探析楠木枝枯病病原菌鑒定及系統(tǒng)發(fā)育

楊小珍 黃佳銳 唐海 吳玉偉

摘? ? 要：楠木枝枯病是楠木樹種生長發(fā)育過程中的常見病害之一，一定程度上影響了楠木的生長成材。在我國楠木種植的過程中，有效控制枝枯病，對于楠木培育具有重要的作用。針對楠木枝枯病進行了分析，研究了楠木枝枯病的病原菌鑒定及系統(tǒng)發(fā)育問題，闡述了楠木枝枯病病原菌鑒定及系統(tǒng)發(fā)育的具體特點。

關鍵詞：楠木;枝枯病;病原菌鑒定;系統(tǒng)發(fā)育

文章編號： 1005-2690（2021）01-0071-02? ? ? ?中國圖書分類號： S763.7? ? ? ?文獻標志碼： A

楠木是我國林業(yè)種植中的重要樹種，也是一種珍貴的樹種，其不僅具有良好的生態(tài)意義，同時也具有一定的經(jīng)濟價值。但是，當前我國楠木種植的過程中，發(fā)現(xiàn)有枝枯病病害，造成了楠木種植區(qū)的病蟲害問題，也會在一定程度上影響楠木生長。所以，當前相關專家正在研究楠木枝枯病病原菌鑒定及系統(tǒng)發(fā)育，對于楠木種植有非常重要的影響。

1? ?楠木及枝枯病簡要介紹

1.1? ?楠木

楠木是我國名貴樹種之一，在我國古代，楠木家具是非常名貴的奢侈品。楠木也具有良好的生態(tài)作用，對楠木長期的使用和開采，導致其成為我國重要的保護樹種，被列為二級保護樹木。楠木屬于中亞熱帶樟科常綠大喬木，其主要分布于亞熱帶常綠闊葉林區(qū)，生長在溫度0～38 ℃、降水量為1 400～1 700 mm的亞熱帶區(qū)域，在我國種植中大部分楠木分布在四川、云南、浙江及貴州等地區(qū)。

楠木是長勢相對高大的樹種，其高度可以達到30 m，主要分為楨楠屬（phoebe nees）和潤楠屬（Machilus nees）兩種木材。其中黃楠及小葉楠屬于楨楠屬楠木，而滇楠及紫楠屬于潤楠木材。并且在楠木中，其木材紋理中包含有金絲的品種，被稱為金絲楠，具有非常高的經(jīng)濟價值。

當前，楠木已經(jīng)被列為國家二級保護物種，其主要是由于開發(fā)較早，并且缺乏保護造成的。經(jīng)過長時間的采伐和使用，楠木數(shù)量急劇減少。而采用人工培養(yǎng)的方式，其病蟲害問題的處理相對較困難，導致其培養(yǎng)過程中造成了大量植株死亡。在楠木種植過程中，發(fā)現(xiàn)一種新型病害——枝枯病，一定程度上影響了楠木的生長。所以，當前楠木種植過程中，應該對枝枯病進行有效的預防和治理，促進楠木種植效果提升。

1.2? ?楠木枝枯病

楠木種植過程中，受到病蟲害的影響相對較多，其中包括炭疽病、白絹病、葉銹病、葉斑病等病害，對于楠木生長造成了嚴重的影響。而在當前楠木種植過程中，發(fā)現(xiàn)了枝枯病。其是受到多種病原菌的影響而形成的楠木病害，對于楠木生長發(fā)育產(chǎn)生了較大的影響。楠木枝枯病發(fā)生后，其主要的表現(xiàn)癥狀是楠木樹種干枯，嚴重時造成樹枝脫落問題。另外，在楠木出現(xiàn)枝枯病后，也會出現(xiàn)楠木枝葉發(fā)黃、楠木枝葉皮層裂開等問題，原因是在楠木枝枯病發(fā)病后，其木質(zhì)部組織出現(xiàn)病變問題。在實際的楠木種植過程中，如果對楠木枝枯病處理不夠及時，將會導致病原菌蔓延整個植株，最終導致楠木植株壞死。

楠木枝枯病對楠木生長的影響非常大，給楠木種植造成了大量的直接損失，所以在楠木種植過程中，應該對楠木枝枯病病原菌進行詳細的了解，從而做好楠木枝枯病的有效預防。當前相關專家研究發(fā)現(xiàn)，楠木枝枯病病原菌主要是半知菌綱及葡萄座腔類真菌，并且在核桃及松樹發(fā)生的枝枯病中半知菌綱及葡萄座腔類真菌也是引起枝枯病的主要原因之一。所以，在當前楠木枝枯病有效的研究過程中，應該針對葡萄座腔類真菌進行有效的研究，其中包括病原菌鑒定及系統(tǒng)發(fā)育等，通過對其病原菌的研究，能夠設計病原菌的合理控制策略，最終對楠木枝枯病進行有效的預防。

2? ?楠木枝枯病的病原菌鑒定及系統(tǒng)發(fā)育

2.1? ?病原菌培養(yǎng)過程

楠木枝枯病的病原菌鑒定及系統(tǒng)發(fā)育分析，對于病原菌的合理控制有非常重要的作用。當前在楠木枝枯病病原菌研究過程中，研究小組選取某森林公園的古楠木進行調(diào)查，選取楠木種植園區(qū)的5個種植帶進行枝枯病楠木取樣，并對楠木枝枯病病原菌進行鑒定和分析。具體的分析過程中，采用組織分離法對楠木病枝進行分離獲取，最終促進楠木病枝的病菌采取。實際采集中將楠木枝枯病病枝進行病斑枝條截取，并利用75%乙醇及1%次氯酸鈉溶液進行處理。同時選擇無菌水進行表面清洗，做好滅菌后病原菌的培養(yǎng)，其中培養(yǎng)溫度應該控制在25 ℃左右，而將其病原菌培養(yǎng)于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基當中，促進葡萄糖瓊脂效果提升。在病菌培養(yǎng)的過程中，需恒溫25 ℃的條件下培養(yǎng)3 d，培養(yǎng)完畢后選擇無菌環(huán)境下挑選單菌落病原，并將采集好的病原放置在器皿中保存，溫度應該控制在4 ℃左右[1]。

2.2? ?病原菌培養(yǎng)特性觀察

病原菌培養(yǎng)觀察過程中，對病原菌進行良好的特性觀察非常關鍵，其具體操作步驟包括以下幾方面內(nèi)容。

（1）病原菌培養(yǎng)特性觀察中，首先將其從4 ℃環(huán)境取出，并將菌株放置在PDA板中培養(yǎng)，其觀察過程中要設置無光照條件的特性。為了有效地觀測病原菌，應該將菌株觀測置于10 ℃、25 ℃及35 ℃的環(huán)境中進行培養(yǎng)和觀察，實際的觀察過程中，主要觀察病原菌菌絲生長狀態(tài)、菌落特性（正面及背面顏色）和病原菌色素分泌速度等狀況，對于病原菌的良好控制有非常重要的作用。

在實際的觀察過程中，選擇使用SHINESO MF2菌落觀察裝置進行觀測，保證其觀測效果更加良好。在病原菌醫(yī)學培養(yǎng)觀察的過程中，還要針對病原體的菌絲邊緣擴展速度進行觀察，同時針對病菌菌絲平均生長速度進行有效的觀測。觀測過程中，使用打孔器對菌落進行打孔，打孔裝置選擇使用6 mm孔徑的，并選擇十字畫線方法進行測量，測量次數(shù)設計為5次，并且測量時間間隔在24 h左右，保證測量具有精準性，對病菌菌落的平均生長速率進行研究。

（2）在實際的觀察過程中，針對病菌的菌株孢子進行了有效的觀察。通過病菌孢子的觀察，保證其分析更具有合理性。在觀察過程中，將病菌置于載玻片上，并對載玻片采用酒精進行消毒擦拭，并利用蓋玻片對水分進行吸收，實際的觀察過程中選擇使用NINKON 50i顯微鏡進行孢子觀察，主要觀察孢子大小等。

本次考察還針對孢子培養(yǎng)基進行了研究，在實際的研究過程中，孢子培養(yǎng)基可以選擇PDA培養(yǎng)基，其培養(yǎng)基內(nèi)包含土豆200 g、蔗糖20 g、瓊脂20 g及蒸餾水1 000 mL。另外，還可以使用燕麥瓊脂培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，其中包括瓊脂15 g、蒸餾水1 000 mL及燕麥片100 g等[2]。

2.3? ?病原菌鑒定及系統(tǒng)發(fā)育分析

在進行病原菌鑒定的過程中，針對病菌進行致病性測定、形態(tài)鑒定及分子生物學鑒定。實際的鑒定過程中，主要包括以下幾方面內(nèi)容。

（1）病原菌致病性測定分析。具體測定過程中，對病斑數(shù)及病斑大小進行觀察，也要將病原接回到健康的植株上，在病斑數(shù)分析中，將病斑分為A、B、C 3個等級，其中C等級為病斑大小在10 mm之上的、B等級為病斑大小在5～10 mm的、A等級為病斑大小在5 mm以下的。

在實際的病斑分析過程中，根據(jù)病斑大小對感染指數(shù)進行分析，其中感染指數(shù)計算公式為：感染指數(shù)=∑（病級個數(shù)×代表指數(shù)/個數(shù)總和×發(fā)病最重一級代表數(shù)值）×100[3]，通過實際的計算了解到感染問題，并對病菌的致病性進行分析，在計算過程中病害感染指數(shù)越高，則表示其致病性越強。

（2）進行病原菌形態(tài)鑒定。在實際的病原菌分析過程中，對病原菌進行良好的分析，在28 ℃下進行保濕培養(yǎng)，保證病原菌培養(yǎng)狀態(tài)合理。另外，在實際的鑒定觀察過程中，選擇顯微鏡進行病原菌分析，主要觀察病菌的顏色、形狀、大小、紋路等，通過分析合理地了解病原菌狀態(tài)。

（3）對病原菌進行生物學特性分析，其中主要包括不同碳源對菌絲生長的影響、不同氮源對菌絲生長的影響及不同培養(yǎng)基對菌絲生長的影響。通過對病菌生物學特性的分析，對病菌進行更加詳細的了解[4]。

3? ?楠木枝枯病有效預防措施

楠木枝枯病是影響楠木生長的重要病害之一，所以為了保證楠木生長良好，也要做好楠木枝枯病的有效預防，從而保證楠木枝枯病預防更加合理。在當前楠木枝枯病預防過程中，主要可以采取幾種方式進行控制，如選擇50%多菌靈粉劑或者40%退菌特作為藥劑，可以起到良好的枝枯病預防效果。

另外，在實際的楠木枝枯病控制過程中，還可以選擇百菌清及福美雙等藥劑，可以實現(xiàn)病毒的有效處理，從而保證楠木枝枯病處理更加高效，也要做好相應苗木的有效預防。通過對楠木枝枯病的有效處理，在最大程度上提升楠木的保護效果。

4? ?結(jié)束語

本文針對楠木枝枯病進行了分析研究，主要介紹了枝枯病的發(fā)病狀態(tài)，也從枝枯病的生物學特性、培養(yǎng)學特性及致病性等方面闡述了楠木枝枯病的鑒定和發(fā)育特點，并提出了楠木枝枯病預防措施，希望能夠?qū)﹂局莶〉挠行Ы鉀Q有所幫助，促進楠木樹種的生長成材。

參考文獻：

[ 1 ] 岳陽，吳利平，夏俊勇，等.楠木枝枯病病原菌鑒定[J].植物病理學報，2019（5）：126-131.

[ 2 ] 仇碩，夏科，李秀娟，等.龍牙百合兩種病害致病菌的分離、鑒定及抑制效應研究[J].廣西植物，2018（1）：109-118.

[ 3 ] 路梅，凌丹燕，馬錫文，等.藍莓枝枯病病原菌分離鑒定及孢子萌發(fā)條件研究[J].廣東農(nóng)業(yè)科學，2018（4）：120-126，179.

[ 4 ] 王慶靈，于貴朋，邢軍超，等.河北省葡萄座腔菌科菌物系統(tǒng)分類研究[J].中南林業(yè)科技大學學報，2020（2）：22-33.