NDRG2和AKT2蛋白在原發(fā)性肝癌患者中的表達及與病理的相關(guān)性研究

吳美花

(泉州市第一醫(yī)院病理科，福建 泉州 362000)

原發(fā)性肝癌是我國發(fā)生率較高的惡性腫瘤，好發(fā)于東南沿海地區(qū)，多發(fā)生在40～50歲人群中，且男性發(fā)病率略高于女性[1]。原發(fā)性肝癌病因復雜，普遍認為與肝硬化、病毒性肝炎、黃曲霉素等化學致癌物質(zhì)有關(guān)，發(fā)病早期臨床癥狀不顯著，隨著病情不斷發(fā)展可表現(xiàn)為肝區(qū)疼痛、消化道癥狀及肝大等，影響患者的健康和生活[2]。N-myc下游調(diào)節(jié)基因2(NDRG2)是抑制腫瘤細胞的基因之一[3]。既往研究[4]表明：絲/蘇氨酸蛋白激酶2(AKT2)蛋白在原發(fā)性肝癌患者中呈高表達，能參與疾病的發(fā)生、發(fā)展。因此，本研究以原發(fā)性肝癌患者作為對象，探討NDRG2和AKT2蛋白在原發(fā)性肝癌患者中的表達及與病理的相關(guān)性，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選擇2017年6月～2019年4月原發(fā)性肝癌患者73例作為對象，男46例，女28例，年齡43～71歲，平均(58.49±4.61)歲；腫瘤直徑1～8 cm，平均(4.10±0.73)cm；分化類型：高分化32例，中分化28例，低分化13例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：是31例，否42例；病理類型：肝細胞肝癌35例，膽管細胞性肝癌20例，混合型肝癌18例；腫瘤分期：Ⅰ級～Ⅱ級49例，Ⅲ級～Ⅳ期24例。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究均獲得醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2方法：NDRG2和AKT2蛋白測定。①標本采集：所有患者均擬行手術(shù)治療，術(shù)中取病灶組織與癌旁組織(距離病灶≥3 cm)。②檢測方法：采用免疫組織化學法測定不同組織中NDRG2和AKT2蛋白陽性表達；取上述采集的標本，完成石蠟包埋后進行切片，常規(guī)脫蠟處理，完成抗原修復后，采用雙氧水將內(nèi)源性過氧化物酶活性消除，給予血清封閉后加入NDRG2和AKT2蛋白抗原，控制抗體濃度1∶200，持續(xù)過夜反應后加入二抗，反應后完成玻片的清洗，采用DAB常規(guī)顯色，蘇木素復染后，常規(guī)梯度酒精脫水，中性樹膠封片后，倒置顯微鏡下觀察組織形成。③判斷方法：陽性：病變細胞位于細胞核中，呈紅棕色；陰性：未發(fā)現(xiàn)一個細胞紅染。計算并比較兩組陽性表達率[5]。不同病理下NDRG2和AKT2蛋白表達。查閱病理資料，記錄患者性別、年齡、腫瘤直徑、病理類型、分化程度、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，分析不同病理狀態(tài)下NDRG2和AKT2蛋白表達。

2 結(jié)果

2.1不同組織中NDRG2和AKT2蛋白陽性率比較：原發(fā)性肝癌患者病灶組織中NDRG2和AKT2蛋白陽性率均高于癌旁組織中，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同組織中NDRG2和AKT2蛋白陽性率比較[例(%)]

2.2不同病理下NDRG2和AKT2蛋白表達：原發(fā)性肝癌組織中NDRG2和AKT2蛋白陽性率與性別、年齡及病理類型無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；與腫瘤直徑、分化程度、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

3 討論

原發(fā)性肝癌是臨床上常見的惡性腫瘤，發(fā)病早期臨床癥狀缺乏典型性，且隨著患者病情的不斷發(fā)展，臨床多表現(xiàn)為疼痛、全身癥狀等，導致臨床診斷、治療難度較大。NDRG2是一個在多種惡性腫瘤細胞系中呈高表達的基因，在人中樞神經(jīng)系統(tǒng)的大腦皮質(zhì)、白質(zhì)、神經(jīng)核、神經(jīng)細胞同樣屬終末分化的唾液腺細胞，且在骨骼細胞中亦呈高表達[6]。臨床研究[7]表明：NDRG2能參與細胞的增殖與分化，能促進腫瘤細胞系，屬于是一種促癌基因。國內(nèi)學者研究表明：NDRG2在原發(fā)性肝癌組織中表達較高，能直接參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸。AKT2蛋白是PI3K-AKT信號通路的重要組成部分，在原發(fā)性肝癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮了重要作用。本研究中，原發(fā)性肝癌患者病灶組織中NDRG2和AKT2蛋白陽性率均高于癌旁組織中，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，說明NDRG2和AKT2蛋白在原發(fā)性肝癌中呈高表達，能直接參與疾病的發(fā)生、發(fā)展。國內(nèi)學者[8]以原發(fā)性肝癌患者12例作為對象，所有患者均完成NDRG2和AKT2蛋白測定，結(jié)果表明：NDRG2和AKT2蛋白在原發(fā)性肝癌中呈陽性表達，與本研究結(jié)果相符。為了進一步分析NDRG2和AKT2蛋白在原發(fā)性肝癌中的作用及在不同病理中的表達，本研究中分析原發(fā)性肝癌患者不同病理下NDRG2和AKT2蛋白情況，結(jié)果表明：發(fā)性肝癌組織中NDRG2和AKT2蛋白陽性率與性別、年齡及病理類型無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；與腫瘤直徑、分化程度、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，說明NDRG2和AKT2蛋白與原發(fā)性肝癌病理存在明顯的關(guān)系，其表達水平能較好的反映患者疾病嚴重程度。原發(fā)性肝癌以手術(shù)、放化療為主，通過手術(shù)雖然能切除病灶組織，但是遠期預后較差，局部復發(fā)率較高；而放化療屬于是一種全身治療方法，毒副反應發(fā)生率較高，導致患者治療耐受性較差，積極采取有效的措施降低NDRG2和AKT2蛋白表達水平能為原發(fā)性肝癌治療提供新的思路。

表2 不同病理下NDRG2和AKT2蛋白表達(例)

綜上所述，NDRG2和AKT2蛋白在原發(fā)性肝癌患者中呈高表達，且與病理存在緊密的聯(lián)系，有望成為原發(fā)性肝癌治療新靶點。