老年冠心病患者PCI術后血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平變化及意義

鄭彬彬 范曉涌 柴輝 佟勤紅 吳璦斌

(蘭州市第一人民醫院心血管內科,甘肅 蘭州 730050)

冠心病是威脅我國居民生命健康的主要疾病之一,隨著生活、工作壓力的增加及人口老齡化,其發病率呈上升趨勢〔1〕。經皮冠狀動脈介入(PCI)能夠快速開通血管,改善心肌血流灌注,被廣泛用于冠心病的臨床治療〔2〕。但PCI術后遠期療效受多種因素影響,準確評估患者預后水平對術后治療方案的合理制定具有重要參考價值。細胞間黏附分子(ICAM)-1屬于免疫球蛋白超家族,在血管內皮細胞表面黏附后參與炎癥反應過程,與動脈粥樣硬化的發生與發展密切相關〔3〕。微小RNA(miR)-19b在胸主動脈夾層患者血漿中含量明顯下降,miR-19b低表達會抑制血管平滑肌細胞增殖〔4〕。視黃醇結合蛋白(RBP)4是肝臟合成的維生素轉運蛋白,廣泛分布于血液、尿液等體液中,作為維生素A的特異性載體蛋白,參與其轉運過程〔5〕。相關研究顯示,RBP4與2型糖尿病、脂代謝異常等慢性病密切相關,可能通過內分泌代謝、慢性炎癥反應等發揮作用,而2型糖尿病、高脂血癥等慢性病是冠心病的危險因素〔6〕。本研究旨在探討老年冠心病患者PCI術后血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平變化及意義。

1 對象與方法

1.1研究對象 選取2021年7月至2022年5月因行PCI術在蘭州市第一人民醫院住院治療的老年冠心病患者115例。入選標準:①年齡≥60歲,冠狀動脈造影檢查顯示主要冠狀動脈和大分支的狹窄程度達到50%及以上;②符合PCI術適應證,自愿接受PCI術治療;③配合完成隨訪。排除標準:①近1年有冠狀動脈支架植入史者;②合并惡性腫瘤、自身免疫性疾病者。其中男59例,女56例;年齡60～74歲,平均(69.03±7.91)歲;體質量指數(BMI)21～27 kg/m2,平均(23.19±1.78)kg/m2;飲酒史19例,吸煙史17例。根據PCI術后6個月的隨訪結果分為預后不良組24例,預后良好組91例。本研究經醫院倫理委員會審核通過,患者自愿參與本研究并簽署知情同意書。

1.2資料收集 收集老年冠心病患者性別、年齡、BMI、飲酒史、吸煙史、發病至球囊擴張時間、多支病變、病程、支架長度、支架直徑,病變部位(右冠狀動脈、左前降支、左回旋支),冠狀動脈Gensini評分。其中Gensini評分根據冠狀動脈造影結果對每支冠狀動脈進行定量評定:冠狀動脈造影狹窄程度≤25%計1分,26%～50%計2分,51%～75%計4例,76%～90%計8分,91%～99%計16分,100%計32分;冠狀病變部位為第二對角支、后側支系數為0.5;左前降支遠段、后降支、左回旋支選段、第一對角支、右冠狀動脈系數為1;左前降支中段、左回旋支中段系數為1.5;左前降支近段、左回旋支近段系數為2.5;左主干系數為5。

1.3血清ICAM-1、RBP4濃度檢測 分別于PCI術前、術后3 d采集外周靜脈血5 ml,2 000 r/min離心15 min,收集血清后-20 ℃保持待測。酶聯免疫吸附試驗測定患者PCI前、術后3 d血清ICAM-1、RBP4濃度,其中ICAM-1試劑盒購于康朗(上海)生物科技有限公司,RBP4試劑盒購于上海一研生物科技有限公司。

1.4時實熒光定量(RT)-聚合酶鏈反應(PCR)檢測血清miR-19b表達水平 將血清轉入EP管中,按1 mg/μl的比例加入預冷的Trizol提取總RNA,加入預熱的焦碳酸二乙酯處理并經高溫高壓滅菌的超純水,完全溶解后測定RNA純度,-80 ℃保存。使用cDNA合成試劑盒逆轉錄得到cDNA,保存于-20 ℃備用。PCR擴增按照試劑盒說明書進行。miR-19b上游引物5′-CCCTTTTGACCTGCACCTCCA C-3′,下游5′-ACCAAAGTGTCGACCTAAACGG-3′,擴增產物片段115 bp。U6上游引物5′-TGTCCAGAAA CGCCTAACTACTC-3′,下游5′-GAATCACAATGTGG GCCACTGAG-3′,擴增產物片段180 bp。PCR體系20 μl:10倍反應緩沖液3 μl,cDNA模板1 μl,dNTP 2 μl,上游引物1 μl,下游引物1 μl,Taq酶0.5 μl,雙蒸餾水11.5 μl。共反應40個循環,以U6為內參計算相對表達量。

1.5隨訪 PCI術后進行6個月隨訪,記錄主要不良心血管事件發生情況,包括再發心絞痛10例、冠狀動脈再狹窄9例、再發心肌梗死3例、心源性死亡2例,納入預后不良組;其余91例納入預后良好組。

1.6統計學分析 采用SPSS25.0統計學軟件進行t檢驗、χ2檢驗、多因素Logistic回歸分析及受試者工作特征(ROC)曲線分析。

2 結 果

2.1兩組人口學特征及臨床指標比較 預后不良組發病至球囊擴張時間、多支病變比例、冠狀動脈Gensini評分明顯高于預后良好組(P<0.05);性別比例、年齡、BMI、飲酒史比例、吸煙史比例、病程、支架長度、支架直徑、病變部位差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2手術前后血清ICAM-1、RBP4水平及miR-19b表達比較 老年冠心病患者PCI術后3 d血清ICAM-1、RBP4水平低于手術前,血清miR-19b表達水平高于手術前,差異有統計學意義(P<0.01)。見表2。

表2 手術前后血清ICAM-1、RBP4水平及miR-19b比較

2.3兩組血清ICAM-1、RBP4水平及miR-19b表達比較 預后不良組血清ICAM-1、RBP4水平高于預后良好組,血清miR-19b表達水平低于預后良好組,差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組血清ICAM-1、RBP4水平及miR-19b表達比較

2.4老年冠心病患者PCI預后的多因素Logistic回歸分析 以老年冠心病患者PCI預后情況為因變量(預后不良=1,預后良好=0),發病至球囊擴張時間、多支病變比例、冠狀動脈Gensini評分及血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平為自變量,進行多因素Logistic回歸分析顯示,多支病變比例、冠狀動脈Gensini評分及血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平是PCI預后的獨立影響因素(P<0.01)。見表4。

表4 老年冠心病患者PCI預后的多因素Logistic回歸分析

2.5血清ICAM-1、miR-19b、RBP4對老年冠心病患者PCI預后的預測價值 構建ROC曲線,以血清ICAM-1、miR-19b、RBP4評估老年冠心病患者PCI預后的敏感度為縱坐標,以1-特異性為橫坐標,結果顯示,血清ICAM-1、miR-19b、RBP4對老年冠心病患者PCI預后均具有較高的預測價值(P<0.01)。將血清ICAM-1、miR-19b、RBP4納入Logistic回歸模型結果顯示,各指標聯合檢測的預測價值最高〔曲線下面積(AUC=0.942〕。見表5、圖1。

3 討 論

冠心病是全球患病率和死亡率最高的疾病之一,每年約2 000萬人死于心臟病。隨著我國社會經濟的快速發展、居民生活方式的轉變,特別是伴隨人口老齡化的加速,冠心病患者數呈逐年上升趨勢〔7〕。PCI治療、抗凝藥物、抗血小板藥物是目前臨床治療冠心病的主要手段。雖然PCI治療能夠快速控制和緩解冠心病病情,但無法痊愈,治療后仍需注意全身代謝、血小板治療、其他冠狀動脈狹窄等,改善預后水平。流行病學研究顯示,即使冠心病患者已接受PCI治療,且接受雙抗、他汀等治療,2年內仍有10%以上的患者出現心肌梗死、支架血栓、腦卒中等心腦血管不良事件,老年冠心病患者因身體功能下降,心腦血管不良事件的發生率更高〔8〕;因此,準確評估老年冠心病患者PCI預后對治療、隨訪方案的合理制定,改善預后水平具有重要意義。正常生理狀態下人體ICAM-1低表達,冠狀動脈的血管內皮細胞在缺血狀態下會大量分泌炎癥細胞因子,進而上調ICAM-1表達〔9〕。研究顯示,ICAM-1可上調內皮細胞中的促白細胞黏附組織,進而促進炎癥過程,加速血管活性物質合成與釋放,引發心肌缺血、心肌缺氧〔10〕。亦有研究顯示,冠心病患者處于進展期時,內皮細胞中的ICAM-1逐漸轉變為平滑肌細胞、巨噬細胞,促進平滑肌增生,增加PCI后冠心病患者不良預后的發生風險〔11〕。

miRNA能夠穩定存在于人體組織細胞中,研究顯示,急性冠狀動脈綜合征患者血清miR-19b表達水平明顯下降,可能是病情進展的潛在標志物〔12〕。亦有研究顯示,miR-19b過表達能夠減輕血管內皮損傷,降低血管內炎癥反應程度〔13〕。RBP4是肝臟分泌的脂肪因子,能夠參與胰島素抵抗、脂代謝異常、炎癥反應等過程〔14〕。研究報道顯示,RBP4與冠心病、急性冠狀動脈綜合征密切相關,其水平變化可用于評估冠心病病情嚴重程度和預后〔15〕。糖脂代謝異常參與冠狀動脈粥樣硬化的發生與發展,而冠狀動脈粥樣硬化是冠心病的主要病理基礎。冠心病患者血清RBP4水平越高,冠狀動脈病變嚴重程度和病變血管支數越多,癥狀越嚴重〔16〕。本研究結果提示,PCI治療能夠降低患者ICAM-1、RBP4表達,升高miR-19b表達,進而改善老年冠心病患者病情。

目前關于血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平變化與老年冠心病患者PCI治療預后關系的研究仍未見相關報道。本研究結果提示,血清ICAM-1、miR-19b、RBP4與老年冠心病患者PCI治療預后密切相關,可用于PCI治療預后評估。進一步分析顯示,血清ICAM-1、miR-19b、RBP4聯合檢測對PCI治療預后的預測價值最高,同時還應當觀察患者冠狀動脈病變情況,合理制定治療方案,改善患者預后水平。