雞源鴨疫里默桿菌的分離鑒定及ompA基因遺傳進化分析

李富祥，趙文華，宋建領，朱建波，楊仕標

(云南省畜牧獸醫科學院 云南省熱帶亞熱帶動物病毒病重點實驗室，云南 昆明 650224)

里默桿菌屬于黃桿菌綱(Flavobacteriia)、黃桿菌目(Flavobacteriaceae)、黃桿菌科(Flavobacteriales)、里默桿菌屬(Riemerella),該屬包括鴨疫里默桿菌(Riemerellaanatipestifer，RA)和鴿里默桿菌(Riemerellacolumbina，RC)、鴿咽喉里默桿菌(Riemerellacolumbipharyngis)3個種。其中，RA呈世界性分布，主要感染鴨，鵝、火雞和其他鳥類感染較少見[1-2]，雞RA感染十分罕見[3]。RA感染又稱新鴨病、鴨敗血癥、鴨疫綜合征、鴨疫敗血癥和傳染性漿膜炎，該病廣泛分布于世界各國。我國郭玉璞等[4]于1982年首次分離到鴨源RA，之后諸多省份均有RA感的報道，給養鴨業造成嚴重的經濟損失。近年來，我國福建[5]、江蘇[6]和廣東[7-8]等省份均有鵝源RA分離鑒定的報道。到目前為止，未見我國雞源RA分離鑒定的報道。

2020年1月，云南省昆明市某養雞場仔雞(鐵腳麻)發生一種臨床癥狀以精神沉郁、呼吸困難、咳嗽、打噴嚏、鼻腔有大量黏液性分泌物為特征，病理變化以嚴重腹水、心包炎和肝周炎為特征的病例。該病發病率為15.0%，病死率為46.7%，給養殖場造成較大的經濟損失。為查明病因，我們對該病例進行細菌學診斷，從病死雞肝臟分離到8株革蘭陰性多形桿菌，經形態學和16S rDNA分析鑒定為RA。本試驗還對8株雞源RA分離株ompA基因(outer membrane protein A gene，ompA)及其推導的蛋白(outer membrane protein A，OmpA)序列遺傳進化特征進行分析，為我國雞源RA感染的防制研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 主要試劑營養瓊脂、麥康凱瓊脂購自北京奧博星生物技術有限公司；細菌基因組提取試劑盒購自天根生化科技(北京)有限公司；……