液相色譜

王海澍

罌粟殼俗稱大煙，是罌粟科植物罌粟的干燥果殼，含有嗎啡、可待因、罌粟堿、那可丁、蒂巴因等20多種活性生物堿。這些生物堿能使人體處于一種特殊的愉悅狀態(tài)，并逐漸產(chǎn)生依賴性，進(jìn)而成癮。長期食用會引起精神失常，出現(xiàn)幻覺，甚至?xí)?dǎo)致呼吸停止而死亡，嚴(yán)重危害人體的健康，對社會危害很大。在近期市場監(jiān)督管理局開展的打擊食品違法添加執(zhí)法行動中，仍發(fā)現(xiàn)多家餐飲服務(wù)單位經(jīng)營的食品中含有該類生物堿，存在涉嫌違法添加行為。因此，火鍋食品中5種生物堿的測定研究可為食品監(jiān)管部門提供技術(shù)支持，在保障食品安全方面具有重大意義。

1. 儀器設(shè)備：安捷倫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀1260-6460（軟件版本 ：MassHunter Version B.06.00）

2. 試劑及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：乙腈、甲酸、乙酸銨、罌粟堿ID：002XiY（EDQM）、那可丁ID：L4A3-CTUK（中國食品藥品檢定研究院）、蒂巴因FE01201703（Cerilliant）、可待因FE11021502（Cerilliant）、嗎啡FE08141515（Cerilliant）、嗎啡-D3 FE09181502（Cerilliant）、可待因-D3 FE03101601（Cerilliant）

3. 儀器測試條件：ESI源；正模式；色譜柱：RRHD Eclipse PLUS C18；2.1×50mm，1.8μm；流速0.3mL/ min；梯度洗脫條件見表1。

4. 樣品前處理：稱取2g（精確到0.01g）樣品，置于50mL聚丙烯離心管中，加入150μL同位素內(nèi)標(biāo)工作液，再加入5mL水，振搖使分散均勻，加入15mL乙腈渦旋振蕩1min，加入罌粟堿提取包，迅速振搖，渦旋1min，以4000轉(zhuǎn)/分鐘離心5min，取上清液1.5mL，置于2mL罌粟堿凈化瓶中，渦旋混合1min，以10000轉(zhuǎn)/分鐘離心2min，移去上清液，0.22μm濾膜過濾待測。

5. 方法檢出限及線性回歸方程

對配制的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測試，5種生物堿的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)及方法檢出限（按S/N=3計(jì)）見表2。結(jié)果表明5種生物堿的線性良好，相關(guān)系數(shù)為0.997-0.999。

6. 回收率與精密度

在不含該5種生物堿的火鍋調(diào)料中，分別添加含量為25、50、250μg/ kg三個(gè)濃度水平的標(biāo)樣，每個(gè)水平平行測定6次，其回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）見表3。

7. 結(jié)論

罌粟堿、那可丁和蒂巴因采用外標(biāo)法定量，嗎啡和可待因采用內(nèi)標(biāo)法定量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，5種生物堿在0-75ng/ mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.997-0.999，方法檢出限為0.69μg/kg-1.82μg/kg，5種目標(biāo)化合物的平均添加回收率為94.75 %-118.02 %，RSD均小于5.0%。本方法具有前處理簡單、快速、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點(diǎn)，可用于火鍋食品中多種生物堿的同時(shí)檢測。