廣西某鴿場乳鴿新城疫母源抗體消長情況分析

文明，秦楨富，萬茂生，蘇勤有，陸將存，蔣先彪*

（1.廣西壯族自治區陽朔縣動物疫病預防控制中心，廣西 陽朔 541900；2.廣西壯族自治區陽朔縣動物衛生監督所，廣西 陽朔 541900）

新城疫是烈性傳染病之一，農業農村部列為一類動物疫病，世界動物衛生組織（OIE）規定其為必須報告的動物傳染?。?］。鴿新城疫的病原是雞新城疫病毒，或者是一種抗原變異的新城疫病毒［2］，又稱禽副粘病毒Ⅰ型，主要引起鴿子腹瀉和神經紊亂［3］，具有很高的發病率和病死率，是危害養禽業的一種重要傳染病。1985 年我國香港首次分離到該病毒，隨后珠海等多地相繼出現［4-5］。對新城疫的預防主要靠疫苗免疫，目前常用疫苗有鴿禽Ⅰ型副粘病毒滅活疫苗和雞新城疫弱毒疫苗等。有報道稱雞新城疫疫苗（I系、IV 系等）與鴿源新城疫的同源性較大，常出現免疫失?。?］。本研究對陽朔縣某養鴿場的新城疫抗體消長情況進行了監測，為制定適合該場的免疫程序提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗分組及血清采集 采集陽朔縣某鴿場自養石歧鴿的血清，分為母鴿（310日齡）、乳鴿（5日齡）、乳鴿（10 日齡）、乳鴿（15 日齡）四組，每組30只。采翅膀靜脈血，以35 000 r/min離心15 min分離獲得待檢血清，-20 ℃保存備用。

1.2 試劑

1.2.1 1%雞紅細胞懸液 采集本單位實驗室飼養的3 只未免疫禽流感和新城疫的健康公雞血液，與阿氏液等體積混合，用pH值7.2的0.01mol/L PBS液洗滌3次（每次以1 000 r/min離心10 min），洗滌后用PBS 液配成體積分數為1%的雞紅細胞懸液，4 ℃保存。

1.2.2 疫苗 雞新城疫病毒（Lasota 株）、禽流感病毒（H9 亞型，HL 株）二聯滅活疫苗（批號為04TZ2005015），購自普萊柯生物工程股份有限公司。

1.2.3 雞新城疫血凝抑制試驗抗原和陽性血清 雞新城疫血凝抑制試驗抗原（批號為20191120）和陽性血清（批號為20191018），購自哈爾濱國生生物科技有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 疫苗注射 試驗組母鴿在30 日齡時首次注射二聯滅活疫苗（肌注，0.2 mL/只），70 日齡二免（肌注，0.2 mL/只），180日齡三免（肌注，0.3 mL/只），310 日齡時采血備檢。乳鴿均未注射過疫苗。

1.3.2 血凝試驗（HA） 按照《新城疫診斷技術》（GB/T16550-2008）規定的血凝（HA）與血凝抑制（HI）試驗方法操作。首先加稀釋液：用微量移液器分別向反應板的第1～12孔加生理鹽水50 μL，然后用微量移液器吸取50 μL 5倍稀釋的抗原于第1 孔，反復吹打混勻后吸出50 μL 移至第2 孔，依次倍比稀釋到第11 孔，吸出50 μL 混合液丟棄，第12孔作為紅細胞對照不加抗原。再分別往1～12 孔中加入1%紅細胞懸液50 μL，微量振蕩1 min，于37 ℃恒溫箱中靜置10～15 min后觀察結果。

結果判定：將反應板傾斜45°，若有向下線狀流動者則表明紅細胞未被病毒凝集或不完全被病毒凝集；如傾斜后紅細胞不流動，說明紅細胞已被病毒所凝集。

1.3.3 血凝抑制試驗（HI） 按照《新城疫診斷技術》（GB/T16550-2008）規定的血凝（HA）與血凝抑制（HI）試驗方法操作。首先按1.3.2 的方法倍比稀釋血清；然后分別往1～12孔中加入4單位抗原50 μL，微量振蕩1 min，于37 ℃恒溫箱中靜置5 min，再加入1%紅細胞懸液，微量振蕩1 min，放置于37 ℃恒溫箱中靜置10～15 min后觀察結果。

結果判定：將反應板傾斜45°'，若有向下線狀流動者則表明紅細胞未被病毒凝集，即凝集現象被抑制；如傾斜后紅細胞不流動，說明紅細胞已被病毒所凝集，即凝集現象未被抑制。以完全抑制4 單位抗原的血清最高稀釋倍數作為HI 的滴度，HI效價大于等于4 log2判定為抗體合格。

2 結果與分析

檢測結果顯示：30 只母鴿中新城疫抗體水平基本都在6 log2以上，高的達到9 log2；5日齡乳鴿的抗體水平都在4 log2 以上，高的達到7 log2；30只10日齡乳鴿中有21只抗體為4 log2以上，陽性率為70%；15 日齡乳鴿的抗體水平均為陰性，陽性率為0。4 組鴿子的血清抗體檢測結果如表1所示。

表1 4組不同日齡鴿子的新城疫抗體水平

3 討論

由表1可以看出，母鴿由于多次注射疫苗，免疫抗體水平普遍較高，能起到一定的保護作用。乳鴿出殼5～10日齡內，體內仍有母源抗體保護，到15日齡母源抗體基本消失，此時迫切需要疫苗產生的抗體來保護。

疫苗免疫是預防疫病的重要手段，制定科學合理的免疫程序是保障疫苗免疫效果的重要手段。首次免疫的時間過早，容易被母源抗體中和掉，過晚免疫則感染風險增大。本試驗中，乳鴿出殼15日齡即無法檢測出合格的抗體水平，故肉鴿應當在12 日齡開始用雞新城疫病毒疫苗（Lasota株）進行滴鼻基礎免疫，25日齡注射新城疫I系苗（肌注，0.5 mL/只）；種用鴿應在12日齡開始用雞新城疫病毒疫苗（Lasota株）進行滴鼻基礎免疫，30日齡二免，注射二聯滅活疫苗（肌注，0.2 mL/只），70 日齡三免（肌注，0.2 mL/只），180 日齡四免（肌注，0.4 mL/只）。肉鴿養殖場最好選用鴿用新城疫疫苗進行免疫接種，并且根據其他病種和免疫時間做出適當調整，以避免免疫失敗。