，在凍肉中可存活數年[6]；60℃經20 min或使用脂溶劑及部分消毒劑可滅活病毒[6]，并且在豬群中能夠快速高效傳播。這些特性均為針對非洲豬瘟的生物安全防控提供參考依據。

2 非洲豬瘟病毒傳播媒介研究進展

非洲豬瘟的易感動物是非洲疣豬、南非野豬、歐亞大陸野豬以及家豬。歐亞大陸野豬和野化豬對非洲豬瘟高度易感，感染后發病率和死亡率高低與病毒的毒力大小有關[8]，且可以通過直接或間接接觸將病毒傳給放養的家豬。但有研究表明，如果沒有機會再次被感染，非洲豬瘟病毒在野豬群中就會逐漸消失，因此歐亞野豬不能作為非洲豬瘟病毒的貯藏宿主[9]，僅在其被感染一段時間內保持傳染力。

非洲豬瘟的傳播方式經證實的有4種，首先是自然宿主間循環，常發生于非洲叢林，如疣豬-軟蜱循環，但在這種循環中疣豬不表現發病癥狀；其次是鈍緣蜱-家豬循環，多見于散養農戶，與當地環境有關；然后家豬-家豬循環是非洲豬瘟在全世界范圍傳播的根因；最后是最新證實的野豬-棲息地循環[10]，常見于歐洲。在非洲豬瘟暴發的疫病區域內，野豬與野豬之間，野豬與家豬甚至豬肉食品之間均能傳播[11]。

因此非洲豬瘟的傳染源除了被污染的飼料、器具外，不僅包括家豬、野豬這種終末宿主，還包括一些重要儲存宿主，常見有鈍緣軟蜱、蚊子、廄蠅等，而正是這些媒介使得病毒有再次暴發的危險。下面將著重闡述這些傳播媒介的研究進展。

2.1 軟蜱

非洲豬瘟最重要的傳播媒介是鈍緣軟蜱，屬于節肢動物門蜱螨目蜱亞目蜱總科軟蜱科（Argasidae）鈍緣軟蜱屬（Ornithodoros）。軟蜱類節肢動物的存在會加劇非洲豬瘟重新引入、傳播和維持的持續威脅，且病毒可在鈍緣軟蜱體內停留5年之久[12]，其所在地成為自然疫源地的可能也較大。已知與非洲豬瘟相關的鈍緣軟蜱主要有3種：

2.1.1 非洲鈍蜱（O.Moubata）

非洲鈍蜱在非洲最常見，主要參與疣豬-軟蜱循環[13]，病毒可在非洲鈍蜱體內復制，而且可經卵傳播、經期傳播和交配傳播[14]（經卵傳播：一類病原體在飽血的蜱體內經一段發育之后，可以進入蜱卵內，當蜱卵發育成幼蟲時，又可以進入幼蟲的腸道進行繁殖，使幼蟲在叮咬易感宿主時傳播病原體。經期傳播：一類病原體可以從蜱的幼蟲階段經若蟲階段發育繁殖至成蟲階段，成蟲的唾液腺內具有對易感寄主有感染性的病毒），主要棲息于非洲疣豬的洞穴，在非洲叢林中持續存在，經證實可叮咬家豬造成疫情暴發[11]。Ravaomanana等[15]人通過非洲豬瘟病毒與叢林豬之間以及非洲鈍蜱與馬達加斯加西北部家豬和野生豬之間的相互作用水平，來評估它們在馬達加斯加疾病流行病學中的潛在作用。對豬血清和組織樣本進行了抗非洲豬瘟抗體、病毒DNA和非洲鈍蜱唾液抗原抗體的檢測后發現，該軟蜱可能在一個家豬生長周期內儲存病毒。

2.1.2 游走鈍蜱（O.Erraticus）

這種鈍蜱位于西班牙和葡萄牙[12]，非洲豬瘟病毒在其體內只能經期傳播。Afonso P等[13]人對野外捕獲的游走鈍緣蜱進行非洲豬瘟病毒感染實驗，發現病毒復制發生在試驗感染后4周內，幾乎100%的游走鈍蜱能在感染后20周內保持高病毒滴度，但在第41周和第61周觀察到病毒滴度和感染率下降。該試驗表明非洲豬瘟病毒能在游走鈍蜱中復制并持續存在，且在自然感染和試驗感染中，病毒滴度減少都發生在較晚的時間。

2.1.3 塞氏鈍蜱（O.savignyi）

該軟蜱在實驗室條件下對非洲豬瘟病毒的口腔感染很敏感，能將病毒維持至少106天[13]，叮咬豬能引起非洲豬瘟典型的急性感染病例，因此該種鈍緣蜱很可能是非洲豬瘟潛在的天然媒介[16]。

2.1.4 其他鈍緣軟蜱

此外研究發現，還有4種鈍緣軟蜱能在實驗條件下感染非洲豬瘟病毒，分別為美洲的糙皮鈍蜱（O.coriaceus）、圖卡鈍蜱（O.turicata）、帕氏鈍蜱（O.parkeri）和波多鈍蜱（O.puertoricen）[17]，但這些鈍緣軟蜱是否能在自然條件下感染還未經證實。

上述7種軟蜱在我國并未被追蹤到，但經Climex軟件分析，軟蜱在我國云南、貴州、四川東部、重慶、陜西南部、湖南、湖北、江西東北部、安徽、河南、浙江、江蘇、山東、河北南部等地適宜生存，為高適宜潛在發生區[18]。我國目前分布有2種鈍緣蜱，即特突鈍緣蜱（O.tartakovskyi）和左氏鈍緣蜱（O.tholozani），主要集中在北部荒漠、半荒漠地區的新疆、陜西和山西[19]，其中左氏鈍緣蜱可能是非洲豬瘟病毒的潛在媒介。

截至2020年3月，我國發生了3起共計10頭野豬感染非洲豬瘟病例，雖未證實有軟蜱參與傳播，但鑒于國內氣候高度適宜鈍緣軟蜱生長[20]，且存在適宜非洲豬瘟病毒生存的軟蜱種類，因此為防止家豬-軟蜱循環，或者野豬、野化豬帶蜱遷徙而使非洲豬瘟病毒持續存在，應長期監視加預防。

2.2 其他宿主

其他小型嚙齒動物、蚊子、廄蠅等也都可通過接觸感染豬傳播非洲豬瘟病毒[21]。廄蠅在吸食感染非洲豬瘟病毒的豬血后，可在24 h內機械傳染病毒，有研究表明病毒能在廄蠅體內存活至少2天，在實驗中給廄蠅喂食感染非洲豬瘟病毒的血液，12 h后其體內含有可繁殖的病毒，在喂食后3天內仍可以檢測到病毒核酸，而且僅1只廄蠅中所含的劑量，在豬身上就足以產生臨床癥狀[22]。最新研究發現水蛭也是潛在宿主[23]，在試驗中，易感豬在經口攝入養殖60～80天的水蛭（吸食過非洲豬瘟病豬血液）后仍可感染發病，并且潛伏期明顯變長，表明水蛭等可作為病毒的儲存宿主。

3 針對非洲豬瘟病毒及其傳播媒介的消毒防控工作

3.1 鈍緣軟蜱的消毒防控

對于鈍緣軟蜱的消毒防控最重要的是前期監測，分2個方面，一是檢測軟蜱中的非洲豬瘟病毒，因為軟蜱的成蟲和第5個若蟲期是檢測病毒感染的最佳時期[24]。二是檢測豬場中是否存在軟蜱，可用血清學方法檢測豬血液中是否存在抗該蜱的抗體[25]。針對傳播媒介的防控結束后則是豬場滅蜱防控[26]。目前針對蜱蟲的化學殺蟲劑包括N·二乙基·甲苯酰胺以及其他一些氯化烴類、有機磷酸酯類、氨基甲酸鹽和擬除蟲菊酯類藥物[27]，但其中能用于豬場的僅占一小部分。廣東省畜牧獸醫局組織有關專家制定并于2018年9月11日發布的《防控非洲豬瘟消毒殺蜱流程與用藥指引》指出目前可用于養豬場、生豬批發市場和屠宰場等對蜱有效的藥物為40%辛硫磷澆潑溶液、氰戊菊酯溶液等[28]。非化學殺蟲劑如麻瘋樹、番荔枝、長葉、菊芋、角礫、桉樹、川楝、百里酚等均具有一定的蜱蟲殺滅效果，因而也在積極地研究中[29]。

事實上，殺蟲劑的滅蜱效果并不好，因為有大量的蜱蛹和若蟲藏的較深，不易被發現，所以軟蜱僅暫時性減少，而抗蜱疫苗是優選。普通殺蟲劑極易產生耐藥性，通過抗蜱疫苗[30]進行免疫控制是一種替代傳統殺蟲劑的有吸引力的選擇，但面臨諸多挑戰，目前耐多種殺蟲劑蜱毒株庫需要被檢測和建立，多項后續問題亟待解決。

3.2 非洲豬瘟消毒劑的選擇

非洲豬瘟病毒能夠進行遠距離跳躍性傳播，這與病毒強大的抵抗力、獨特的蟲媒循環以及交通運輸等因素分不開[31]。研究表明該病毒并不能通過遠距離氣溶膠傳播，直接接觸或間接接觸是主要途徑，病毒附著于各種媒介、人員、車輛、器具、飼料、墊料，甚至水源，從而遠距離伺機接觸易感動物[32]。

因此，豬場生物安全防控除了前文所述的切斷傳播媒介以外，阻止場外病毒的傳入才是未來多數豬場復養的關鍵，這其中消毒工作便是重中之重[33]。2020年2月29日農業農村部關于印發《非洲豬瘟疫情應急實施方案（2020年版）》的通知中針對豬場道路、車輛、生產加工區、生活區和人員等環節推薦了相應的消毒劑大類，但鑒于市面上消毒劑種類繁多，對于非洲豬瘟病毒而言高效安全的消毒劑推薦有待進一步商榷。以下將重點闡述針對非洲豬瘟病毒的高效消毒劑及其用途[34]。

3.2.1 過氧化物類

過氧化物類消毒劑可使菌體內活性基團氧化而起殺滅作用，蛋白質合成受阻，酶、核酸發生致死性結構變化，主要包括過氧乙酸、雙氧水、二氧化氯、過氧化氫、臭氧等。其中二氧化氯殺菌能力是次氯酸類的3～5倍，對病原微生物具有極強的殺滅作用，并且具有無殘留毒性、對動物機體危害小、不污染環境等優點，是世界衛生組織認證的A1級高效消毒劑，加上非洲豬瘟病毒可通過水源傳播，二氧化氯又是高效理想的飲水消毒劑，所以其完全適用于非洲豬瘟病毒的防控。主要適用于水槽、飲水消毒。

3.2.2 碘類

碘類消毒劑包括聚維酮碘、聚醇醚碘、碘酸溶液等[35]。碘的沉淀作用和鹵化作用能夠解決一般消毒劑的滲透性問題，它能與蛋白質氨基酸鏈上的羥基、氨基、烴基、巰基結合導致蛋白質變性，發生鹵化，從而使病毒失去生物活性。非洲豬瘟病毒的pH耐受范圍在4～13，而碘類消毒劑殺菌能力受pH影響較小，由碘、磷酸、硫酸、表面活性劑制成的碘酸復合溶液就可以在酸性條件下有效殺滅病毒，因此碘酸溶液便可作為非洲豬瘟的高效消毒劑，適用于車輛及運輸工具、場地消毒、洗手盆、欄舍常規消毒等。

3.2.3 含氯類

含氯消毒劑包括無機氯化合物（如次氯酸鈉、次氯酸鈣）[36]、有機氯化合物（如二氯異氰尿酸鈉、三氯異氰尿酸、氯銨T等）。這類消毒劑可殺滅各種微生物，包括細菌繁殖體、病毒、真菌、結核桿菌和抵抗力最強的細菌芽孢[37]。對非洲豬瘟病毒而言是高效消毒劑，但缺點是不穩定，容易受光、熱和潮濕影響，喪失有效成分，豬場消毒時保證2.3%有效氯30 min，適用于車輛及運輸工具、洗手盆、場地消毒等。

3.2.4 強堿類

強堿類消毒劑主要包括NaOH和CaO，高濃度的OH-能水解菌體蛋白和核酸，使酶系統和細胞結構受損，從而對細菌和病毒有很強的殺滅作用，高濃度可以殺滅芽孢[36]。養殖場常用2%～3%燒堿加10%～20%石灰乳消毒及刷白墻壁、屋頂、地面等，配制燒堿溶液時提高溫度、加入食鹽，消毒效果更佳。該類消毒劑對非洲豬瘟病毒屬于高效消毒劑，適用于大門、更衣室、腳踏地、消毒池、生產線道路、生活區、環境以及空欄消毒。

3.2.5 醛類

醛類消毒劑包括甲醛、環氧乙烷、戊二醛、戊二醛癸甲溴銨等[38]，其中戊二醛的作用是甲醛的10倍，且相對安全、低毒，是國際食品安全及公共衛生組織公認的單一成分消毒劑中消毒能力最強的一類。戊二醛能通過醛基與氨基、羧基、羥基和巰基產生交聯作用，肽聚糖、RNA、DNA、細胞膜功能酶和蛋白質喪失活性而使微生物滅亡[36]。戊二醛在酸性條件下，更加穩定，有效戊二醛含量充足。醛類消毒劑對非洲豬瘟病毒屬于高效消毒劑，但略帶毒性，適用于車輛及運輸工具、場地消毒、洗手盆、欄舍常規消毒等。

3.2.6 酚類

酚類消毒劑有苯酚（鄰苯基苯酚）、煤酚皂溶液（來蘇爾）、復合酚等[39]。酚類消毒劑因其親脂性對于有囊膜病毒效果很好，因此是非洲豬瘟病毒的高效滅菌劑，如3%鄰苯基苯酚（30 min）可滅活病毒，但毒性較大，對皮膚有刺激性，且有惡臭，加之對環境污染較大，正逐步受到限制，適用于車輛及運輸工具、場地消毒、欄舍常規消毒、空欄消毒等。

除此之外有2個重要環節的消毒值得注意，第一是飼料消毒，可用紫外燈照射2～3 h。第二是帶豬消毒，建議使用聚維酮碘、過硫酸氫鉀、檸檬酸、二氯異氰尿酸鈉、溴氯異氰尿酸鈉等。具體藥物也可參考美國環境保護總署批準用于非洲豬瘟病毒的消毒劑[40]。

4 展望

研究非洲豬瘟病毒的流行病學特點和蟲媒特性是一種長遠準備。一方面，養殖場（戶）要強化生物安全防護措施，避免飼養的生豬與野豬接觸。另一方面，對豬-蜱循環也應當引起重視，在鈍緣軟蜱分布地區進行監測，疫點、疫區、受威脅區的養豬場戶要采取殺滅鈍緣軟蜱等控制措施，從而避免像非洲國家百年間持續復發循環的被動局面。此外，抗蜱殺蟲劑和抗蜱疫苗還有待研究，耐多種殺蟲劑蜱毒株庫也需要被檢測和建立。

目前，我國非洲豬瘟防控成效顯著，但原本較大的污染面使病毒趨向于持續存在，對抗非洲豬瘟成了我國養豬業長期而艱巨的任務，加之并無能夠投入生產使用的有效疫苗，制定完善的消毒防控措施對國內豬場來說尤為重要。相信不久的將來，豬場復養會一步步提上日程，國內養豬業定能恢復往日榮光并更快發展。