鑒別PRRSV經(jīng)典、高致病性和類NADC30毒株P(guān)CR方法的建立及初步應(yīng)用

商佳亮，騰召劍，陳立功，倪福太，宋勤葉*，周雙海 (.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物醫(yī)學(xué)院，河北 保定 07000；.吉林師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，吉林 四平 36000；3.北京農(nóng)學(xué)院 動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 006)

豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)可引起妊娠母豬厭食、發(fā)熱，懷孕后期流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、木乃伊胎兒或弱仔，仔豬和生長肥育豬呼吸困難、間質(zhì)性肺炎以及免疫功能抑制等臨床癥狀與病理變化。該病毒是當(dāng)今危害全球養(yǎng)豬生產(chǎn)最重要的病原之一[1-4]。20世紀(jì)80年代中后期，PRRSV在北美洲和歐洲幾乎同時暴發(fā)，隨后在世界各地相繼流行，1996年郭保清等[5]首次從我國豬場的流產(chǎn)胎兒體內(nèi)分離鑒定到該病毒。自PRRSV暴發(fā)流行以來，每年該病毒均給我國和世界其他國家的養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟損失。

PRRSV屬于動脈炎病毒科(Arteriviridae)動脈炎病毒屬(Arterivirus)成員，是一種單股正鏈RNA病毒。依據(jù)病毒的核苷酸序列和血清學(xué)反應(yīng)特征，PRRSV可分為PRRSV-1型(歐洲型)和PRRSV-2型(北美洲型)兩個基因型，其中PRRSV-2型為我國流行的主要基因型[6-7]。PRRSV容易變異，從1995年我國首次暴發(fā)PRRSV至今，豬場流行的PRRSV毒株歷經(jīng)經(jīng)典毒株、高致病性毒株(highly pathogenic PRRSV,HP-PRRSV)及類NADC30毒株的明顯變異[6,8-9]。目前豬場流行的PRRSV以類NADC30毒株和HP-PRRSV毒株為主，經(jīng)典毒株在一些豬場零星散發(fā)[8,10-11]。對臨床PRRS疑似病例做出快速診斷、了解豬群的感染狀況對于PRRSV的有效防控具有重要意義。已有鑒別PRRSV經(jīng)典毒株、高致病性毒株或歐洲毒株的多重PCR方法[12-13]，但尚未見到鑒別類NADC30、高致病性與經(jīng)典PRRSV毒株的PCR檢測方法的研究報道。本研究建立了應(yīng)用1對引物即可鑒別PRRSV類NADC30、高致病性與經(jīng)典毒株的PCR檢測方法，并進行初步應(yīng)用，以期為臨床病例的快速診斷與流行病學(xué)調(diào)查提供可靠的檢測工具。……