HIV早期感染檢測診斷中不同HIV抗原/抗體檢測方法的應用

張鳳桐

（遼寧省大連市長海縣疾病預防控制中心，遼寧 大連 116599）

艾滋病屬于全球性傳染性疾病，對人類生命健康造成極大的損害，主要通過吸毒、性接觸、輸血等途徑傳播，患者機體免疫力明顯降低，隨著病情進展，并發癥發生率隨之升高，容易加大患者死亡風險[1]。當前，免疫缺陷病毒（HIV）抗體檢測為艾滋病實驗室診斷金標準，HIV感染早期未檢測到抗體或者未產生抗體時期為窗口期，急性期HIV具有極強的傳播能力，因此，在此階段進行感染治療能夠取得確切療效[2]。早期患者缺乏特異性表現，而且早期抗原親和力低、抗體滴度低，臨床漏診率較高，因此，早期進行敏感實驗室篩查對于提高病情檢出率及促進患者改善預后有重要價值[3]。臨床采用多種抗原抗體檢查方法篩查HIV病毒，第四代HIV檢測試劑能夠對HIV p24抗原及抗體進行檢測，能夠使檢測效能得到顯著提高，但是不同試劑盒檢測結果存在較大差異，此次研究應用第四代HIV檢測試劑盒對疑似HIV感染血液樣本進行檢測，報道如下，

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究以3791份性服務工作者及吸毒人員血液標本為研究對象，嚴格按照實驗室相關規范對血液標本進行分離、離心及保存等操作。

1.2 方法 應用產自美國BBI公司的BBI陽轉血清盤，每套含樣品4～8份，應用產自英國Abbott公司第4代HIV試劑盒，檢測試劑：Murex HIV Ag/Ab，編號A，應用產自荷蘭Organon公司第四代HIV試劑盒，檢測試劑：Vironostika HIV Uni-form ⅡAg/Ab，編號B，應用產自英國Abbott公司第3代HIV試劑盒，檢測試劑：Murex HIV-1.2.0，編號C，應用北京普瑞麥迪實驗室技術有限公司生產的HIV間接熒光抗體試驗試劑盒，分別檢測上述血液樣本及BBI陽轉血清盤。所用儀器與試劑如下：mini-VIDSA分析儀、Bio-Rad MODEL1575型洗板機、雅培Axsym化學發光免疫分析儀、羅氏ELECYS2010變色龍酶免儀。分別應用兩種試劑盒通過酶聯免疫法（ELISA）及快速法進行HIV平行檢測，若出現檢測結果不一致現象，則對陽性血樣及血液標本進行雙孔復試以便對HIV感染狀態進行確定。完成檢測后，時候用間接熒光抗體實驗法重新確認所有樣本，嚴格根據試劑盒說明進行各項操作。記錄和統計初次檢出陽性樣本采樣時間并對兩種試劑盒檢測窗口期差異進行對比和分析，描述BBI轉陽血清盤檢測結果。

1.3 評價指標 ①分析試劑A、B檢測HIV診斷學評價指標，對比兩種試劑的檢測特異度、靈敏度及誤診率、漏診率；②比較兩種第4代試劑檢出結果；③分析不同試劑對BBI陽轉血清盤（PRB924、PRB930、PRB942、PRB944）檢出窗口期情況。

1.4 統計學方法 應用及分析本次研究應用SPSS10.0軟件包進行數據資料處理及分析，通過χ2檢驗組間計量資料并分析試劑盒檢測結果差異是否存在統計學意義，檢驗水準α=0.05，P＜0.05，組間對比可見顯著差異。

2 結果

2.1 分析試劑A、B檢測HIV診斷學評價指標 所檢測的3791份血液樣本中共計53份樣本確診為HIV感染陽性樣本，檢出率1.40%。分別應用試劑盒A、B同步檢測所有樣本，檢測結果表明兩種試劑盒均檢測出54份HIV感染陽性樣本，其中，試劑A檢測特異度99.65%、靈敏度100.00%、誤診率0.35%、漏診率0，試劑B檢測特異度99.38%、靈敏度100.00%、誤診率0.62%、漏診率0，兩種檢測方式檢測特異度、靈敏度、誤診率以及漏診率差異均無統計學意義，P＞0.05。見表1、表2。

表1 分析試劑A及P24檢出結果比較

表2 對比分析試劑B及P24檢出結果

2.2 比較兩種第4代試劑檢出結果 對比試劑A及試劑B檢測結果差異不存在統計學意義，P＞0.05。見表3。

表3 兩種第4代試劑檢出結果比較[n（%）]

2.3 不同試劑對BBI陽轉血清盤檢出窗口期情況比較 分析試劑A、B較C試劑檢測窗口期明顯提前，但是試劑A、B較P24試劑滯后。見表4。

表4 不同試劑對BBI陽轉血清盤檢出窗口期情況比較

3 討 論

艾滋病即獲得性格免疫缺陷綜合征，主要由于反轉錄病毒HIV感染破壞全身免疫系統，而且HIV病毒可通過精液、血液以及接觸肛門、生殖器、口腔等黏膜組織傳染，患者機體免疫力明顯降低，容易導致神經系統、呼吸系統、泌尿系統以及消化系統等全身多個器官受累，出現真菌、細菌以及病毒感染的風險也隨之升高，若病情得不到及時有效的控制，患者面臨極高的殘疾風險以及死亡風險[4]。HIV病毒感染患者擔心受到社會歧視，自身承受著巨大的心理壓力以及精神負擔，部分患者還會產生憤世嫉俗甚至報復社會的心理，對社會穩定也會造成不良影響[5-6]。

艾滋病病毒（HIV）抗體診斷試劑自1985年問世以來，不斷獲得改進，診斷試劑特異性以及敏感性獲得了顯著提高，主要檢測方式包括HIV核酸檢測、HIV抗體檢測以及HIV抗原抗體聯合檢測等[7-8]。ELISA檢測屬于第三代試劑檢測方法，與第一代及第二代試劑相比，其檢測特異度以及靈敏度均獲得一定程度的提高，但是由于抗體產生需要一定的時間和過程，因此，抗體產生前早期HIV感染無法獲得檢測，HIV檢測窗口問題極大地影響HIV早期檢出率。第四代試劑盒可同時進行P24抗原及抗體檢測，窗口期獲得顯著縮短，而且與第三代試劑盒相比，檢測時間也明顯提前[9-10]。

此次研究中，所檢測的3791份血液樣本中共計53份樣本確診為HIV感染陽性樣本，檢出率1.40%。試劑A與試劑B兩種檢測方式檢測特異度、靈敏度、誤診率以及漏診率差異均無統計學意義，P＞0.05。A、B試劑盒檢測特異度及靈敏度均較高，原因可能在于第四代試劑同時將P24抗原檢測及HIV-1/2抗體檢測于一個微孔內同時反應，一次實驗可進行兩種標志物檢測，將生物素-鏈親和素放大系統加入P24抗原檢測系統中，不但能夠顯著加大ELISA反應靈敏度，同時還不會對P24抗原檢測結果產生影響[11]。

作為評價HIV早期感染檢測方法的有效工具，HIV陽轉血清盤能夠使各種試劑檢測窗口期獲得準確反映。此次研究中，對比試劑A及試劑B檢測結果差異不存在統計學意義，P＞0.05。試劑A、B較C試劑檢測窗口期提前，但是試劑A、B較P24試劑滯后。表明第四代試劑艾滋病毒早期感染檢出率較高，本研究中，與B試劑相比，A試劑窗口期明顯更短，A試劑檢測效果可能較B試劑更為理想。與王曉紅[12]研究結果一致。

綜上所述，第四代HIV抗體試劑盒HIV感染檢測能力較強，而且有助于使HIV感染檢出窗口期獲得提前，能夠為臨床準確判斷患者病情提供重要科學依據，從而可為臨床醫師制訂針對性病情控制方案提供信息，既能夠促進患者病情改善，控制HIV傳播，還可為用血安全性提供保障。