循環血miR類指標在膿毒癥中的變化及與嚴重程度的關系分析

王濱　張憲華　徐志偉

【摘要】 目的：探究循環血miR類指標在膿毒癥中的變化及其與嚴重程度的關系，以為膿毒癥的臨床診治提供參考依據。方法：選取2019年6月-2021年2月本院收治的90例膿毒癥患者為觀察組，同時期的90名健康者為對照組。比較對照組和觀察組的循環血miR類指標（miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107）表達量，同時比較觀察組中不同病因（肺部感染、腹腔感染及其他病因）及嚴重程度（膿毒癥、嚴重膿毒癥及膿毒性休克）者的上述循環血miR類指標表達量，采用Spearman秩相關分析上述循環血miR類指標與膿毒癥嚴重程度的關系。結果：觀察組的循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達量均顯著高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。觀察組中不同病因者的循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達量比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。觀察組中不同嚴重程度者的循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達量比較，差異均有統計學意義（P<0.05）;膿毒性休克者的上述循環血miR類指標表達量均顯著高于膿毒癥者及嚴重膿毒癥者，嚴重膿毒癥者的上述循環血miR類指標表達量均顯著高于膿毒癥者，差異均有統計學意義（P<0.05）。Spearman秩相關分析顯示，循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107均與膿毒癥嚴重程度呈正相關（P<0.05）。結論：循環血miR類指標在膿毒癥中呈現異常表達的狀態，且與膿毒癥嚴重程度密切相關，在膿毒癥患者中的檢測價值較高。

【關鍵詞】 循環血miR類指標 膿毒癥 嚴重程度 病因

[Abstract] Objective： To explore the changes of circulating blood miR indexes in sepsis and its relationship with severity， so as to provide reference for clinical diagnosis and treatment of sepsis. Method： A total of 90 patients with sepsis admitted to our hospital from June 2019 to February 2021 were selected as the observation group， and 90 healthy subjects during the same period were selected as the control group. The expression levels of circulating blood miR indexes （miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107） were compared between the control group and the observation group. At the same time， the expression levels of above circulating blood miR indexes in the observation group were compared with different etiologies （pulmonary infection， abdominal infection and other etiologies） and severity （sepsis， severe sepsis and septic shock）. Spearman rank correlation was used to analyze the relationship between the above circulating blood miR indexes and the severity of sepsis. Result： The expressions of miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in the observation group were significantly higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. There were no significant differences in the expression of miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in patients with different etiologies of the observation group （P>0.05）. The expressions of miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in patients with different severity in the observation group were compared， the differences were statistically significant （P<0.05）. The expression of above circulating blood miR indexes in septic shock group were significantly higher than those in sepsis group and severe sepsis group， the expression levels of above circulating blood miR indexes in severe sepsis were significantly higher than those in sepsis， the differences were statistically significant （P<0.05）. Spearman rank correlation analysis showed that miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in circulating blood were positively correlated with the severity of sepsis （P<0.05）. Conclusion： Circulating blood miR indexes in sepsis showed abnormal expression， and is closely related to the severity of sepsis， which has high detection value in sepsis patients.

[Key words] Circulating blood miR indexes Sepsis Severity Etiology

First-authors address： Shenzhen Second Peoples Hospital， Shenzhen 518035， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.19.004

膿毒癥主要為由于感染所致的全身炎癥反應，患者的病情兇險，病死率較高，因此膿毒癥是臨床重點研究方面。臨床中與膿毒癥相關的研究中，miR相關指標是近年來在膿毒癥中研究較多的指標，其中miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107等均是在膿毒癥中研究較多的miR類指標，但也是在膿毒癥中研究差異較多的指標，因此進一步細致探究的需求較高[1-2]。另外，上述miR指標作為與機體免疫、炎癥狀態等密切相關的指標，進一步研究其與感染及炎性反應疾病包括膿毒癥的意義較高[3-4]。本研究就循環血miR類指標在膿毒癥中的變化及其與嚴重程度的關系進行探究與分析，以為膿毒癥的臨床診治提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年6月-2021年2月本院收治的90例膿毒癥患者為觀察組，同時期的90名健康者為對照組。（1）納入標準：20～65歲者;男女不限;對照組為體檢健康者，觀察組為膿毒癥者。（2）排除標準：合并創傷者;妊娠期者;合并代謝性疾病者;合并自身免疫性疾病者;合并高血壓、糖尿病等慢性疾病者;發病前存在凝血異常者;臨床資料不完整者。患者和/或家屬對研究知情同意，本研究經醫院倫理學委員會批準。

1.2 方法 采集對照組和觀察組的外周靜脈血標本，血標本采集量為5 mL，采用醫用離心機將其進行離心（半徑15 cm，速度3 000 r/min，時間

5 min），采集離心后的上清液進行miR類指標的檢測，檢測指標為miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107，提取血清總RNA，逆轉錄合成cDNA反應液，采用實時熒光定量PCR法進行操作檢測，采用2-ΔCt進行計算，得出上述指標的表達量。上述檢測由兩名經驗豐富者嚴格按照標準進行操作檢測。

1.3 觀察指標 統計及比較對照組和觀察組的循環血miR類指標（miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107），同時比較觀察組中不同病因（肺部感染、腹腔感染及其他病因）及嚴重程度（膿毒癥、嚴重膿毒癥及膿毒性休克）者的上述循環血miR類指標表達量，采用Spearman秩相關分析上述循環血miR類指標與膿毒癥嚴重程度的關系。

1.4 統計學處理 采用SPSS 23.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗，多組數據比較采用方差分析;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。相關性分析采用Spearman秩相關分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較 對照組中男50名，女40名;年齡25～65歲，平均（43.3±6.7）歲。觀察組中男51例，女39例;年齡25～63歲，平均（43.6±6.6）歲;病因：肺部感染者35例，腹腔感染者35例，其他20例;嚴重程度：膿毒癥者39例，嚴重膿毒癥者36例，膿毒性休克者15例。兩組的性別、年齡比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組的循環血miR類指標表達量比較 觀察組的循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達量均顯著高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.3 觀察組中不同病因者的循環血miR類指標表達量比較 觀察組中不同病因者的循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達量比較，差異均無統計學意義（P>0.05），見表2。

2.4 觀察組中不同嚴重程度者的循環血miR類指標表達量比較 觀察組中不同嚴重程度者的循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達量比較，差異均有統計學意義（P<0.05）;膿毒性休克者的上述循環血miR類指標表達量均顯著高于膿毒癥者及嚴重膿毒癥者，嚴重膿毒癥者的上述循環血miR類指標表達量均顯著高于膿毒癥者，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表3。

2.5 循環血miR類指標與膿毒癥嚴重程度的關系分析 Spearman秩相關分析顯示，循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107均與膿毒癥嚴重程度呈正相關（P<0.05），見表4。

3 討論

膿毒癥在臨床并不乏見，對患者的危害極大。患者可表現出全身的炎性反應，嚴重者可導致多器官功能障礙及循環方面的異常，病死率較高，且存活者的并發癥發生率較高，因此膿毒癥是臨床診治與防控的重點[5-6]。臨床中與膿毒癥相關的研究眾多，其中關于疾病發生發展及嚴重程度相關指標的研究是熱點。miR類指標研究較多，但研究結果差異相對顯著，同時為研究涉及面較廣的一類指標，其多見于膿毒癥發病機制的研究中[7-9]，與膿毒癥嚴重程度的關系研究極為匱乏，導致其在膿毒癥診治方面的參考價值仍有待進一步探究。miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107等作為在膿毒癥中研究較多的miR類指標，其在膿毒癥患者中更為細致全面的探究意義相對更高。miR-155-5p作為在體液免疫調節中作用較強的指標，其受病毒、細菌感染的誘導作用，呈現高表達狀態，且對TNF等指標具有反饋性調節作用[10];miR-326則主要為通過調控靶基因來達到影響多種細胞因子表達的作用，在炎性反應與免疫調節方面均有較強的作用[11];miR-223則主要為通過調節免疫細胞的分化、成熟及增殖等方面來達到影響機體免疫的作用，并對機體炎性反應狀態起到一定影響作用[12];miR-146a則在機體感染過程中發揮促進促炎因子表達的作用，同時其還對免疫耐受及逃逸等多方面起到干預的作用，因此在膿毒癥等感染性疾病中的檢測意義較高[13];miR-107是與炎性反應相關的指標，除此之外，其對于腎臟損傷等多方面也有一定的反應作用[14]，但是其對于膿毒癥嚴重程度的影響研究未見。

本研究就循環血miR類指標在膿毒癥中的變化及其與嚴重程度的關系進行探究，結果顯示，膿毒癥患者的循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達量均顯著高于健康同齡者，不同病因者的上述循環血miR類指標表達量差異并不顯著，而不同嚴重程度者的上述循環血miR類指標表達量差異顯著，Spearman秩相關分析顯示，循環血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107均與膿毒癥嚴重程度呈正相關（P<0.05），因此肯定了上述循環血miR類指標在膿毒癥患者中的檢測價值及與膿毒癥嚴重程度的關系。分析原因，膿毒癥是由于感染所致的炎性反應，機體應激性的免疫變化也相對突出，而上述miR類指標在機體的上述感染、炎性反應及免疫狀態變化中起到較強的影響作用[15-17]，因此其表達相對異常，且越為嚴重的患者，其上述應激反應程度越為嚴重，機體的上述方面也越為異常[18-23]，故認為上述循環血miR類指標在本類患者中的檢測價值較高，對于膿毒癥嚴重程度的檢測意義也較高。

綜上所述，筆者認為循環血miR類指標在膿毒癥中呈現異常表達的狀態，且與膿毒癥嚴重程度密切相關，在膿毒癥患者中的檢測價值較高。

參考文獻

[1]楊珍，張艷敏，王倩倩，等.微小RNA-103及RNA-107表達與120例膿毒癥患者臨床特征及預后的關聯分析[J].山東大學學報（醫學版），2020，58（12）：77-85，91.

[2]劉紅新，孟艦，武小娟，等.血必凈注射液輔助治療對膿毒癥患者病情及微小高遷移率族蛋白B1、微小RNA-223表達的影響[J].解放軍醫藥雜志，2021，33（2）：93-96.

[3]閆玉榮.MicroRNA-223抑制NLRP3炎癥小體和TLR4/NF-κB信號通路減輕急性肺損傷炎癥反應[D].濟南：山東大學，2020：30-36.

[4]劉凱，賈玲玲，劉倩，等.miR-155-5P在膿毒癥急性肺損傷時調控肺泡巨噬細胞IL-6、MIP-2的表達對中性粒細胞遷移的影響[J/OL].中華重癥醫學電子雜志（網絡版），2020，6（2）：198-205.

[5]楊家偉，胥亞福，謝新，等.膿毒癥患兒外周血miR-146a、miR-223的水平變化及意義[J].山東醫藥，2020，60（19）：57-60.

[6]杜斌，夏奇奐，盧躍，等.血清微小RNA-155-5p對膿毒癥急性肝損傷患者預后的評估價值分析[J].中國醫師進修雜志，2020，43（5）：397-400.

[7]李大勇，劉冠蘭，袁新科.膿毒癥合并急性腎損傷患者血清miR-21、miR-233和miR-107的表達水平及臨床意義[J].熱帶醫學雜志，2018，18（12）：1580-1584.

[8]邱玉霞，孫月玲，宮保強，等.miR-146a及APACHE Ⅱ評分預測膿毒癥并發急性腎損傷患者28天死亡的價值[J].中國急救醫學，2020，40（10）：943-946.

[9] Chen L，Yu L，Zhang R，et al.Correlation of microRNA-146a/b with disease risk， biochemical indices， inflammatory cytokines， overall disease severity， and prognosis of sepsis[J].Medicine （Baltimore），2020，99（22）：19754.

[10]楊曉梅，杭敏，許磊，等.膿毒癥患者血清ESM-1、D-D、miR-155-5p、PCT的變化與患者預后的關系[J].醫學臨床研究，2019，36（4）：759-761.

[11]馬海艷，劉學文，付盈菊，等.膿毒癥患者外周血miR-326與miR-370-3p表達及其意義[J].中華醫院感染學雜志，2021，31（4）：481-483.

[12]閆春江，黎永琳，李燕，等.血必凈注射液對膿毒癥患者血清miR-223及高遷移率族蛋白B1表達的影響[J].疑難病雜志，2019，18（3）：243-246.

[13]楊燕娣，排孜來提·阿布力孜，張會云，等.miR-146a在膿毒癥相關性急性肺損傷中的表達及其早期診斷價值[J].實用休克雜志（中英文），2020，4（4）：215-218.

[14]穆紅，楊磊.膿毒癥相關微小RNA標志物功能機制研究進展與診療價值[J].中華檢驗醫學雜志，2019，42（12）：1007-1013.

[15] Xie J，Zhang L，Fan X，et al.MicroRNA-146a improves sepsis-induced cardiomyopathy by regulating the TLR-4/NF-κB

signaling pathway[J].Exp Ther Med，2019，18（1）：779-785.

[16] Tong L，Tang C，Cai C，et al.Upregulation of the microRNA rno-miR-146b-5p may be involved in the development of intestinal injury through inhibition of Kruppel-like factor 4 in intestinal sepsis[J].Bioengineered，2020，11（1）：1334-1349.

[17]韓成須.膿毒癥患者病情及預后評估中血清微小RNA-155聯合IL-35水平檢測的臨床價值[J].山西衛生健康職業學院學報，2020，30（3）：17-19.

[18]鄭燕玲，張應魏，鄧小彥.連續性腎臟替代治療對膿毒癥患者外周血部分T淋巴細胞，miRNA-155和miRNA-466表達的影響[J].貴陽醫學院學報，2020，45（4）：451-455，460.

[19] Lin Y，Ding Y，Song S，et al.Expression patterns and prognostic value of miR-210， miR-494， and miR-205 in middle-aged and old patients with sepsis-induced acute kidney injury[J].Bosn J Basic Med Sci，2019，19（3）：249-256.

[20]沈業周，余嬌陽，周飛，等.膿毒癥患者外周血微小RNA-155和CD4+CD25+ Treg細胞表達水平及意義[J].中國老年學雜志，2019，39（13）：3211-3213.

[21]王華，王莉，郭東風.膿毒癥患者血漿微RNA-146a表達與患病風險，炎性因子水平及預后的相關性分析[J].第二軍醫大學學報，2020，41（2）：135-140.

[22]黃林楓，熊嵐，吳奎，等.膿毒癥患兒血漿miR-146a、miR-223表達與IL-6、IL-10、TNF-α水平變化的臨床意義分析[J].現代生物醫學進展，2017，17（32）：6323-6327，6344.

[23]張紅玉，王佳，孫曉靖.血清微小RNA-155聯合IL-35水平檢測對膿毒癥患者病情及預后的評估價值[J].山東醫藥，2018，58（29）：12-16.

（收稿日期：2021-05-31） （本文編輯：姬思雨）