酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)用于艾滋病篩檢人群HIV抗體的臨床價(jià)值

趙 丹

（盤錦市大洼區(qū)疾病預(yù)防控制中心，遼寧 盤錦 124200）

艾滋病是一種常見的傳染性疾病，是除癌癥、心腦血管疾病外對人類生命安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅的疾病。在全球范圍內(nèi)，艾滋病的流行趨勢較為嚴(yán)峻，我國是艾滋病感染率較高、感染率增長速度較快的地區(qū)之一[1-2]。人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）抗體篩查是防治艾滋病關(guān)鍵。血清學(xué)檢驗(yàn)是臨床上開展HIV抗體篩查的主要方法，臨床上常用的HIV抗體檢測方法有很多，目前常見的是酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）與膠體金法[3]。本研究旨在探討酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)用于艾滋病HIV抗體篩查中的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月至2019年12月因具有艾滋病高危感染風(fēng)險(xiǎn)而在疾控中心接受艾滋病篩查的75例HIV自愿咨詢檢測者作為研究對象。其中男性63例，女性12例；年齡18～55歲，平均年齡（41.80±8.02）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①因與艾滋病感染患者接觸而具有艾滋病感染高危風(fēng)險(xiǎn)。②神志清醒。③自愿接受HIV抗體篩查。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并血液系統(tǒng)疾病。②合并其他傳染性疾病。③意識(shí)障礙或精神障礙。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 真空采血器，KHB ST-360酶標(biāo)儀（上海科華有限公司），邁瑞M W-1 2 洗板機(jī)（深圳邁瑞公司），HWT-6A恒溫水浴箱（天津恒奧有限公司），酶聯(lián)免疫吸咐試劑盒是珠海麗珠試劑股份有限公司生產(chǎn)，膠體金法快速檢測試劑是英科新創(chuàng)科技公司生產(chǎn)股份有限公司提供。

1.2.2 檢測方法 采集高危人群的血清標(biāo)本，按照《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》進(jìn)行HIV抗體檢測，嚴(yán)格按照儀器操作手冊及試劑使用說明書進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)操作和結(jié)果判定。所有血清標(biāo)本均采用ELISA及膠體金法2種方法進(jìn)行初篩檢測，標(biāo)本初篩檢測陽性待復(fù)查，及時(shí)送到確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)檢確認(rèn)。所用試劑經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)、在有效期內(nèi)的試劑，有效試驗(yàn)的陰性和陽性必須符合試劑盒規(guī)定。對血液樣本及時(shí)進(jìn)行血清離心處理，避免溶血，離心半徑10 cm，離心速度3 000 r/min，持續(xù)8 min后取上層清液作為待檢標(biāo)本，提取血清時(shí)不能吸入纖維蛋白。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 （聚苯乙烯微量反應(yīng)板）表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型，出現(xiàn)顏色反應(yīng)，可通過底物的顏色反應(yīng)來判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比；按照試劑說明書即經(jīng)過加樣、溫育、洗滌和顯色的過程。用膠體金法對HIV抗體進(jìn)行檢測，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，取規(guī)定量的待測血清于樣品孔中，然后滴加1滴樣品稀釋液，規(guī)定時(shí)間內(nèi)判斷結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo) 比較 ELISA與膠體金法對艾滋病高危受檢者HIV抗體的篩查靈敏度、特異度、約登指數(shù)、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、假陽性率、假陰性率，并針對HIV抗體陽性患者進(jìn)行分析。靈敏度=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%，特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%，約登指數(shù)=靈敏度+特異度-1，陽性預(yù)測值=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%，陰性預(yù)測值=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%，假陽性率=假陽性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%，假陰性率=假陰性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用（）表示，組間比較行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)；P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

75例HIV自愿咨詢檢測者中，ELISA初篩檢出13例HIV抗體陽性，其余62例為陰性；而膠體金法初篩檢出9例HIV抗體陽性，其余66例HIV抗體陰性，2種試劑檢測結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。ELISA對HIV抗體初篩陽性的靈敏度、約登指數(shù)、陰性預(yù)測值、假陰性率均高于膠體金法（P＜0.05），而ELISA與膠體金法的特異度、陽性預(yù)測值、假陽性率比較，均無明顯差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1、2。

表1 ELISA與膠體金法對HIV抗體的篩查結(jié)果（n）

表2 ELISA與膠體金法對HIV抗體的篩查結(jié)果比較（%）

3 討 論

艾滋病是一種獲得性免疫缺陷綜合征，主要由HIV感染致病?；颊咴诨疾『螅涿庖呦到y(tǒng)遭到破壞，易累及多個(gè)系統(tǒng)和組織，受到病原微生物的入侵。HIV可經(jīng)口腔、生殖器、體液等接觸進(jìn)行傳播。吸毒人群、男男性行為人群、多個(gè)性伴侶人群等均為感染艾滋病的高危人群。為做好吸毒人群的艾滋病防治工作，公共衛(wèi)生領(lǐng)域主張針對HIV感染高危人群進(jìn)行HIV抗體篩查，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)HIV陽性，及時(shí)給予隔離治療[4-5]。

血清學(xué)檢驗(yàn)是臨床上開展HIV抗體初篩的主要方法，臨床上常用的HIV抗體檢測方法有很多，WHO指出理想的HIV抗體篩查方法應(yīng)該是快速、簡便、具有高靈敏度的方法[6-7]。膠體金法、ELISA是臨床上用于HIV抗體初篩的常用檢測方法。其中膠體金法具有檢測快速、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)，而ELISA的操作較為簡便，可對組織標(biāo)本、血液標(biāo)本中的HIV抗體進(jìn)行直接檢測，其靈敏度較高[8-14]。臨床上關(guān)于膠體金法、ELISA用于HIV抗體初篩中孰優(yōu)孰劣尚存在爭議。本研究針對這一爭議問題開展研究，針對具有艾滋病高危感染風(fēng)險(xiǎn)的75例HIV自愿咨詢檢測者進(jìn)行HIV抗體初篩，結(jié)果顯示ELISA對HIV抗體初篩陽性的靈敏度、約登指數(shù)、陰性預(yù)測值、假陰性率均高于膠體金法（P＜0.05），而ELISA與膠體金法的特異度、陽性預(yù)測值、假陽性率比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明ELISA用于HIV抗體初篩中的靈敏度、準(zhǔn)確性高于膠體金法，對HIV抗體陽性的初篩檢出率更高，故可將ELISA在HIV抗體初篩中進(jìn)行推廣，但ELISA檢測HIV抗體具有一定的假陽性率，在篩查時(shí)應(yīng)先采用ELISA進(jìn)行HIV抗體初篩，再進(jìn)一步復(fù)查[15-20]。

本研究中有13例經(jīng)ELISA初篩為陽性的HIV高危感染受檢者具有HIV高危感染風(fēng)險(xiǎn)，主要與吸毒、男性行為、多個(gè)性伴侶等因素有關(guān)。臨床應(yīng)針對上述因素實(shí)施積極防控，加大對艾滋病預(yù)防的宣傳力度，重點(diǎn)對男男性行為人群、多個(gè)性伴侶人群進(jìn)行健康宣教，提倡健康性行為，并在性行為發(fā)生時(shí)做好防護(hù)措施，同時(shí)加強(qiáng)禁毒戒毒宣傳，規(guī)范輸血操作。

綜上所述，ELISA用于艾滋病高危風(fēng)險(xiǎn)人群HIV抗體篩查中具有良好的診斷價(jià)值，可提高HIV抗體陽性檢出率，為艾滋病的防治提供參考依據(jù)。