張智明,梁宛楠,張鳳強,柴 華
(哈藥集團生物疫苗有限公司,哈爾濱 150069)
豬支原體肺炎(Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS),又稱為豬喘氣病、豬地方性流行性肺炎,該病是一種呼吸道疾病,是豬的一種重要的接觸性傳染病,目前已經在全球范圍內廣泛分布,大多數國家的養豬場報道了該病[1]。其致病菌是豬肺炎支原體(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp),該病原體可以感染幾乎所有品種和日齡的豬只,并且可以使豬體產生免疫抑制,降低對其他病原的免疫力,造成混合感染。一旦出現混合感染,會導致非常嚴重的后果,增加感染豬的死亡率,危害養殖戶的經濟利益。目前,該病對全世界養豬業造成的經濟損失十分巨大。豬支原體肺炎按照臨床表現可分為急性、慢性和隱性三型,急性豬支原體肺炎不常見,其特征是發病率可達100%,伴有發熱或不發熱的急性呼吸障礙;慢性豬支原體肺炎常見,主要特征是反復干咳和咳嗽,尤其是在飼喂或運動后,伴有發育不良;隱形豬支原體肺炎則表現為沒有臨床癥狀,僅偶爾咳嗽,只在剖檢時可以看到肺臟典型的病理變化,如在肺臟的各葉,尤其是心葉和尖葉出現肉眼可見的肉樣或胰樣病理變化[2]。
我國規模化養豬場的豬肺炎支原體的感染率非常廣泛。數據表明,我國豬場豬支原體肺炎的發病率一般為30%~50%,個別豬場的感染率甚至可達85%以上[3],而由此造成的直接經濟損失每年可高達40 億元[4]。因此,對于豬支原體肺炎的防治生豬養殖從業人員都非常重視。對于豬支原體肺炎的控制,一般可以采用抗生素或免疫疫苗來進行治療或預防。但隨著國家限制使用抗生素政策的影響,以及出現的耐藥性和藥物殘留問題,疫苗接種將成為預防本病最為重要的手段[5]。因此,免疫效果良好的疫苗將會不斷的被開發和應用。我國目前市場上生產和銷售的豬肺炎支原體按性質可分為滅活疫苗和活疫苗[6],按照類別可分為進口疫苗和國產疫苗。而市場上占有率較高的則為進口的滅活疫苗(包括哈藥集團生物疫苗有限公司由輝瑞動保轉讓的瑞倍適和瑞倍適-旺)。國產活疫苗的應用范圍,由于其肺內接種的免疫方式而受到了一定的限制。進口疫苗盡管滅活效果好,但其價格較為昂貴[7]。因此,國內市場上需要一種國產的、接種方便的滅活疫苗來降低養殖戶的防疫成本。為了達到該目的,在本研究中用制備的3批豬肺炎支原體滅活疫苗,對豬進行免疫接種,研究對豬生長性能的影響,為豬支原體肺炎滅活疫苗研制提供理論依據。
豬肺炎支原體滅活疫苗,生產批號為202001、202002 和202003,由哈藥集團生物疫苗有限公司制備和保存。
2 周齡的健康易感仔豬(經ELISA 方法檢測,豬肺炎支原體血清抗體陰性),購自黑龍江省哈爾濱市郊某豬場,品種為長白豬。
2周齡健康易感仔豬20頭隨機分為4組,每組5 頭,其中3 組作為免疫組,分別接種實驗室3 批制品(批號:202001、202002、202003),接種方式為頸部肌肉注射,接種劑量為2.0 mL·頭-1,對照組接種同量的生理鹽水,接種方式與接種量同免疫組。疫苗免疫后,對疫苗免疫豬的安全性進行觀察,連續觀察28 d。試驗分組情況見表1。

表1 對豬的生產性能影響試驗分組
疫苗免疫后,按以下項目檢測:(1)疫苗免疫后連續28 d,免疫后系統觀察免疫豬的健康情況,包括存活、飲食、活動、排便、眼睛結膜及其分泌物等。(2)疫苗免疫后連續28 d,觀察疫苗接種是否出現局部反應:包括注射部位是否出現紅、腫、疹塊或硬塊,按壓接種部位豬是否有痛感,并將觀察結果詳細記錄。(3)疫苗免疫后連續28 d,觀察疫苗接種是否出現全身反應:包括嘔吐、痙攣、口吐白沫、死亡等不良反應,必要時可注射腎上腺素進行急救。(4)免疫前和免疫后1 個月稱取和記錄每頭豬的體重,并計算全程均只增重。
用3批豬肺炎支原體滅活疫苗進行豬的生產性能影響試驗。
接種后試驗豬全部健活,精神狀態良好,行為、采食和飲水正常,無其他全身不良反應;注射局部吸收良好,無紅腫、硬結;免疫后1個月每頭豬的體重及全程均只增重均優于對照組的增重情況,結果見表2~3。

表2 對豬的生產性能影響臨床觀察結果

表3 對豬的生產性能影響體重測量結果
由哈藥集團生物疫苗有限公司制備的豬肺炎支原體滅活疫苗,與目前國產活疫苗的接種方式有顯著的區別。目前國產活疫苗一般需要進行肺內接種,對接種技術的要求比較高,對接種人員的要求也比較高,如果未經過專門指導或培訓,在接種時很容易對接種豬造成傷害[8]。因此,肺內接種的豬肺炎支原體活疫苗的應用和推廣,受到一定程度的限制[9]。在進行滅活疫苗制備時,首先考慮了接種途徑,使制備的疫苗能夠以較為方便的方式進行接種,以解決活疫苗接種過程中的不足。而影響滅活疫苗接種方式的重要因素,一般都與佐劑有關[10-13]。在制備過程中,經過多次試驗,最終選擇一種進口佐劑,作為豬支原體肺炎滅活疫苗的佐劑,并取得了良好的免疫效果。同時,對制備疫苗的安全性以及對試驗動物生長性能的影響進行了測定。在本試驗中疫苗接種后,接種的豬全部健活,神狀態良好,行為、采食和飲水正常,沒有出現應激、死亡等全身不良反應;沒有出現體溫升高的情況;疫苗接種的局部吸收良好,無紅腫、硬結;按壓無痛感;免疫后1個月,免疫組的豬平均體重為,均在12 kg 以上,全程均只增重均在8 kg以上,與空白對照組相比效果較好。從以上的數據可以看出,本研究制備豬肺炎支原體滅活疫苗在用使用劑量接種豬后,疫苗的安全性良好,同時。對于豬的生產性能無任何不良的影響,甚至還有一定的促進作用。
本研究制備豬肺炎支原體滅活疫苗安全性良好,對豬的生產性能有一定的促進作用。