ELISA 法對梅毒螺旋體感染的診斷價值

高麗楓

（赤峰學(xué)院教研室，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

0 引言

作為一種常見的性傳播疾病，梅毒的主要發(fā)病原因為梅毒螺旋體感染，其具有很高的發(fā)病率。梅毒不僅具有非常強的傳染力，而且對患者的危害很大，在發(fā)病早期會對患者的皮膚和生殖器造成危害，在病情不斷進(jìn)展的同時，還會損傷到患者的各個臟器，對其身體健康和生命安全具有很大威脅[1]。為了保證梅毒患者的身體健康，就必須要對其進(jìn)行早診斷和早治療。現(xiàn)階段臨床上在診斷梅毒時的方法很多，不同的方法在具體的檢測和診斷效果方面存在著一定的差異性，因此必須選擇合適的檢測方法對患者進(jìn)行檢測，保證其檢測準(zhǔn)確度[2-3]。對此，本文特選擇我院收治的相關(guān)病例，分析并研究了梅毒螺旋體感染的診斷中采用ELISA 法的效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在獲得本單位倫理部門批準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，選擇2018年6 月-2020 年11 月赤峰學(xué)院教研室收治的疑似梅毒感染的患者130 例納入研究，中有男79 例，女51 例女，年齡21～68 歲，平均（43.9±5.7）歲，其中有125 例確診，按照梅毒分期，其中包括37 例Ⅰ期，60 例Ⅱ期，28 例Ⅲ期。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合梅毒感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②知曉并且同意參與本次研究；③得到倫理部門批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他病毒感染性疾病；②長期接受抗生素和糖皮質(zhì)藥物治療；③合并免疫功能缺陷。

1.2 方法

首先抽取患者6mL 的靜脈血，然后在常溫的狀態(tài)下進(jìn)行靜置，在5min 后實施離心處理。分別通過ELISA 法以及甲苯按紅不加熱血清試驗（TRUST）法對兩組實施檢測，ELISA 法：將3mL 血清樣放置在試管當(dāng)中，對其中的血清進(jìn)行分離，然后采用北京萬泰生物公司提供的試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒中的操作規(guī)范對血清樣本進(jìn)行檢測，并且準(zhǔn)確地記錄檢測結(jié)果。TRUST 法：將3mL 血清樣放置在試管當(dāng)中，對其中的血清進(jìn)行分離，然后采用上海榮盛生物藥業(yè)有限公司提供的試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒中的操作規(guī)范對血清樣本進(jìn)行檢測，并且準(zhǔn)確地記錄檢測結(jié)果[4]。TPPA法：針對采集到的菌株實施純化處理，采用日本富士株式會社生產(chǎn)的試劑，嚴(yán)格按照試劑盒中的操作規(guī)范對血清樣本進(jìn)行檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩種檢測方法的診斷準(zhǔn)確度、靈敏度和特異度，其中靈敏度的計算標(biāo)準(zhǔn)為：真陽性病例/（真陰性病例+假陰性病例）×100%；特異度的計算標(biāo)準(zhǔn)為：真陰性病例/（真陰性病例+假陽性病例）×100%。將TPPA 法作為金標(biāo)準(zhǔn)，其中真陽性的判斷標(biāo)準(zhǔn)：ELISA 法、TRUST 法 檢 測為陽性，且TPPA 法 金標(biāo)準(zhǔn)檢測為陽性；真陰性的判斷標(biāo)準(zhǔn)：ELISA 法、TRUST 法檢測為陰性，且TPPA 法金標(biāo)準(zhǔn)檢測為陰性；假陽性的判斷標(biāo)準(zhǔn)：ELISA 法、TRUST 法檢測為陽性，但TPPA 法金標(biāo)準(zhǔn)檢測為陰性；假陰性判斷標(biāo)準(zhǔn)：ELISA 法、TRUST 法檢測為陰性，但TPPA 法金標(biāo)準(zhǔn)檢測為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 21.0 軟件包處理所有患者的臨床資料。計量資料以（）表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以（n）表示，采用卡方值檢驗。以P<0.05 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測結(jié)果

ELISA 法檢測出125 例陽性，5 例陰性，TRUST法檢測出104 例陽性，26 例陰性。見表1。

表1 檢測結(jié)果

2.2 診斷準(zhǔn)確度、靈敏度和特異度

ELISA 法的診斷準(zhǔn)確度為97.7%、靈敏度為98.4%，特異度為66.7%，TRUST 法的診斷準(zhǔn)確度為80.8%、靈敏度為76.8%，特異度為52.9%，ELISA 法的診斷準(zhǔn)確度、靈敏度和特異度明顯高于TRUST 法，數(shù)據(jù)比較（P<0.05）。見表2。

表2 診斷準(zhǔn)確度、靈敏度和特異度

3 討論

作為一種非常強的傳播性疾病，梅毒的主要病原體為梅毒螺旋體。梅毒具有很高的危害性，其會對患者的皮膚、黏膜等造成損害，在病情不斷進(jìn)展的同時，還會損害到患者的各個組織器官。梅毒患者的病情若是沒有得到及時有效的控制，很容易引起不可逆損害，因此必須要做到對梅毒感染患者的及早確診和及早治療，才能夠有效地保證患者的身體健康，防止梅毒傳染。人體是梅毒螺旋體的唯一傳染源，通常可以將梅毒劃分為兩種，一種是先天性梅毒，另外一種是獲得性梅毒。其中的先天性梅毒在臨床當(dāng)中也被稱作胎傳梅毒，其主要指的是通過母體胎盤將梅毒螺旋體傳染給胎兒，如果是在孕早期傳染，有可能會引起胎兒早產(chǎn)或流產(chǎn)，若是在晚期感染，則有可能導(dǎo)致成活胎兒發(fā)生感染。獲得性梅毒則主要指的是人體經(jīng)過接觸性的方式感染梅毒，比如污染物接觸、哺乳、性傳播、輸血傳播等。在感染梅毒之后，人體會出現(xiàn)兩種抗體，其中一種是特異性梅毒抗體，另外一種則是非特異性抗心磷脂抗體，其中的特異性梅毒抗體主要包括兩種，一種是IgG，另一種則是IgM。其中的前者往往具有比較短的存在時間，而后者則能夠在人體當(dāng)中實現(xiàn)長時間存在，甚至是終身存在，不過這種抗體具有比較低的濃度，很難有效地預(yù)防再感染。非特異性抗心磷脂抗體在臨床當(dāng)中也被稱作反應(yīng)素，組織細(xì)胞在遭受到梅毒螺旋體破壞之后，會將類脂樣物質(zhì)釋放出來，而梅毒螺旋體當(dāng)中的脂蛋白和類脂會在此刺激的作用下出現(xiàn)IgG 和IgM 抗體，在梅毒感染患者的血清當(dāng)中都能夠檢測出這些抗體。因此，在對梅毒進(jìn)行檢測的時候，必須要通過特異性的方法加以區(qū)分。

梅毒在近年來具有越來越高的發(fā)病率，在全球范圍內(nèi)的流行范圍和發(fā)病率均在持續(xù)增加，而且因為一些患者存在隱性感染，再加上一些私人診所接診的患者的具體數(shù)據(jù)很難予以準(zhǔn)確統(tǒng)計，所以與目前我們能看到的公開的數(shù)據(jù)相比，梅毒的真實發(fā)病率更高。梅毒不僅具有非常強的傳染性，而且潛伏時間長，患者在發(fā)病早期往往并沒有明顯的臨床癥狀，大多都屬于皮膚癥狀，很容易被忽視[5-6]。梅毒具有非常復(fù)雜的臨床表現(xiàn)，而且其在具體的病變部位方面也比較復(fù)雜和廣泛，在這種情況下，如果單純地依賴患者的體征和臨床癥狀對其進(jìn)行診斷很容易出現(xiàn)誤診或者漏診的情況，這就需要通過實驗室確診的方式對梅毒進(jìn)行診斷。目前尚不能夠做到在體外對梅毒螺旋體予以長期培養(yǎng)，與此同時，梅毒螺旋體的形態(tài)學(xué)檢查也存在著較多的限制，比如其樣本取材因素影響等，因此具有較低的靈敏度，所以，在對梅毒螺旋體感染進(jìn)行診斷的時候病原體感染后所引起的免疫反應(yīng)就變成了非常重要的一種依據(jù)。目前在梅毒的檢測中廣泛地應(yīng)用到了血清血檢測的方式，這種檢測方法不僅操作非常方便，而且具有很高的重復(fù)性，患者在感染大約兩周之后經(jīng)過檢測就會發(fā)生血清學(xué)反應(yīng)，因此在大面積篩查中得到了非常多的應(yīng)用[7]。現(xiàn)階段臨床上血清檢測的方法多種多樣，如何選擇更加有效的方法受到了臨床上的普遍重視。

梅毒螺旋體明膠顆粒凝聚試驗具有很高的敏感性和特異性，不過該試劑價格昂貴，很難被廣泛地應(yīng)用在臨床中。TRUST 法在梅毒的早期診斷以及預(yù)后效果的評估中比較適用，其具有價格低廉、操作簡單以及所需時間少等優(yōu)勢，不過一些梅毒患者在感染之后其血清當(dāng)中存在著一些非特異性抗體或者特異性抗體，影響到了檢測的準(zhǔn)確性[8-9]。ELISA 法可以檢測梅毒免疫球蛋白，具有很高的特異性和敏感性，在操作起來更加的簡單和方便，不過一些患者血清當(dāng)中具有內(nèi)源性物質(zhì)，也會對其檢測結(jié)果造成影響，再加上抗體與抗原之間會發(fā)生交叉反應(yīng)，導(dǎo)致發(fā)生假陽性[10]。在本次研究中，分別通過ELISA 法以及TRUST 法對患者實施檢測，將梅毒螺旋體明膠凝集檢測作為診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示，ELISA 法的診斷準(zhǔn)確度為97.7%、靈敏度為98.4%，特異度為66.7%，TRUST 法的診斷準(zhǔn)確度為80.8%、靈敏度為76.8%，特異度為52.9%，ELISA 法的診斷準(zhǔn)確度、靈敏度和特異度明顯高于TRUST 法，數(shù)據(jù)比較（P<0.05），這一結(jié)果符合宋勝偉[11]等的文獻(xiàn)報道，表明在梅毒螺旋體感染的診斷中采用ELISA 法效果更好。

綜上所述，在梅毒螺旋體感染的診斷中，采用ELISA 法效果確切，具有很高的準(zhǔn)確度、靈敏度和特異度。