豬IL-10重組腺病毒的構(gòu)建及其對(duì)PRRSV體外增殖的影響

魏婷婷，劉思穎，杜連昭，李 晨，王茜茜，馬 欣，王興龍 (西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

豬繁殖與呼吸綜合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)又稱“豬藍(lán)耳病”，由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染豬引起，自1987年被首次報(bào)道以來(lái)[1]給全球養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失[1-3]。PRRSV基因型分為歐洲型(Ⅰ型)與美洲型(Ⅱ型)[4]2種，2種分型的PRRSV毒株感染后引起的臨床癥狀基本相同[5]。

我國(guó)主要流行Ⅱ型PRRSV毒株[6-8]，并于2006年自江西省開始出現(xiàn)[9-10]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒(HP-PRRSV)，該病被列為一類傳染病[11]。在我國(guó)PRRSV的地區(qū)性流行時(shí)有發(fā)生，減毒活疫苗在防控PRRS時(shí)起一定程度作用[12]，但PRRSV為RNA病毒，其基因組不斷地變異與重組產(chǎn)出新的強(qiáng)毒株，給疫苗防控帶來(lái)巨大的挑戰(zhàn)。PRRSV為套式病毒目、動(dòng)脈炎病毒科、動(dòng)脈炎病毒屬的一員[13]，與同屬的其他病毒有著相似的基因結(jié)構(gòu)和復(fù)制方式[14]，且同樣主要感染巨噬細(xì)胞并在其中進(jìn)行復(fù)制，造成感染后機(jī)體的免疫抑制與持續(xù)性感染，這一特征為其防控帶來(lái)阻礙，且其機(jī)理尚不明確。研究發(fā)現(xiàn)，PRRSV感染豬后可誘導(dǎo)機(jī)體PBMC與PAM等細(xì)胞分泌IL-10使其表達(dá)上調(diào)，但被誘導(dǎo)的IL-10高表達(dá)對(duì)PRRSV感染機(jī)體的意義尚不明確。

IL-10細(xì)胞因子作為一個(gè)典型的免疫抑制因子，可能在PRRSV的感染過程中發(fā)揮主要作用。為探究IL-10對(duì)PRRSV在細(xì)胞內(nèi)增殖的影響，本研究利用重組人腺病毒表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建表達(dá)豬IL-10的重組腺病毒，以重組腺病毒感染的方式實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)IL-10的過表達(dá)，并檢測(cè)過表達(dá)IL-10對(duì)PRRSV在體外細(xì)胞內(nèi)增殖產(chǎn)生的影響，以期為后續(xù)體內(nèi)試驗(yàn)的進(jìn)行提供技術(shù)支持，為進(jìn)一步揭示IL-10于PRRSV感染的分子意義提供依據(jù)，從而給PRRSV的防控提供解決思路。……