復方元胡止痛片的薄層色譜鑒別

劉斯亮，姜范成，康凱

（大連市檢驗檢測認證技術服務中心，遼寧 大連）

0 引言

復方元胡止痛片收載于《衛(wèi)生部藥品標準》中成藥制劑第七冊，標準號為WS3-B1386-3。處方由延胡索，醋香附，川楝子，徐長卿等四味藥材組成，具有疏氣止痛作用，用于肝胃氣痛，胃脘脹痛，胸肋痛，月經痛。原部頒標準只有三項化學鑒別，不能全面控制該藥品的質量。為了提高該制劑的質量，擬采用薄層色譜對方中徐長卿，香附，延胡索進行鑒別，為修訂提高制劑的質量標準提供科學依據。

1 實驗材料

1.1 儀器

BS42000S 型電子天平（Sartorius）；雙槽層析薄層缸；HH-4 型恒溫水浴鍋。

1.2 藥材與試劑

徐長卿，香附，延胡索；乙醚，乙酸乙酯，甲苯，環(huán)己烷，三氯甲烷，甲醇，丙酮。

2 方法與結果

2.1 徐長卿的薄層鑒別[1-3]

取本品7 片，研細，將其放在有瓶塞的錐形瓶中，在里面加入20ml 乙醚，用瓶塞塞緊，振搖60min，濾過，待濾液揮干后將殘渣加入1ml 的乙酸乙酯，將其進行溶解，所得溶液作為供試品溶液。另取徐長卿對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。另取丹皮酚對照品，加乙酸乙酯制成每lml 含1mg 的溶液，為對照品溶液。按處方中藥味比例，配置不含徐長卿的陰性對照，再同法制成陰性溶液。照薄層色譜法（通則0502)試驗，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液10μl 和對照品溶液5μ1，將吸取的溶液分別點放在硅膠G 薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯（10:2:0.8)為展開劑，展開，取出，晾干，使用濃度為10% 的硫酸乙醇進行噴灑，并在105℃的溫度下進行加熱處理，加熱直至斑點出現(xiàn)清晰的顯色。供試品色譜中，與對照組藥材及對照品的色譜相應的位置上有相同的斑點顏色，陰性溶液無干擾。

2.2 香附的薄層鑒別[4-6]

取a-香附酮對照品，加乙酸乙酯制成每lml 含lmg 的溶液，作為對照品溶液。按處方中藥味比例，配置不含香附的陰性對照，再同法制成陰性溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取徐長卿項下的供試品溶液10μ1 和對照品溶液2μ1，分別點于同一硅膠GF254 薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯（9:1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性溶液無干擾。

2.3 延胡索的薄層鑒別[7]

取本品7 片，研細，置具塞錐形瓶中，加入50ml 的甲醇之后進行超聲處理，時間為30min，濾過，將濾液蒸干處理，在殘渣中加入10ml 的水進行溶解，并使用濃氨試液對pH 值進行調試，使其在9-10 之間，之后用乙醚進行提取，共提取2 次，每次的提取量為30ml，將乙醚液進行收集，并揮干，殘渣中加入1ml 的甲醇進行溶解，得到的溶液作為供試品溶液。取1g延胡索的對照藥材，采用相同的方法制成對照藥材溶液。再取延胡索乙素對照品，加入甲醇進行溶解，使得制成的溶液中1ml 含有0.5mg 的溶液，并將其作為對照品溶液。按處方中藥味比例配置出不含延胡索的陰性對照組，采用相同的方法制成陰性溶液。照薄層色譜法（通則0502)試驗，吸取供試品溶液3μl、對照藥材溶液3μl 和對照品溶液2μ1，在同一硅膠G 薄層板上分別點放，薄層板使用1%的氫氧化鈉溶液制備，展開劑為甲苯-丙酮（9:2)，展開，取出，晾干，將其放置在碘缸中一段時間（5min）再取出，將吸附的碘揮干，置紫外燈365nm 下檢視。供試品色譜中，與對照品及對照藥材色譜位置上有相同的顯色斑點，同時陰性溶液也顯示有相應的干擾。

3 討論

復方元胡止痛片國家共計6 家生產企業(yè)生產，處方由延胡索，醋香附，川楝子，徐長卿等四味藥材組成。本實驗在原有化學鑒別的基礎上增加了香附、徐長卿、延胡索的薄層色譜鑒別，通過對2 批樣品及陰性對照的檢驗，證實方法專屬性較強、操作簡單可靠，可作為對原有質量標準的補償與完善。筆者對不同廠家（青島海洋，上海譜科，上海盛亞）的薄層板進行了考察，結果表明同等條件下不同廠家薄層板對分離條件無影響。

復方元胡止痛片處方中延胡索、徐長卿藥材為原粉藥味入料，分別對兩種藥材進行顯微鑒別研究[8]。《中國藥典》2015 年版一部[9]中延胡索顯微特征有糊化淀粉粒、下皮厚壁細胞、螺紋導管；徐長卿顯微特征有外皮層細胞、草酸鈣簇晶、分泌細胞、內皮層細胞。經過顯微鏡鑒別篩選后確定，延胡索的“下皮厚壁細胞綠黃色，細胞多角形、類方形或長方形，壁稍彎曲，木化，有的成連珠狀增厚，紋孔細密”的特征性顯微鑒別點，鏡檢率極低；徐長卿的簇晶的顯微特征性鑒別點，鏡檢率高。故草酸鈣簇晶鑒別可以作為復方元胡止痛片的顯微鑒別項。

筆者對延胡索進行的薄層色譜探索性研究，對照品和對照藥材的色譜位置上雖然有相應斑點，但陰性樣品有干擾，分析是由于其他藥味對延胡索有影響。因此本藥中延胡索不適用于薄層色譜鑒別。考慮到準確性問題，對延胡索進行高效液相色譜分析，可更準確地測定其具體含量。