QuEChERS法測定動物源性食品中氟蟲腈及其代謝物的殘留量

（新疆農墾科學院分析測試中心，新疆石河子 832000）

氟蟲腈是一種高效的苯吡唑類殺蟲劑，且與現有的農藥沒有交叉抗性[1]。因此，廣泛應用于水稻[2]、蔬菜[3]、棉花[4]等作物的各種害蟲防治。雖然氟蟲腈能有效地控制害蟲，但它在環境中存在毒性和緩慢的代謝[5]。近期發現很多養殖戶在畜禽飼養時使用氟蟲腈作為殺蟲劑，但對其并沒有進行相應的處理，導致畜禽產品中檢出一定量的氟蟲腈及其代謝物。

關于氟蟲腈及其代謝物的檢測主要集中在蜂蜜、土壤、環境用水等基質中。其檢測方法主要有電化學方法、氣相色譜（GC）、氣相色譜-串聯質譜（GC-MS/MS）、高效液相色譜（HPLC）、液相色譜-串聯質譜（LC-MS/MS）、液相色譜-串聯離子阱等分析技術。近年來，氟蟲腈在防治家禽蟲害時的用量有所增加，因此建立一種快速且可靠的測定方法，具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 實驗材料與試劑

乙腈、乙酸銨、甲酸、乙酸乙酯、甲醇（色譜級，德國CNW 公司）；無水硫酸鎂、氯化鈉（優級純，廣州化學試劑）；十八烷基鍵合硅膠（C18）、N-丙基乙二胺（PSA）（上海安譜實驗科技公司）；超純水（18.2 MΩ·cm）。氟蟲腈、氟甲腈、氟蟲腈砜及氟蟲腈亞砜標準品濃度均為1 mg/mL（天津環境中心）。

1.2 儀器與設備

Waters液質聯用儀（美國Waters 公司）；漩渦混合器；水浴氮吹儀；高速冷凍離心機；KQ-600DE數控超聲儀；超純水儀。

1.3 儀器參數

1.3.1 色譜條件

BEH C18 色譜柱（2.1×100.0 mm，1.7 μm），進樣體積5 μL，柱溫30 ℃，流動相為水-乙腈（梯度洗脫），流速為0.40 mL/min。

1.3.2 質譜條件

電噴霧負離子源，離子源溫度150 ℃，脫溶劑氣800 L/h，干燥氣溫度400 ℃，錐孔氣50 L/h，以1 個母離子和2個子離子信息比較進行定性分析；對響應值最高的子離子進行定量分析。

1.4 樣品處理

準確稱取5.00 g 樣品于50 mL 塑料離心管中，加入20 mL乙腈，10 000 r/min 高速離心5 min；吸取上清液4.0 mL置于10 mL離心管，加入200 mg C18粉末，3 000 r/min渦旋離心5 min，準確吸取2.0 mL上清液至另一10 mL氮吹管中，40 ℃下氮吹至凈干，用乙腈水溶液定容至2 mL，過0.22 μm濾膜，待測。

1.5 標準曲線及檢出限

采用外標法定量，在上述儀器條件下進行測定，以MS/MS 定量離子色譜峰面積（y）對濃度（x）繪制標準曲線，并求出相應的線性回歸方程及相關系數。

1.6 方法回收率及精密度實驗

采用對陰性樣品（牛肉、羊肉、豬肉、雞肉、雞蛋）進行加標回收試驗來考察方法的準確度和精密度，計算樣品加標回收率。每個添加水平連續重復進樣6次，計算其相對標準偏差（RSD）。

表1 氟蟲腈及其代謝物添加回收率的實驗結果

2 結果與討論

2.1 色譜-質譜分析

2.1.1 質譜參數的優化

配制10 ng/mL的4種氟蟲腈及其代謝物的標準溶液，持續進樣注入質譜，調節錐孔電壓和碰撞能量確定氟蟲腈及代謝物的質譜參數。通過優化錐孔電壓，得到母離子響應值最大且穩定；優化碰撞能量，得到響應值高且出峰穩定的幾個碎片離子作為子離子。

2.1.2 分離條件的選擇

結合氟蟲腈與其代謝物的化學結構極為接近且極性均偏弱的特點，選擇BEH C18 作為分離色譜柱。本實驗比較了乙腈-水，乙腈-0.1%甲酸水溶液，乙腈-5 mmol/L乙酸銨水溶液，乙腈-5 mmol/L乙酸銨水溶液（含0.1%甲酸），甲醇-水，甲醇-5 mmol/L乙酸銨水溶液，甲醇-0.1%甲酸水溶液，甲醇-5 mmol/L 乙酸銨水溶液（含0.1%甲酸）等不同流動相體系對4種化合物的相應影響。最終結果表明，流動相為乙腈-5 mmol/L 乙酸銨水溶液（含0.1%甲酸）的體系時，4種化合物的響應較高。

2.2 提取條件優化

選取乙腈和乙酸乙酯作為提取溶劑，并對其提取效率進行了評價。結果表明，乙腈作為提取溶劑時，提取效率高于乙酸乙酯，同時乙腈作為提取溶劑能更好地去除基質的蛋白質，有利于后續的離心和凈化。

2.3 凈化條件優化

本文采用QuEChERS 技術對試樣凈化，比較了C18 和PSA 兩種不同吸附劑添加量對動物源性基質的凈化效果。結果表明，C18 吸附劑比PSA 吸附劑凈化效果好，4 種氟蟲腈及其代謝物的回收率均在80%以上；同時當C18吸附劑用量為200 mg時，4種氟蟲腈及其代謝物的回收最好。因此本實驗選用200 mg C18吸附劑作為凈化條件。

2.4 方法學驗證

2.4.1 線性范圍

4 種氟蟲腈在0.2～50.0 ng/mL濃度范圍內具有良好的線性關系，相關系數均在0.99以上。按3倍信噪比和10倍信噪比計算，分別得到4種氟蟲腈及其代謝物的檢出限和定量限分別為1 μg/kg和2 μg/kg。

2.4.2 方法的準確度和精密度

對陰性樣品（牛肉、羊肉、豬肉、雞肉、雞蛋）按照實驗方法進行回收率和精密度實驗。結果表明，在高、中、低3個添加水平下氟蟲腈及其代謝物的回收率處于78.2%～106.3%之間，相對標準偏差在1.2%～5.8%之間（表1）。該方法的準確度高，精密度好。

2.5 實際樣品的測定

利用本方法對新疆地區養殖及流通環節中牛肉、羊肉、雞肉、雞蛋、豬肉、豬肝等600 份樣品進行檢測，均未檢出氟蟲腈及其代謝物殘留。

3 結論

通過對儀器色譜和質譜條件、試樣提取和純化條件的優化等，建立了超高效液相色譜-串聯質譜法測定動物源性食物中4種氟蟲腈及其代謝物殘留物的方法，該方法前處理簡單、分析時間短、靈敏度和準確度高，能滿足國家規定的檢測要求。