不同粒徑波棱甲素納米混懸劑的制備及藥動學研究

杭凌宇，申寶德，沈成英，楊 闊，袁海龍*

·藥劑與工藝·

不同粒徑波棱甲素納米混懸劑的制備及藥動學研究

杭凌宇1, 2，申寶德2，沈成英2，楊 闊1，袁海龍2*

1. 江西中醫藥大學藥學院，江西 南昌 330004 2. 空軍特色醫學中心 藥學部，北京 100042

制備不同粒徑波棱甲素納米混懸劑（herpetrione nanosuspension，Her-NS），并探討粒徑對Her-NS口服生物利用度的影響。采用反溶劑沉淀法制備2種不同粒徑Her-NS，采用單因素實驗以平均粒徑、多分散系數、穩定性指數為評價指標優化處方工藝參數，掃描電子顯微鏡（SEM）觀察Her-NS形態，X射線衍射（XRD）分析晶型，透析法研究體外釋放特性。通過SD大鼠比較2種不同粒徑Her-NS口服藥動學差異。以P188、P407為穩定劑分別制備了200、450 nm 2種不同粒徑Her-NS（Her-NS200、Her-NS450），SEM顯示2種粒徑的Her-NS均為球狀，XRD分析表明2種粒徑Her-NS均為無定型態。體外釋放度與藥動學結果顯示，與波棱甲素原料藥比較，2種粒徑Her-NS的累積釋放度明顯提高，Her-NS的達峰濃度（max）、藥時曲線下面積（AUC0～t）均顯著提高；Her-NS200的max、AUC0～t均高于Her-NS450。Her-NS可明顯提高波棱甲素口服生物利用度，且粒徑越小，生物利用度越高。

波棱甲素；反溶劑沉淀法；納米混懸劑；粒徑；體外釋放；藥動學；口服生物利用度

波棱瓜子是葫蘆科波棱瓜屬植物波棱瓜Wall.的干燥成熟種子，為藏醫臨床治療肝病的常用藥物之一[1]。波棱瓜子藥用歷史悠久，療效確切，其味苦，性寒，能清腑熱、膽熱，具有清熱解毒、去火降熱、助消化的作用，用于治療肝熱、黃疸性傳染型肝炎等[1]。現代研究表明，波棱瓜子具有保肝降酶、抗乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）及抗肝纖維化等多種藥理作用[2-3]。波棱甲素（herpetrione，Her）分子式為C30H32O10，相對分子質量552.579，是從波棱瓜子的中分離得到的活性木脂素單體化合物[4-5]，其對-氨基半乳糖誘導的小鼠急性肝損傷具有明顯的保護作用，可有效抑制HepG2.215細胞乙型肝炎表面抗原HBsAg和乙型肝炎e抗原HBeAg的表達及HBV-DNA的復制，并呈現一定的劑量相關性。但它在水中幾乎不溶，屬于難溶性木脂素類藥物，口服生物利用度低，極大地限制了該藥物的臨床應用。

納米混懸劑（nanosuspension，NS）是由藥物粒子與少量穩定劑組成的亞微膠體分散體系[6-7]，不同于傳統意義上的基質骨架型納米體系，NS輔料添加少，載藥量高，尤其適用于難溶性中藥有效成分及有效部位的開發[8]。近年來，NS的體內行為越來越受到關注。研究發現，粒徑通過影響表觀溶解度及其在生物膜上的通透性和轉運途徑從而影響NS的吸收和分布[9-11]。

本實驗采用反溶劑沉淀法制備2種不同粒徑的Her-NS，以平均粒徑（PS）、多分散指數（PDI）及穩定性指數（SI）為指標，通過單因素實驗優化處方和工藝，利用掃描電子顯微鏡（SEM）、X射線衍射分析（XRD）觀察其形態、晶型變化，并進行初步的藥動學研究。

1 儀器與試藥

LCMS-2010EV高效液相色譜儀，日本島津公司；Winner802納米粒度儀，濟南微納顆粒儀器股份有限公司；BT125D分析天平，北京賽多利斯科學儀器有限公司；DF-101D集熱式恒溫加熱磁力攪拌器，鞏義市予華儀器有限責任公司；KH5200DB型數控超聲波清洗器，昆山禾創超聲儀器有限公司；SHB-Ⅲ循環水式多用真空泵，鄭州長城科工貿有限公司；WH861渦旋混合器，北京科爾德科貿有限公司；S-4800掃描電子顯微鏡，日本日立公司。

波棱甲素，質量分數≥95%，實驗室自制，批號SPR190505-KZ01；泊洛沙姆188（P188）、泊洛沙姆407（P407）均購于北京鳳禮精求商貿有限責任公司；羥丙甲纖維素HPMC-E15、HPMC-E50，購自安徽山河藥用輔料有限公司；甲醇、乙腈為色譜純；其他試劑為分析純。

SD大鼠，雄性，體質量（200±20）g，SPF級，北京科宇動物養殖中心，動物許可證號SCXK（京）2018-0010。動物實驗經空軍特色中心倫理委員會批準，批準文號：空特（科研）第2020-148-PJ01。

2 方法與結果

2.1 波棱甲素納米混懸劑（Her-NS）的制備

采用反溶劑沉淀法制備Her-NS[12-13]。稱取50 mg Her粉末，溶于0.25 mL乙醇溶液中，超聲使其充分溶解。然后在磁力攪拌條件下，將含有Her的乙醇溶液快速倒入到5 mL含有一定量穩定劑溶液中，減壓旋蒸揮去有機溶劑，補充適量去離子水定容至原體積，即得Her-NS。

2.2 粒徑分析

取適量Her-NS，加蒸餾水稀釋20倍，采用納米粒度儀測定PS與PDI，重復測定3次，取平均值。

2.3 SI的測定

取適量Her-NS于離心管中，1500 r/min離心30 min，取上層混懸液，加蒸餾水稀釋20倍，采用納米粒度儀測定PS與PDI，重復測定3次，取平均值，Her-NS的穩定性通過SI進行評估，SI值越接近1，表示Her-NS越穩定。

SI＝離心前PS/離心后PS

2.4 單因素考察

本實驗以納米混懸劑的PS、PDI和SI為評價指標，分別對穩定劑種類、穩定劑用量、聯合穩定劑比例、藥物與穩定劑比例、攪拌轉速5個因素進行考察。

2.4.1 穩定劑種類的篩選 固定穩定劑用量為0.6%，藥物與穩定劑比例為2∶1，攪拌轉速600 r/min，考察P188、P407、羥丙基甲基纖維素（HPMC）E15和HPMC E50[14]對Her-NS的PS、PDI和SI的影響，結果見圖1和表1。以HPMC系列作為穩定劑，所制備的混懸液不穩定，易產生藥物黏壁的現象。單獨以P407為穩定劑時，Her-NS的PDI雖然小于0.3（SI＞0.75），但粒徑較大；單獨以P188為穩定劑時，納米混懸劑的粒徑小，但PDI大于0.3或SI＜0.60；因此，選擇將P188和P407聯用作為Her-NS的穩定劑。

2.4.2 穩定劑用量的篩選 固定藥物與穩定劑比例為2∶1，穩定劑（P188-P407）比例為2∶1，攪拌轉速600 r/min，攪拌時間20 s，穩定劑用量分別為0.2%、0.4%、0.6%、0.8%，按照“2.1”項下方法制備Her-NS，考察聯合穩定劑用量對PS、PDI和SI的影響，結果見表2。隨著穩定劑用量的增加，納米混懸劑的PS及PDI呈先降低后升高趨勢，當穩定劑用量為0.6%時，PS、PDI和SI最佳。

圖1 穩定劑種類的影響

表1 穩定劑種類對Her-NS的PS、PDI和SI的影響 (,n = 3)

與P188比較：*＜0.05

*< 0.05P188

2.4.3 穩定劑比例的篩選 固定藥物與穩定劑比例為2∶1，穩定劑用量為0.6%，攪拌轉速600 r/min，攪拌時間20 s，P188-P407比例分別為4∶1、2∶1、1∶1、1∶2，按照“2.1”項下方法制備Her-NS，并測定PS、PDI和SI，結果見表3。隨著P407比例的增加，NS溶液PDI減小、SI增大，繼續增加P407，Her-NS的粒徑和PDI、SI無明顯變化。當2種穩定劑比例達到1∶1時，可獲得粒徑相對較低，溶液狀態良好，PDI合格、SI＞0.75的NS。

表2 穩定劑用量對Her-NS的PS、PDI和SI的影響(,n = 3)

與穩定劑用量為0.6%組比較：*＜0.05

*< 0.05the stabilizer dosage of 0.6% group

表3 穩定劑比例對Her-NS的PS、PDI和SI的影響(, n = 3)

與穩定劑比例1∶1組比較：*＜0.05

*< 0.05the stabilizer ratio 1:1 group

2.4.4 藥物與穩定劑比例的篩選 固定P188-P407比例分別為2∶1，穩定劑用量為0.6%，攪拌轉速600 r/min，攪拌時間20 s，按照“2.1”項下方法制備Her-NS，對藥物與穩定劑的比例（5∶1、5∶3、1∶1）進行考察，并測定PS、PDI和SI，結果見表4。當藥物與穩定劑比例為5∶3時，各項指標較優。

2.4.5 攪拌速度 固定P188-P407比例分別為2∶1，藥物與穩定劑的比例2∶1，穩定劑用量為0.6%，攪拌時間20 s，攪拌速度分別為400、600、800 r/min，按照“2.1”項下方法制備Her-NS，并測定PS、PDI和SI，結果見表5。Her-NS的粒徑隨攪拌速度增大而減小，當轉速為400 r/min時，可獲得粒徑為450 nm左右的Her-NS（Her-NS450），當轉速為600、800 r/min時，可獲得粒徑為200 nm左右的Her-NS（Her- NS200），但當轉速為800 r/min時，PDI明顯增加，SI減小，可能是由于轉速過大導致液體產生氣泡，使NS穩定性降低。

表4 藥物與穩定劑比例對Her-NS的PS、PDI和SI的影響(, n = 3)

與藥物與穩定劑比例5∶3組比較：*＜0.05

*< 0.05the 5:3 group of drug and stabilizer ratio

表5 攪拌速度對Her-NS的PS、PDI和SI的影響(, n = 3)

與攪拌速度600 r?min?1組比較：*＜0.05

*< 0.05the stirring speed 600 r?min?1group

2.4.6 工藝條件的確定 稱取穩定劑P407和P188（P407與P188比例1∶1，質量濃度6 mg/mL），置于5 mL去離子水中，攪拌使其充分溶解，得到穩定劑溶液。稱取波棱甲素粉末50 mg，溶于0.25 mL乙醇溶液中，超聲使其充分溶解，分別在400、600 r/min轉速的磁力攪拌條件下，將含有藥物的有機溶液快速倒入到穩定劑溶液中混合均勻，持續攪拌 20 s，減壓揮去有機溶劑，補充適量去離子水定容至原體積，即得Her-NS450、Her-NS200。以PS、PDI和SI為指標進行測定，結果見表6。

表6 Her-NS最佳工藝條件驗證(, n = 3)

2.5 Her-NS的表征

2.5.1 形態觀察 SEM觀察Her-NS和波棱甲素原料藥的形態，將樣品適當稀釋后，將Her-NS制劑滴在錫紙上，然后在20 mA電流下用金鈀導電層濺射鍍膜1 min，并在10 kV的加速激勵電壓下進行觀察，Her-NS的形態見圖2，波棱甲素原料藥呈球狀及不規則塊狀，棱角分明，大小不一，粒徑在5～40 μm（圖2-A）；Her-NS200呈均勻球狀（圖2-B），粒徑在150～200 nm；Her-NS450呈球狀（圖2-C），可看到納米粒之間有黏附，其長徑和短徑不同；短徑小于400 nm，長徑在600～800 nm。

2.5.2 晶型表征 采用XRD分別對2種粒徑的Her-NS及波棱甲素原料藥晶型進行掃描分析。分別對波棱甲素原料藥、P188、P407、波棱甲素與P188、P407的物理混合物及2種粒徑的Her-NS樣品進行XRD分析。工作條件：Cu靶，管電壓40 kV，管電流60 mA。掃描速率2o/min，掃描2范圍為3o～60o。結果（圖3）顯示，不同粒徑的Her-NS及波棱甲素原料藥相同的位置上均無衍射峰，說明波棱甲素制備成不同粒徑的Her-NS，制備過程不會影響藥物的晶型。

圖2 Her-NS的SEM圖

2.5.3 穩定性考察 將Her-NS200、Her-NS450在室溫條件下分別放置7 d，每天取樣，蒸餾水稀釋20倍測定PS和PDI，結果如圖4，Her-NS200、Her-NS450在室溫條件下放置7 d，粒徑分別在200、450 nm左右，PDI在0.25左右，表明Her-NS在7 d內物理穩定。

圖3 Her-NS的XRD圖

圖4 Her-NS的粒徑和PDI隨時間的變化(n = 3)

2.6 體外釋放度研究

2.6.1 色譜條件 色譜柱為Inertsil?ODS-3（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相為乙腈-2%醋酸水溶液（30∶70），檢測波長280 nm，柱溫30 ℃，進樣量20 μL，體積流量1.0 mL/min，理論塔板數按波棱甲素峰計算不低于4500，色譜圖見圖5。

圖5 波棱甲素對照品(A)、Her-NS樣品(B)、空白(C)的HPLC圖

2.6.2 對照品溶液的配制 精密稱取波棱甲素對照品6.97 mg，置于10 mL量瓶中，加入一定量的甲醇超聲溶解并定容至刻度，配成波棱甲素質量濃度為697 μg/mL的對照品儲備液。

2.6.3 供試品溶液的配制 精密吸取新鮮制備的Her-NS 0.1 mL于10 mL量瓶中，加適量甲醇超聲溶解，定容，濾過，精密吸取續濾液1 mL于10 mL量瓶中，甲醇定容至刻度線，搖勻即得供試品溶液。

2.6.4 線性關系考察 精密吸取對照品儲備液用甲醇稀釋成34.850、27.880、13.940、6.970、3.485 μg/mL的波棱甲素對照品溶液，用甲醇稀釋并定容至刻度線，搖勻HPLC法依次測定各個質量濃度，以藥物質量濃度（）對峰面積（）作線性回歸，繪制標準曲線，得線性回歸方程＝25 051－52.926，＝0.999 9，線性范圍為3.485～34.850 μg/mL。

2.6.5 方法學驗證 分別取低、中、高（3.485、13.940、34.850 μg/mL）3個質量濃度的波棱甲素對照品溶液，分別連續進樣HPLC測定6次，計算各個質量濃度的精密度，結果顯示，低、中、高質量濃度的波棱甲素對照品溶液RSD值分別為0.94%、0.19%、0.23%。表明儀器精密度良好。

按“2.6.3”項下制備供試品溶液，分別于0、1、2、4、8、12、24 h按色譜條件測定峰面積，觀察峰面積比值變化情況，其RSD為1.71%，表明供試品溶液穩定性良好。

按照“2.6.3”項下分別制備6份供試品溶液，按色譜條件測定峰面積，計算NS中波棱甲素的量，其RSD為0.52%，表明該方法重復性良好。

精密量取已測定含量的同一供試品溶液9份各1 mL，分別加入對照品的量與其在NS中的量的比值為0.8∶1、1∶1、1.2∶1，每個比例3份，按“2.6.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積，計算加樣回收率。結果低、中、高不同質量濃度的平均回收率分別為101.12%、102.74%、101.17%，RSD值均小于1.81%。表明回收率符合要求。

2.6.6 測定方法 采用透析袋擴散法測定Her- NS200、Her-NS450和波棱甲素在PBS（pH 7.4）中的釋放行為。取溶液2 mL（相當于20 mg波棱甲素）及等質量濃度的波棱甲素溶液于截留相對分子質量8000的透析袋內，以200 mL蒸餾水作為溶出介質，控制溫度為（37.0±0.5）℃，轉速為100 r/min，于釋放后1、2、4、6、8、12、16、22、24 h取樣1 mL，同時補足等溫等量的溶出介質，樣品經微孔濾膜濾過，通過HPLC測定含量（以波棱甲素計）。并繪制釋放度曲線，見圖6。結果顯示，在12 h內，Her-NS200、Her-NS450和波棱甲素的累積釋放率分別為49.78%、40.76%、21.95%。在24 h內，分別在透析袋外檢測到85.88%、80.10%、35.41%。在24 h內，與波棱甲素原料藥相比，Her-NS200、Her-NS450的釋放度顯著提高（＜0.05），粒徑越小，累積釋放度越大。

圖6 Her-NS200、Her-NS450和波棱甲素原料藥在PBS (pH 7.4) 中的體外藥物釋放曲線(n = 3)

2.7 體內藥動學研究

2.7.1 給藥方案與樣品采集 SD大鼠18只，隨機分為3組，每組6只，給藥前禁食12 h，不禁水，分別ig給藥Her-NS200、Her-NS450及波棱甲素原料藥（0.5% CMC-Na配制的波棱甲素混懸液）。每只大鼠給藥劑量為250 mg/kg（以波棱甲素計），給藥后分別在0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、12 h于大鼠眼底靜脈叢取血，所得血樣放置肝素浸潤的離心管中，6000 r/min離心10 min后吸取上清液，待測。

2.7.2 血漿樣品處理 精密移取空白血漿0.2 mL，置于具塞離心管中，加入600 μL的甲醇沉淀蛋白，渦旋振搖30 s，8000 r/min離心10 min，吸取上清液，在25 ℃下用氮氣吹干，殘渣加入100 μL甲醇溶解，充分渦旋振蕩，8000 r/min離心10 min，取上清液40 μL進樣分析。

2.7.3 色譜條件 色譜柱為Inter Sustain?C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相為乙腈-2%醋酸水溶液（30∶70），檢測波長280 nm，柱溫30 ℃，進樣量40 μL，體積流量1.0 mL/min，理論塔板數按波棱甲素峰計算不低于4500。色譜圖見圖7。

2.7.4 方法專屬性 取“2.7.2”項預處理后的空白血漿、空白血漿加標樣品和含藥血漿樣品各40 μL進樣分析，結果見圖7。大鼠血漿中內源物質對波棱甲素的測定無干擾，該方法專屬性強。

2.7.5 線性關系考察 取空白血漿0.2 mL，分別精密加入系列的波棱甲素對照品溶液，渦旋混勻，配制成0.945 1、1.890、3.780、5.671、7.561、9.451 μg/mL質量濃度的標準血漿樣品。按“2.7.2”項下處理血漿樣品，按“2.7.1”項色譜條件進行藥物測定，以藥物質量濃度（）對峰面積（）作線性回歸，得標準曲線方程＝47 700＋29 285，＝0.999 3，線性范圍為0.945 1～9.451 μg/mL。

圖7 波棱甲素對照品(A)、空白血漿樣品(B)、空白血漿樣品＋波棱甲素對照品(C)和大鼠給藥Her-NS1 h后血漿樣品(D)的HPLC圖

2.7.6 回收率試驗 分別取高、中、低（7.561、3.780、0.945 1 μg/mL）3個質量濃度的加藥血漿，經處理后進樣測定，每個質量濃度平行測定5次，計算血漿藥物質量濃度，所得質量濃度與實際質量濃度的比值即為回收率。高、中、低3個質量濃度的平均回收率分別為97.66%、101.35%、97.40%，RSD分別為1.19%、2.60%、2.67%（＝5）。符合生物樣品分析方法的基本要求。

2.7.7 精密度試驗 分別取高、中、低（7.561、3.780、0.945 1 μg/mL）3個質量濃度的加藥血漿按“2.7.2”項下方法處理，按“2.7.1”項色譜條件，進樣測定，1 d內連續測定3次，計算日內精密度，每天測定1次并連續測定3 d，計算日間精密度。高、中、低3個質量濃度的日內精密度RSD分別為1.65%、1.93%、1.06%。日間精密度RSD則分別為1.78%、2.44%、2.36%（＝3）。符合生物樣品分析方法的基本要求。

2.7.8 穩定性試驗 分別取高、中、低（7.561、3.780、0.945 1 μg/mL）3個質量濃度的加藥血漿，各個血漿樣品反復凍融3次，經處理后進樣測定，考察其穩定性。高、中、低3種質量濃度的RSD分別為1.34%、3.23%、2.26%，結果顯示，反復凍融不影響血漿樣品的測定。

2.7.9 定量限和檢測限 取波棱甲素對照品溶液，逐步稀釋，HPLC測定各質量濃度對應信噪比（/）。以/＝10為定量限，以/＝3為檢測限。結果顯示，定量限為0.9 μg/mL，檢測限為0.2 μg/mL。

2.7.10 血藥濃度–時間曲線 以血藥質量濃度對時間作圖，血漿藥物質量濃度-時間曲線見圖8，藥動學參數見表7，藥-時曲線經擬合顯示Her-NS在大鼠體內動力學行為符合二室模型。由圖8和表7可知，大鼠ig給藥后，2種粒徑的Her-NS均在30 min達到血藥峰濃度（max），max分別為（15.50±1.83）、（11.84±0.59）mg/L，與波棱甲素原料藥相比，Her-NS的達峰時間（max）是波棱甲素的0.6倍，Her- NS200、Her-NS450max是波棱甲素（6.67±0.68）mg/L的2.32、1.78倍。表明Her-NS入血快，且血藥濃度高。Her-NS200、Her-NS450的藥-時曲線下面積（AUC0～t）分別為（32.55±7.69）、（27.18±4.50）mg/(L·h)，分別是波棱甲素（12.84±0.81）mg/(L·h)的2.54、2.12倍。Her-NS中的max和AUC0～t較波棱甲素原料藥都有了顯著提高（＜0.01），可見，Her-NS較波棱甲素更容易被吸收，Her-NS顯著提高了波棱甲素的體內生物利用度。

圖8 Her-NS和波棱甲素(給藥劑量250 mg?kg?1)的血藥濃度-時間曲線(, n = 6)

表7 大鼠ig給藥Her-NS后的主要藥動學參數(,n = 6)

與波棱甲素組比較：*＜0.05**＜0.01

*< 0.05**< 0.01herpetrione group

3 討論

本實驗采用反溶劑沉淀法制備納米混懸劑，通過單因素實驗優化，成功制備了2種不同粒徑的Her-NS，即Her-NS-200、Her-NS-450。粒徑分別為200 nm和450 nm左右；PDI小于0.2，SI大于0.75。表明粒徑分布均勻[15]。本實驗考察了穩定劑種類、穩定劑用量、聯合穩定劑比例、藥物與穩定劑比例、攪拌轉速等因素對Her-NS粒徑及PDI的影響，結果顯示穩定劑的種類及攪拌轉速對其影響較顯著，這可能由于不同穩定劑對維持不同藥物的NS體系效果不同，添加穩定劑是維持納米混懸劑穩定性的主要方法，良好的穩定劑可以為納米混懸劑提供足夠的空間位阻或靜電排斥力，以阻止粒子聚集[15-17]。在本研究中，單一穩定劑P188的應用雖然能夠獲得較小粒徑的Her-NS，但是粒徑分布較大，不穩定。研究報道，應用聯合穩定劑可更好的保證納米混懸劑的穩定性。本研究參考文獻報道[14]，應用聯合穩定劑P188和P407，結合實驗優化比例，從而得到較穩定的Her-NS。P188和P407均為聚合物，能夠為Her-NS提供足夠的空間位阻，以阻止粒子聚集，保證Her-NS的穩定。混合過程的攪拌轉速可能影響沉淀過程的納米粒形成與成長，低轉速下，溶液分散慢，在反溶劑中聚集沉淀快，導致納米粒粒徑較大；而轉速過高則因能量過度輸入，打破體系原有平衡，導致已獲得的納米粒聚集，分布變差，PDI變大[13]。通過單因素實驗，本研究確定將P188和P407聯用作為Her-NS的穩定劑，所制備的NS粒徑小、粒徑分布較窄。本實驗主要是探討粒徑對Her-NS藥動學的影響，在確定處方的基礎上，通過控制不同工藝參數獲得不同粒徑的Her-NS。掃描電鏡結果顯示，Her-NS200、Her-NS450均呈圓球狀；XRD結果顯示Her原料藥及不同粒徑的Her-NS均為無定型態，表明納米化過程不會影響波棱甲素的形態及晶型。

體外釋放度實驗結果顯示，Her-NS200、Her- NS450與波棱甲素原料藥相比，Her-NS的累積釋放度顯著提高（＜0.05），表明將波棱甲素制成Her-NS能提高其體外釋放度。NS粒徑與釋放度呈負相關，這是因為隨著粒徑的減小，較大的比表面積導致NS[9]的溶解度較高[9,18]。

藥動學實驗結果顯示，2種粒徑的Her-NS的AUC0～t和max均顯著高于波棱甲素（＜0.01）；表明波棱甲素制成納米混懸劑后，生物利用度顯著提高。這主要是因為波棱甲素納米化后，粒徑顯著降低，增加波棱甲素的溶出及與胃腸道的黏附性，促進了波棱甲素的吸收，進而提高了波棱甲素的口服生物利用度。此外，顯著延長的MRT0～t也有利于生物利用度的增加。Her-NS200的AUC0～t和max高于Her-NS450，說明粒徑小更有助于生物利用度的改善。兩者差異不顯著，這與文獻報道的不一致[9,18]，分析可能原因如下：Her-NS口服進入胃腸道，受復雜的胃腸道環境如不同的pH值，消化酶等的影響，導致Her-NS在胃腸道有輕微聚集，降低了粒徑差異，導致吸收差異不顯著。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 中華人民共和國衛生部藥品標準?藏藥 (第1冊) [S]. 1995: 64.

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Preparation andpharmacokinetic behaviors of herpetrione nanosuspensions

HANG Ling-yu1, 2, SHEN Bao-de2, SHEN Cheng-ying2, YANG Kuo1, YUAN Hai-long2

1. College of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China 2. Department of Pharmacy, Air Force Medical Center, Beijing 100042, China

To prepare herpetrione nanosuspension (Her-NS) with different particle sizes, and explore the effects of particle size on the oral bioavailability.Her-NS with two different particle sizes were prepared by anti-solvent precipitation method, and optimized by single factor experiments with average particle size, polydispersity index, and stability index as evaluation indexes. The morphology of Her-NS was observed by scanning electron microscope (SEM), and the physical state was analyzed by X-ray diffraction (XRD). The drug release of Her-NS was evaluated by dialysis method. The oral pharmacokinetics of Her-NS with two different particle sizes were compared using SD rats.Her-NS with two different particle sizes around 200 nm (Her-NS200) and 450 nm (Her-NS450) were successfully prepared with P188 and P407 as stabilizers. SEM showed that Her-NS with two different particle sizes were all spherical in shape, and the XRD analysis showed that Her-NS with two different particle sizes were amorphous.release and pharmacokinetic results showed that the cumulative release and themaxand AUC0—tof Her-NS with two different particle sizes were significantly increased as compared to coarse Her, but themaxand AUC0—tof the Her-NS200were higher than those of Her-NS450.NS can significantly improve the oral bioavailability of Her, and the small particle size is more significant.

herpetrione; anti-solvent precipitation method; nanosuspension; particle size;release; pharmacokinetics; oral bioavailability

R283.6

A

0253 - 2670(2021)07 - 1898 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.07.006

2020-11-23

國家自然科學基金資助項目（81573697）；國家自然科學基金資助項目（81873092）；國家重大新藥創制（2016ZX09101073）

杭凌宇，博士研究生，研究方向為中藥制劑工程技術研究。E-mail: 445914871@qq.com

袁海龍，博士，研究員，博士生導師，研究方向為中藥新型給藥系統。Tel: (010)66928505 E-mail: yhlpharm@126.com

[責任編輯 鄭禮勝]