豬偽狂犬病病毒、豬圓環病毒2型和3型三重PCR檢測方法的建立

崔建濤,侯承堯,黨鈺茗,徐 通,趙 宇,田潤博,陳紅英* (.河南農業大學 牧醫工程學院,河南 鄭州 45000；.河南泌陽縣農業科學研究所，河南 泌陽 463700)

偽狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)屬于皰疹病毒科，α-皰疹病毒亞科，可以感染各個年齡段豬，引起生長豬呼吸系統疾病、妊娠母豬繁殖障礙、仔豬神經癥狀并導致高死亡率，特別是15日齡內仔豬，死亡率高達100%[1]。20世紀70年代，我國從匈牙利引入PRV弱毒疫苗Bartha-K61株，該疫苗在1990—2011年間廣泛應用，有效控制了豬偽狂犬病在我國的流行。然而，2011年底，我國大部分地區包括接種Bartha-K61疫苗的豬群大規模暴發豬偽狂犬病，給我國養豬業帶來了巨大的經濟損失[2]。

豬圓環病毒(porcine circovious,PCV)是目前發現的最小的動物病毒，包括PCV1、PCV2和PCV3三種基因型，其中PCV1對豬群沒有致病性[3]，斷奶后多系統衰竭綜合征主要由PCV2引起，同時也會侵害豬的淋巴系統，造成免疫抑制[4]。2016年，美國PALINSKI等[5]和PHAN等[6]幾乎同時發現PCV3，PCV3與PCV密切相關，患病仔豬表現多方面功能紊亂，導致母豬死亡和流產。

由于PRV、PCV2和PCV3均可引起母豬繁殖障礙和呼吸系統疾病，臨床上很難區分這3種病毒是單一感染還是混合感染，有報道稱PRV、PCV2與PCV3同時感染豬群時，臨床表現變得復雜且病豬死亡率增加[7-8]。本試驗建立能夠同時檢測PRV、PCV2和PCV3的三重PCR方法，為這3種疾病的防控提供靈敏、特異和準確的診斷方法。

1 材料與方法

1.1 病毒株和臨床樣品PRV強毒株(PRV HN2012)、PCV2、豬細小病毒(PPV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)均由鄭州市豬重大疫病防控重點實驗室保存。……