γ- 干擾素釋放試驗(yàn)在不同年齡段肺結(jié)核患者中的診斷效能

張麗華

福建省莆田市第一醫(yī)院 （福建莆田 351100）

目前，肺結(jié)核是我國(guó)常見的慢性傳染病之一，主要由結(jié)核分枝桿菌感染引起。臨床診斷該病的方式包括X 線檢查及痰涂片抗酸染色、結(jié)核抗體檢測(cè)等各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查[1]。但上述實(shí)驗(yàn)室檢查均存在一定的局限性，如操作過程復(fù)雜、影響因素較多、檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)等，因此需要尋找新的檢測(cè)方法以提高檢出率及準(zhǔn)確度[2]。γ-干擾素釋放試驗(yàn)（interferon gamma release assay，IGRA）對(duì)肺結(jié)核的診斷靈敏度高，已在臨床廣泛應(yīng)用[3]。但目前缺少IGRA 對(duì)不同年齡段肺結(jié)核患者診斷效能的相關(guān)研究報(bào)道。本研究旨在分析IGRA 在不同年齡段肺結(jié)核患者中的診斷效能，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年7月至2020年1月我院收治的109例高度疑似肺結(jié)核患者作為研究對(duì)象，并按年齡段分為青年組（34例，18～44歲）、中年組（39例，45～59歲）、老年組（36例，≥60歲）。青年組男18例，女16例，平均體質(zhì)量指數(shù)（19.72±2.37）kg/m2；中年組男19例，女20例，平均體質(zhì)量指數(shù)（19.47±2.68）kg/m2；老年組男18例，女18例，平均體質(zhì)量指數(shù)（19.55±2.61）kg/m2。3組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及其家屬均自愿簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)初步臨床診斷及患者臨床表現(xiàn)高度懷疑肺結(jié)核；均接受IGRA 與結(jié)核分枝桿菌涂片試驗(yàn)檢測(cè)；意識(shí)清楚，無認(rèn)知障礙。排除標(biāo)準(zhǔn)：病情嚴(yán)重的瀕危期患者；妊娠期、哺乳期女性；臨床檢驗(yàn)資料不完整的患者。

1.2 方法

使用T-SPOT.TB 試劑盒（Oxford Immunotech 公司，批號(hào)TEC015321）進(jìn)行IGRA 檢測(cè)：采集患者靜脈全血3 ml，與肝素鈉抗凝劑混合均勻，分別裝于標(biāo)記P、T、N 的1 ml 培養(yǎng)管中；其中T 管添加結(jié)核特異度抗原（ESAT-6、CFP-10），P 管添加非特異度刺激抗原植物雪球凝集素，N 管為空白對(duì)照管；3管分別離心后抽取中段外周血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行洗滌并計(jì)數(shù)，混合抗原加入預(yù)包被抗γ-干擾素抗體的反應(yīng)孔，37 ℃孵育16～22 h 后洗滌，加標(biāo)記二抗，孵育1 h，加顯色液，干燥；最后，鏡下觀察每個(gè)反應(yīng)孔的顆粒沉淀，1個(gè)酶聯(lián)斑點(diǎn)表示1個(gè)效應(yīng)T 細(xì)胞，記錄檢測(cè)結(jié)果（當(dāng) N＜0.5 時(shí)，若 T-N/P-N ≥0.16 判為陽性，否則為陰性；當(dāng) 0.5≤N ≤2.5 時(shí)，若 T-N ≥1.5 判為陽性，否則為陰性）。

結(jié)核分枝桿菌涂片試驗(yàn)檢測(cè)：采集患者痰標(biāo)本，涂在10 mm×20 mm 的玻片上，并放置于溫度＜80 ℃的干燥器內(nèi)進(jìn)行干燥，加美蘭染色液后于鏡下檢測(cè)，觀察到結(jié)核分枝桿菌為陽性。

1.3 觀察指標(biāo)

以結(jié)核分枝桿菌涂片試驗(yàn)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，比較3組的IGRA 檢測(cè)結(jié)果，并評(píng)估IGRA 對(duì)不同年齡段肺結(jié)核患者的診斷效能（靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，多組間比較使用R×C 列聯(lián)統(tǒng)計(jì)分析工具進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)核分枝桿菌涂片試驗(yàn)結(jié)果

109例高度疑似肺結(jié)核患者，經(jīng)結(jié)核分枝桿菌涂片試驗(yàn)檢測(cè)，最終確診肺結(jié)核78例。

2.2 IGRA 檢測(cè)結(jié)果

以結(jié)核分枝桿菌涂片試驗(yàn)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，IGRA 診斷肺結(jié)核的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度分別為91.03%（71/78）、67.74%（21/31）、84.40%（92/109），見表1。

表1 IGRA 檢測(cè)結(jié)果（例）

2.3 IGRA 對(duì)不同年齡段肺結(jié)核患者的診斷效能比較

IGRA 的診斷靈敏度隨年齡升高而降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；IGRA 對(duì)老年組的診斷靈敏度低于青年組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；3組的診斷特異度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；IGRA 的診斷準(zhǔn)確度隨年齡升高而降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2～3。

表2 IGRA 對(duì)不同年齡段肺結(jié)核患者的檢測(cè)結(jié)果（例）

表3 IGRA 對(duì)不同年齡組的診斷效能比較（%）

3 討論

根據(jù)世界衛(wèi)生組織的不完全統(tǒng)計(jì)，全球每年結(jié)核病的新發(fā)病例數(shù)約為1 000萬，且我國(guó)發(fā)病率居全球第二，并有逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)[4]。雖然經(jīng)過后期有效治療，肺結(jié)核患者痊愈的概率較大，預(yù)防肺結(jié)核的相關(guān)疫苗也問世許久，但該病的傳染性及對(duì)人類健康的威脅仍不容小覷，且患病后治療難度較大、治療費(fèi)用較高等因素使肺結(jié)核患者長(zhǎng)期面臨精神及經(jīng)濟(jì)壓力。受患者身體素質(zhì)等影響因素，結(jié)核病早期癥狀不典型，導(dǎo)致誤診、漏診情況多發(fā)，而目前臨床對(duì)結(jié)核病的診斷缺乏一種快速、早期且準(zhǔn)確度高的檢測(cè)方法[5]。IGRA 可直接顯示受檢患者體內(nèi)因結(jié)核分枝桿菌刺激產(chǎn)生的γ-干擾素情況，診斷準(zhǔn)確度高，不受卡介苗和大多非致病分枝桿菌的影響，對(duì)于大規(guī)模接種卡介苗的國(guó)家，該檢測(cè)方法具有重要診斷價(jià)值。

IGRA 主要利用結(jié)核分枝桿菌表達(dá)的抗原刺激患者外周血產(chǎn)生的γ-干擾素，為結(jié)核桿菌特有抗原，因此可準(zhǔn)確檢測(cè)患者體內(nèi)是否含有結(jié)核分枝桿菌抗體，從而準(zhǔn)確診斷肺結(jié)核[6]。本研究結(jié)果顯示，IGRA 對(duì)老年組的診斷靈敏度低于青年組（P＜0.05），且IGRA 的診斷準(zhǔn)確度隨年齡增加稍有降低（P＞0.05），表示IGRA 對(duì)青年及中年患者的診斷價(jià)值高于老年患者。原因可能為，老年患者的營(yíng)養(yǎng)狀況、身體素質(zhì)較差，且多患有各種基礎(chǔ)疾病，導(dǎo)致其免疫功能損傷，免疫系統(tǒng)對(duì)結(jié)核抗原的應(yīng)答能力遠(yuǎn)低于青、中年患者，導(dǎo)致診斷靈敏度與準(zhǔn)確度較差[7]。有研究結(jié)果顯示，老年肺結(jié)核患者本身存在的高血壓、糖尿病等基礎(chǔ)疾病導(dǎo)致其機(jī)體、血液處于異常狀態(tài)，這可能會(huì)對(duì)IGRA 檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響；且老年肺結(jié)核患者藥物治療史較多，這也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響[8]。目前，IGRA 還無法對(duì)潛在肺結(jié)核患者作出有效診斷，而患者暴露于肺結(jié)核感染環(huán)境的概率隨著年齡的增加而增加，因此，IGRA 對(duì)部分潛在感染的老年患者未作出有效判斷，導(dǎo)致老年組靈敏度與準(zhǔn)確度相對(duì)較低，這也提示IGRA 只能作為臨床輔助診斷方法。由于研究條件所限，本研究并未設(shè)置健康對(duì)照組進(jìn)行鑒別分析，相關(guān)論點(diǎn)仍需排除相關(guān)影響因素后進(jìn)行進(jìn)一步佐證。

IGRA 不同于其他常規(guī)檢查，其最大的優(yōu)勢(shì)在于檢測(cè)結(jié)果不會(huì)受環(huán)境結(jié)核分枝桿菌感染和卡介苗接種的影響，且其特異性也不受被測(cè)細(xì)胞因子產(chǎn)生的交叉反應(yīng)影響；IGRA 對(duì)人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染和免疫抑制劑治療人群的檢測(cè)結(jié)果不受機(jī)體免疫抑制劑的影響，使其應(yīng)用范圍較常規(guī)肺結(jié)核實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法更廣泛[9]；IGRA 檢測(cè)時(shí)間短，可節(jié)約患者時(shí)間，且可使檢測(cè)結(jié)果受到外界環(huán)境因素影響的可能性更小；此外，IGRA 的診斷準(zhǔn)確度較高，不用反復(fù)檢測(cè)及排除，可在很大程度上減少潛在感染及疑似患者的醫(yī)療花費(fèi)，因此，根據(jù)國(guó)際指南建議，在條件允許的情況下，應(yīng)對(duì)所有疑似患者采用IGRA 進(jìn)行檢測(cè)[10]。

綜上所述，IGRA 是目前臨床診斷肺結(jié)核準(zhǔn)確度較高的檢測(cè)手段，且對(duì)青年及中年患者的診斷價(jià)值均高于老年患者，可將其作為診斷青年及中年肺結(jié)核患者的重要依據(jù)，但對(duì)于老年患者仍需結(jié)合其他相關(guān)檢查謹(jǐn)慎判斷。