高效液相色譜在食品藥品檢測中的應用

（甘肅畜牧工程職業(yè)技術學院，甘肅 武威 733006）

1 高效液相色譜的原理和特點

高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）是一種以經典的液相色譜為基礎，使用高壓輸液泵將指定的流動相泵入色譜柱中以進行分離和測定。注入的待測樣品通過流動相進入色譜柱內進行分析，分離出的各組依次進入檢測器，由記錄儀或數據處理系統記錄色譜信號。高效液相色譜儀由五大系統構成。高壓輸液系統主要包括貯液器、脫氣處理裝置和高壓輸液泵，其目的是為分離系統提供穩(wěn)定的能將混合物組分離的高壓液體。進樣系統由進樣口、注射器和進樣閥（或自動進樣置）組成。其作用是有效地將分析試樣送入色譜柱上，簡而言之，其功能是取樣和進樣。分離系統包括預柱（保護柱）、分析柱（色譜柱）和柱溫箱。色譜柱是分離系統的重要組成部分，要求分離度高、柱容量大、分析速度快。通用的分析色譜柱一般為10～30 cm長，增加柱長有利于組分的分離，但同時增加了柱壓。檢測系統由獨立的檢測器及附屬部件構成，其功能是將物理或化學特性轉變?yōu)榭商幚淼碾娦盘枺刂坪蛿祿幚硐到y，記錄、處理色譜分析的數據。

高效液相色譜技術具有操作簡便、檢測精度高以及節(jié)約時間等優(yōu)點，在眾多檢測方法中脫穎而出。

2 高效液相色譜在食品藥品檢測中的應用

2.1 高效液相色譜在食品檢測中的應用

HPLC可廣泛地應用于食品中各營養(yǎng)成分的測定，如氨基酸、糖類、維生素、礦物質等。人體必需氨基酸有八種，傳統的檢測技術在其測定方面具有一定的局限性，無法保證結果的準確性。但HPLC對氨基酸的檢測效率遠高于經典的液相色譜技術，能確證其檢測結果的準確性。除此之外，還被用于檢測食品中添加劑的含量及抗生素的殘留等。如在肉制品中防腐劑苯甲酸和山梨酸的測定，國家標準GB 5009.28-2016中采用乙酸鋅-亞鐵氰化鉀來沉淀樣品中的蛋白質，但易產生大量絮狀沉淀，且提取后所得溶液中雜質成分較多，定量結果往往偏高。研究表明，苯甲酸、山梨酸分別在0.1～60μg/ml濃度下線性良好(R2=1.000)，其平均回收率分別為95.7%、92.8%，并且該方法具有良好的重復性、穩(wěn)定性和精密度[1]。由于價格低廉，四環(huán)素類抗生素被廣泛用于預防多種疾病和促進動物生長，進而提高畜禽的生產效率。但家禽和牲畜中四環(huán)素類抗生素的殘留會間接或直接進入人體，從而大大增加了人體的耐藥性，并對公眾健康構成威脅。而四環(huán)素類抗生素最常用的化學檢測方法是高效液相色譜法。王余磊等人[2]建立了同時測定雞肉中3種四環(huán)素類藥物殘留（土霉素、四環(huán)素、金霉素）的方法，并優(yōu)化了高效液相色譜條件。近年來，該分離技術在保健食品中的應用開始流行。缺乏葉黃素是夜盲癥的主要原因。玉米、胡蘿卜、蛋黃和一些藻類含有較多的葉黃素。采用HPLC測定保健食品中葉黃素的含量，既可有效地提取出葉黃素，又可快速準確地測定其含量，回收率達到96.57%～98.67%[3]。高效液相色譜技術的廣泛研究使用，使得當前的食品安全檢測水平飛速發(fā)展。

2.2 高效液相色譜在藥品檢測中的應用

藥品不同于一般產品，藥品質量直接關系到人民的健康和生命安全，為了在各個環(huán)節(jié)全面控制藥物的質量，保障用藥的安全和有效，藥品分析檢驗就顯得尤為重要。其中，藥物的含量測定是藥品分析檢驗的核心。目前，該技術已廣泛應用于阿司匹林腸溶片、對乙酰氨基酚、鹽酸普魯卡因、頭孢拉定、維生素類及巴比妥類藥物的含量測定。以阿司匹林腸溶片為例，經典的兩步滴定法操作簡便，但由于本身的輔料比例較大，且滴定法易引起滴定終點的誤差，導致測定結果高于理論含量。而高效液相色譜法可以避免輔料對阿司匹林腸溶片劑測定結果的干擾，獲得準確的結果[4]。對于巴比妥類藥物而言，滴定法、銀量法等化學方法適用范圍較窄，測定結果不準確，而HPLC能有效地解決上述問題[5]。除此之外，HPLC在藥物雜質的檢查中也常常使用。雜質作為藥物質量管理控制的重要指標之一，影響藥品的安全性和有效性。現如今，隨著藥物研究的不斷深入發(fā)展，雜質的分析技術及研究方法正發(fā)生巨大變化。劉素艷[6]等人采用一種新的高效液相色譜法同時測定頭孢拉定原料藥中的六種雜質，為制劑研究奠定了理論基礎。由于中藥其成分復雜，往往難以檢驗，傳統的檢驗方法局限性大，無法可靠保障其檢驗結果。采用HPLC可以更好地解決這一問題，降低分離難度的同時有效測定中藥中有效成分。例如，丹參滴丸中黃芩苷和隱丹參酮的測定具有高精確度和分離度，這改善了傳統定性檢測方法的不足[7]。因此，實現中藥有效成分定量控制，提升質量檢驗效率和質量的同時，促進了中藥質量檢驗規(guī)范化和標準化發(fā)展。

3 結束語

總之，高效液相色譜技術作為一種高效的分離與分析手段，已廣泛應用于醫(yī)藥、環(huán)保、生命科學、石油化工等領域。高效液相色譜技術不僅在技術操作上高效快捷，而且在儀器自動化方面具有巨大優(yōu)勢，全面提高了食品和藥品的整體檢測水平。