菌種活化操作方法

孫葳

菌種是我國(guó)重要的生物資源，保藏適當(dāng)?shù)木N需要正確的活化方法來(lái)獲得純培養(yǎng)物，本文結(jié)合多年從事食品微生物檢驗(yàn)的工作經(jīng)歷，簡(jiǎn)要介紹常規(guī)的菌種活化操作方法。

菌種活化就是將保藏狀態(tài)的微生物菌種放入適合其生長(zhǎng)繁殖的的培養(yǎng)物中進(jìn)行培養(yǎng)，通過(guò)逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)進(jìn)而獲得活力旺盛、數(shù)量足夠的純培養(yǎng)物。通常我們工作中使用的工作菌種需經(jīng)過(guò)要2-3代的復(fù)壯過(guò)程，因?yàn)榫N的保存條件以及培養(yǎng)條件不盡相同，所以需要活化讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境[1]。

一般菌種臨時(shí)存放及活化方法

采用低溫保存管保存菌種，應(yīng)存放于-20℃ ～ -80℃的低溫條件下。準(zhǔn)備36±1℃的70-75﹪酒精浴槽（若以水浴取代，應(yīng)確保所用水中微生物污染得到控制），事先應(yīng)在浴槽放置小試管架或保存管架等，液面要低于管塞或管蓋。將低溫保存管從低溫保存條件中取出，置于36±1℃的浴槽內(nèi)的管架上。不斷輕微搖動(dòng)低溫保存管，液面不可高至管塞，直至冰完全溶解（大概需要2min左右）。

無(wú)菌培養(yǎng)操作方法

用無(wú)菌微量吸管，從已溶解的低溫保存管中吸取1-2滴菌液，滴入指定的固態(tài)培養(yǎng)基一邊緣附近，以劃線或涂布法接種于培養(yǎng)基。也可用滅菌金屬環(huán)蘸取菌液后，以劃線或涂布法接種于培養(yǎng)基。

待菌液吸收完全后，將接種好的培養(yǎng)基倒置放于指定溫度的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

平板劃線分離操作方法

平板劃線分離法是指把混雜在一起的微生物用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面通過(guò)分區(qū)劃線稀釋?zhuān)?jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當(dāng)作待分離微生物的純種。……