探討疾控機構實驗室生物安全管理體系的建立與運行

周沼

山東省濟南市章丘區疾病預防控制中心質量管理科，山東濟南 250200

實驗室生物安全是為了避免病原微生物實驗室中具有危害或是潛在危害的因子對人、環境和社會造成的生物危害或是威脅，而采取有效的防護措施和管理措施，以達到對人、環境和社會安全防護的目的[1]。我國越來越重視生物安全管理，在2004年，衛生部、科技部已經在全國范圍中對實驗室生物安全進行專項檢查。近幾年，部分省級、市級下屬的疾病預防控制機構對轄區中的各處基層實驗室生物安全進行更詳盡、全面的調查，并發現部分問題。為解決生物安全實驗室面臨的問題和難點，相繼發布多項條例、法規、標準和法律等，以推動實驗室生物安全管理快速走向科學化、規范化的新階段，疾控機構建立有效的實驗室生物安全管理體系勢在必行。

1 實驗室生物安全管理體系建立的必要性

建立實驗室生物安全管理體系的目的是控制和消除實驗室生物安全每個環節或因素的影響，避免發生實驗室生物安全事故。一旦事故發生，也能按照應急預案及時處理，將事故造成的影響和損失降至最低。

近十幾年來,國內外發生過多起生物安全實驗室感染和泄漏事故，盡管有多方面的原因，但生物安全管理存在漏洞也是一個重要因素。戰勝“非典”之后，我國于2004年頒布《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等標準、條例，實驗室生物安全問題已經引起廣泛關注[2]。2020年全國人大通過《中華人民共和國生物安全法》，已將實驗室生物安全問題提升到國家安全的層面來管理，實驗室生物安全問題已經引起高度重視，因此建立實驗室生物安全管理體系，做好實驗室生物安全管理已是疾控機構的當務之急。

2 生物安全實驗室的建設依據

“非典”以后，為推進疾控機構科學化管理，加強和提高省、地、縣三級疾控機構的能力與水平和實驗室建設，衛生部與國家發改委聯合發布《省、地、縣級疾病預防控制中心實驗室建設指導意見》（衛辦疾控發[2004]108號），從實驗室的功能與建設規模、布局要求、建筑設施的基本要求等方面提出了具體的要求[3]。同年，建設部與國家質檢總局共同發布了《生物安全實驗室建筑技術規范》(GB 50346-2004)，在建筑結構和裝修、空調通風和凈化、消防、施工要求等方面，為疾控機構建設生物安全實驗室提供了科學的依據。

2016年，山東省發布《關于加強全省疾病預防控制中心實驗室建設的意見》，又從確定實驗室規模、完善實驗室功能、規范實驗室檢測、加強實驗室安全、提高檢測水平、保障實驗室建設等6個方面作出了具體要求。

3 實驗室生物安全管理體系建立

3.1 成立管理委員會

3.1.1 目標任務 為認真貫徹執行《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2008）和《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等標準、法規要求，健全完善中心生物安全管理體系，保證工作人員、工作環境、工作材料等的安全。

3.1.2 職責權限 ①組織制定、修訂和發布實驗室生物安全管理體系文件，制定應急預案，進行實驗室風險評估；②組織監督檢查實驗室生物安全管理體系文件執行；③組織實驗室生物安全設施、實驗環境及個人防護用品的配備與維護；④組織實驗室生物安全知識培訓與考核，確定實驗室控制區進入資格；⑤組織對生物安全實驗室備案材料、生物安全實驗室開展的病原微生物檢測活動進行審查；⑥組織處理實驗室生物安全應急事件，將危害和損失降低到最低程度；⑦組織建立實驗室工作人員的健康檔案。

3.2 制定管理體系文件

3.2.1 制定目的 為有效消除和控制一切影響實驗室生物安全的活動的因素，避免生物安全事故的發生，確保病原微生物檢測活動的安全進行和檢測結果的公正、科學、準確，有效，以及工作人員安全、工作樣本安全和工作環境的安全。

3.2.2 制定依據①《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2008）；②《微生物和生物醫學實驗室生物安全通用準則》（WS 233-2002）；③《病原微生物實驗室生物安全管理條例》；④其他與生物安全相關的標準、法規。

3.2.3 實驗室生物安全管理體系文件的組成 生物安全管理體系文件由管理手冊、程序文件、作業指導書和記錄表格等4部分組成。

①根據生物安全相關法律法規和標準建立管理手冊，規定了生物安全實驗室的管理方針、管理目標，及管理體系的要素、組織結構、職責權限等要求，是實驗室生物安全管理的綱領性文件。

②程序文件規定生物安全實驗室管理活動和檢測活動的操作方法、安全措施和標準要求，是管理手冊的支持性文件。

③作業指導書描述工作人員在檢測病原微生物的操作步驟和應遵守的事項，是標準檢測方法、儀器操作等的補充。

④記錄表格用于記錄檢測病原微生物活動的過程和結果，記錄實施質量控制活動的過程和結果，應真實、充分、可追溯。

4 實驗室建設、實驗室管理與實驗室安全的關系

實驗室建設、實驗室管理與實驗室（生物）安全，這三者同等重要，是三位一體，相互關聯、相互依存、相互支持的關系，三者缺一不可[4]。實驗室（生物）安全是目的，實驗室建設是基礎，實驗室管理是保證。為了避免實驗室生物安全事故的發生，只有按照生物安全相關要求進行實驗室建設，并制定有效的實驗室（生物）安全管理體系，才能夠實現實驗室生物安全的目的。

5 實驗室生物安全管理的幾個重點方面

5.1 生物安全實驗室的備案管理

在完成生物安全實驗室建設后，根據各個生物安全實驗室的布局、設備、設施、檢測項目等具體情況，提交備案申請至衛生健康部門，由衛生健康部門委派人員進行現場審核，符合要求，發放生物安全實驗室備案證書。

5.2 生物安全實驗室的人員管理

①建立工作人員技術檔案，著重提高檢測技術水平，強化生物安全的防護意識和技能[5]。按照工作人員的不同崗位特點和實際工作需要，派遣工作人員到上級疾控機構學習先進的、實用的檢測技術，如聚合酶鏈反應（PCR）技術、脈沖場凝膠電泳（PFGE）技術、艾滋病確證（蛋白印跡WB）技術等。工作人員熟練掌握檢測技術、儀器設備操作技能、生物安全理論知識和防護技能、實驗室消毒滅菌技術、實驗室廢棄物處理等，獲得相關上崗證書，并將培訓情況存入個人技術檔案，作為工作人員技術能力持續提高的重要依據。

②建立工作人員健康檔案，杜絕傳染性病原微生物在實驗室內擴散，確保工作人員身體健康[6]。工作人員應進行崗前健康檢查，以后每年至少進行一次健康體檢，體檢結果和病史存入健康檔案，并保留本底血樣[7]。定期對工作人員進行檢測在實驗室內檢測的相關病原微生物，必要時接種相關病原微生物的免疫制劑，并保存檢測和免疫記錄。

③加強個人防護，正確穿戴和脫卸個人防護裝備，防止實驗室內感染，保證工作人員身體健康[8]。工作人員在檢測傳染病病原微生物時，須嚴格按照相關的生物安全防護等級要求，切實做好實驗人員的個體防護[9]。同時，工作人員必須在身體狀況良好的情況下才能進入生物安全實驗室進行檢測活動。如工作人員身體出現開放性損傷、患發熱性疾病、妊娠及其他導致抵抗力下降或其他原因造成的疲勞時，不得進入二級生物安全實驗室級以上實驗室進行檢測活動。

5.3 生物安全實驗室的設備管理

5.3.1 個人防護裝備 根據生物安全實驗室檢測活動的需要，配備合格有效的個人防護裝備，如防護衣、呼吸防護裝置、防護帽、防護鞋等，防止病原微生物以氣溶膠等形式通過污染工作人員受損的皮膚及黏膜等造成感染和傳播。

5.3.2 安全防護設備 根據生物安全實驗室檢測活動的需要，配置符合要求的安全防護設備，如各類生物安全柜、壓力蒸汽滅菌器、紫外線消毒燈及適宜的消毒劑等，并定期監測這些設備的性能，使其持續保持良好的狀態[10]。工作人員進行檢測活動時，能夠熟練使用各類安全防護設備和設施，在保證出具準確檢測結果的同時，也要達到人員安全、樣品安全、環境安全的目的。

5.3.3 檢測儀器設備 根據生物安全實驗室檢測活動的需要，配備相應的檢測儀器設備[11]。這些設備須定期經具有合格資質的計量服務機構進行檢定或校準，并進行日常維護保養，保證其正常運行，不能影響樣本的檢測結果。

5.4 生物安全實驗室的樣本管理

5.4.1 樣本采集 按照需要檢測的病原微生物，對樣本采集人員進行病原微生物特性、采樣本采集技術、應急處置技術等知識的培訓[12]。樣本采集時，應按照國家規定的樣品采集方法，根據病原微生物的分類級別穿戴相應級別的個人防護裝備，如防護口罩、護目鏡、防護服、乳膠手套、防水靴套等，完成相關人員、食物、環境等樣品的采集[13]。樣本采集完畢后，采樣人員將樣本按照相應的包裝要求收集到轉運箱中，鎖定上蓋后，并用75%乙醇等消毒轉運箱外部，連同采樣記錄單送至實驗室。

5.4.2 樣本檢測 工作人員應嚴格按照標準操作規程（SOP）在相應級別的生物安全實驗室中進行檢測[14]。操作時，應動作輕柔，避免病原微生物氣溶膠等形態的產生，避免使用玻璃、金屬等尖銳的用具，以免刺傷皮膚造成感染。樣本檢測的全過程須保證樣本原始編號的完整、清晰、可辨[15]。檢測完畢，應對實驗室內部、實驗室設備與設施、可重復使用的用品用具等進行徹底清理和消毒或滅菌。

5.4.3 樣本運輸 如實驗室檢測結果出現陽性、可疑或其它不能確定的情況需送至上級實驗室復核時，或采集特殊人群樣本需送上級實驗室檢測時，則需要進行樣本運輸。樣本運輸時，應根據病原微生物的分類級別進行包裝[16]。如新型冠狀病毒樣本，須按照A類感染性物質包裝（即三層包裝：第一層主容器應防水、密封、防泄漏，如病毒保存管等；第二層輔助容器應防水、可耐受95kPa的壓力、防滲漏，如塑料罐等；第三層外包裝具有足夠的強度保護內部包裝，如轉運箱等），并消毒外包裝表面。必要時，可在轉包裝內放置足夠的冰袋。由2名經過生物安全培訓合格的專業人員，攜帶裝有樣本的轉運箱、樣本送檢單及樣本緊急情況處置用品如吸水紙、消毒液等，駕駛車輛進行樣本運輸。

需要時，應按生物安全管理要求申請辦理樣本準運證書。

5.4.4 樣本保存 樣本檢測完畢后，需要保存時，工作人員在生物安全柜內進行包裝、標記、外包裝消毒后，放入-80℃或其他溫度的低溫冰箱保存，實行雙人雙鎖管理，將該次保存樣本的相關信息進行登記，并妥善保存。

5.5 生物安全實驗室的菌種管理

5.5.1 菌種購置 根據病原微生物檢測活動的實際需要，申請購置相應的菌種。這些菌種須由具備合格資質的菌種保藏機構提供，同時向衛生健康部門進行備案。

5.5.2 菌種保存 實驗室設立菌種保存室，配備-80℃的低溫冰柜、生物安全柜、轉運箱等必備的生物安全設施和設備，由2名工作人員專門負責菌種管理，并實施雙人雙鎖的管理方式。實驗室應建立菌種使用臺賬，入庫、領用和交回菌種時，均應進行詳細記錄，保證菌種安全。

5.6 生物安全實驗室的風險控制

實驗室針對生物安全實驗室檢測活動涉及的病原微生物進行風險評估，并制定有效的風險控制措施。當新開展或變更病原微生物檢測活動，或發生感染事件，或防控策略、政策、標準等發生改變時，實驗室應對病原微生物檢測活動重新進行風險評估。

5.7 生物安全實驗室的應急預案

實驗室應制定《生物安全實驗室應對突發事件應急預案》，目的是針對實驗室可能發生的生物安全事件時，能及時采取預定的措施，減少對人員的、場所的、環境的、設施的危害和損失。組織生物安全實驗室工作人員進行《應急預案》的培訓宣貫和現場演練，目的是要求工作人員熟練掌握，能按照應急預案規定的方式消除污染和安全撤離。

5.8 生物安全實驗室的廢物處理

檢測活動完畢后，收集工作人員的防護用品、用畢的試劑與耗材、樣本培養物、不宜重復的用品用具、不需要再次保存的樣本與菌種等作為醫療廢物進行壓力蒸汽滅菌處理。滅菌后的廢物裝入轉運箱，運往醫療廢物處理機構安全處理。

5.9 生物安全實驗室的廢水處理

疾控機構應配置廢水處理系統，由廢水收集單元、絮凝助凝沉淀單元、pH自動調節單元、固液分離單元、重金屬捕捉單元、兩級有機生物活性處理單元、復合式消毒處理單元、袋式過濾處理單元等技術工藝組成，能有效去除廢水中的COD、BOD、SS、色度、病毒、細菌、有機溶劑和重金屬離子等，經過處理的實驗室廢水經第三方檢測機構檢測，檢測指標應符合GB 8978-1996《污水綜合排放標準》。

5.10 生物安全實驗室的安全保衛

疾控機構應在生物安全實驗室安裝門禁系統，布設多個高清攝像頭和入侵報警裝置，設立24 h有人值守的安全監控室,并配備橡膠警棍、催淚噴射器、鋼叉、盾牌、消防器材等安保設備，防止非法侵入、盜、搶、火災等事件的發生，保證實驗室安全。

5.11 生物安全實驗室的監督檢查

生物安全實驗室的監督檢查應按照事先制定核查表，組織監督人員逐項核查，每年至少組織1次，對關鍵控制點、出現過問題的環節可適當增加檢查次數。如發現不符合管理體系要求的環節，應按照相關的程序文件要求，立即查找原因并采取糾正措施，必要時應停止檢測活動。

5.12 生物安全實驗室的內部審核

生物安全管理委員會組織內審員以現場審核的方式，對實驗室生物安全管理體系進行內部審核，驗證管理體系是否符合生物安全相關法律法規和標準的要求，驗證管理體系運行是否持續符合管理體系文件的要求[17]。內部審核結果報告應提交生物安全管理委員會，作為輸入管理評審的主要內容。

5.13 生物安全實驗室的管理評審

生物安全管理委員會在綜合各個實驗室內部、外部各種信息的基礎上，對實驗室生物安全管理體系的適宜性、充分性和有效性等做出分析和評價，提出相應的改進措施，制定整改日程，要求在規定的時間完成整改，并組織人員驗證整改效果，以不斷地改進管理體系[18]。

6 結語

實驗室生物安全問題已是國家安全層面的一個重要組成部分。做好實驗室生物安全管理，從生物安全實驗室建設開始，就要按照相關的要求建設符合生物安全要求的實驗室，再建立行之有效的實驗室生物安全管理體系，管理組織履職盡責，嚴格控制影響實驗室生物安全的每個環節和因素，并在檢測活動實踐中不斷改進,才能充分發揮實驗室生物安全管理體系的作用，有效地防止病原微生物傳播，防范和應對生物安全風險，保障人民生命健康，保護生物資源和生態環境。