大黃甘草消積顆粒的制備研究

（西北民族大學(xué)化工學(xué)院 甘肅 730106）

大黃為廖科植物掌葉大黃（Rheum palmatum）、藥用大黃（Rheum palmatum var-tanguticum）、唐古特大黃（Rheum officinale）的根或者莖的合稱，常用作中藥[1]。甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch）多年生草本，根與根狀莖粗壯，產(chǎn)與東北、華北、西北各省區(qū)以及山東，其根與莖可入藥[2]。

現(xiàn)代研究證實(shí)，大黃的主要活性成分是蒽醌類化合物，以游離和結(jié)合兩種形式存在。目前普遍認(rèn)為，大黃中產(chǎn)生瀉下作用的有效成分是結(jié)合型蒽醌類化合物[3]。但是大黃的藥效迅猛，瀉下力強(qiáng)，一般不適用于單獨(dú)用藥。張仲景的《金匱要略》中記載：以大黃為主，甘草為輔組成大黃甘草湯可以用于治療實(shí)熱積滯，食入即吐，大便秘結(jié)，胃熱上中所致的嘔吐。其中甘草有味甘性平，清熱解毒，緩急止痛，調(diào)和藥性的作用。現(xiàn)代研究表明，甘草酸能阻止單獨(dú)用大黃引起的結(jié)腸劇烈收縮，從而緩解疼痛[4-6]。

中藥配方顆粒是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，以傳統(tǒng)中藥飲片為原料，采用一定的生產(chǎn)工藝制成的提取物與適宜的輔料制成的僅供臨床調(diào)研用的顆粒狀制劑，其具有質(zhì)量可控、劑量準(zhǔn)確、便于服用、隨癥加減的優(yōu)勢(shì)[7-10]。本實(shí)驗(yàn)以大黃甘草湯藥案為基礎(chǔ)，采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化出大黃的提取工藝[11-18]，初步制備大黃甘草顆粒，以期為后續(xù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究提供參考。

1.儀器與材料

（1）儀器。紫外可見分光光度計(jì)（He λ ios β型-美國(guó)熱電公司）；分析天平（FA1204型-上海精密科學(xué)儀器有限公司）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（HH-4-上海合恒儀器設(shè)備有限公司）；恒溫干燥箱（DHG-9030A-上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海續(xù)航科學(xué)儀器有限公司）；冰箱（BCD-160TMPQ型-海爾公司）等。

（2）試劑。掌葉大黃；甘草；1,8-二羥基蒽醌（中國(guó)食品藥品檢定院）；醋酸鎂；三氯甲烷；無水乙醇（分析純）；甲醇；蒸餾水；濾紙。

2.實(shí)驗(yàn)方法

（1）對(duì)照品溶液制備及工作曲線的繪制。精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的1,8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)品5mg，置于100ml容量瓶中，用醋酸鎂甲醇溶解。配制一系列不同濃度的對(duì)照品溶液，先進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描確定最大吸收波長(zhǎng)，然后在λmax處進(jìn)行測(cè)定各吸光度，結(jié)果如圖1所示。

圖1 工作曲線

（2）大黃提取液的制備。以《金匱要略》中大黃甘草湯的復(fù)方藥案為基礎(chǔ)，即大黃與甘草質(zhì)量比為4:1，采用醇提法來提取大黃中蒽醌類成分，以料液比（A,min）、提取時(shí)間（B,min）、提取次數(shù)（C,次）、乙醇濃度（C,%）等4個(gè)因素為影響因素，以蒽醌類物質(zhì)提取率為指標(biāo)，采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化提取方案如表1，結(jié)果如表2所示。

表1 正交實(shí)驗(yàn)因素水平

表2 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

（3）供試品溶液的制備。取各醇提液5ml，加8%鹽酸溶液10ml,超聲處理2min，再加三氯甲烷10ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘?jiān)哟姿徭V甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加1%醋酸鎂甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得總蒽醌溶液。

取各醇提液5ml于分液漏斗中，加10ml三氯甲烷，分取三氯甲烷層。上層溶液再用三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘?jiān)哟姿徭V甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加1%醋酸鎂甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得游離蒽醌溶液。

3.結(jié)果與分析

表3 總蒽醌含量極差分析結(jié)果

表4 游離蒽醌含量極差分析結(jié)果

根據(jù)極差R的大小，可以判斷各因素對(duì)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的主次影響。對(duì)于總蒽醌提取率來說RD＞RC＞RA＞RB，D為主要影響因素，B為不重要因素。對(duì)于游離蒽醌提取率來說D為主要影響因素，A為不重要因素。從生產(chǎn)實(shí)際以及資源綜合利用角度考慮，可以將提取工藝確定為A3B1C3D2，即采用12倍量80%乙醇，提取3次，每次提取30min。

4.制備

按處方比例4:1稱取大黃和甘草，采用12倍量80%的乙醇，提取3次，每次提取30min。然后合并煎液進(jìn)行減壓濃縮得到浸膏[19-21]。加入蔗糖、淀粉等輔料混合后制軟材，過18號(hào)篩制粒，于65℃下烘干5h，整粒，即得成品，大黃甘草消積顆粒。