基于分子分型的髓母細胞瘤復發相關影響因素分析

劉海龍 田雨 王嘉義 李亞農 馮謹 李春德 姜濤 邱曉光

髓母細胞瘤是兒童最常見的中樞神經系統惡性腫瘤，占兒童顱內腫瘤30%，起源于神經上皮組織［1］，其發病率為1.5/10萬～2/10萬，男女比例為（1.5～2）∶1，高峰發病年齡為5～7歲，接受外科手術輔以術后放化療的患兒5年無進展生存率可達55%～70%［2-3］。我國每年新發髓母細胞瘤6000～7000例，是嚴重威脅兒童生命的中樞神經系統占位性疾病［4］。目前關于髓母細胞瘤復發的相關影響因素存在諸多爭議，國內相關研究較少。首都醫科大學附屬北京天壇醫院回顧分析近年收治的67例經病理證實的髓母細胞瘤患者的臨床資料，總結髓母細胞瘤復發率并篩查相關危險因素，以為臨床指導治療和預測患兒預后提供重要參考。

資料與方法

一、臨床資料

1.納入與排除標準 （1）頭部MRI提示第四腦室或小腦占位性病變。（2）均行顱后窩占位性病變切除術，并經術后病理學檢查證實為髓母細胞瘤。（3）排除幕上占位性病變、術后病理分型不明或術后失訪患者。（4）所有患兒及其家屬均對手術方案和檢查項目知情并簽署知情同意書。

2.一般資料 選擇2011年3月至2013年11月在我院神經外科和放射治療科診斷與治療的髓母細胞瘤患者共67例，行顱后窩腫瘤切除術，并經術后病理證實診斷，其中，男性41例，女性26例；年齡2～57歲，中位年齡8（6，13）歲。

二、研究方法

1.影像學檢查 分別于術前1周和術后72 h行頭部和脊柱MRI檢查，記錄腫瘤部位、腫瘤浸潤程度、腫瘤播散、腫瘤分期、手術切除程度等。（1）腫瘤部位：分為中央型和外側型，以顱后窩中線為中心，腫瘤中心位于顱后窩中線兩側各1 cm內為中央型，余為外側型［5］。（2）腫瘤浸潤程度：存在明確的第四腦室底部浸潤。（3）腫瘤播散：復查全腦全脊髓MRI顯示新發腫瘤灶。（4）腫瘤分期：采用Chang氏分期系統［6］，無蛛網膜下腔轉移證據為M0期，腦脊液細胞學檢查可見腫瘤細胞為M1期，蛛網膜下腔、側腦室和（或）第三腦室可見結節性轉移灶為M2期，脊髓蛛網膜下腔可見結節性轉移灶為M3期，轉移至神經系統以外為M4期。（5）手術切除程度：術后1周內復查MRI增強掃描，殘留病灶≥1.50 cm2定義為腫瘤殘留。

圖1 男性患兒，11歲，臨床診斷為第四腦室占位性病變，行后正中入路占位性病變切除術，術后經病理證實為髓母細胞瘤。術前頭部增強T1WI顯示，腫瘤位于第四腦室內，呈不均勻強化（箭頭所示） 1a 橫斷面 1b 矢狀位 圖2 男性患兒，15歲，臨床診斷為第四腦室占位性病變，行后正中入路占位性病變切除術，全切除腫瘤，術后經病理證實為髓母細胞瘤。術后3.50年增強T1WI顯示，右側小腦半球囊實性占位性病變，呈不均勻強化，提示腫瘤復發（箭頭所示） 2a 橫斷面 2b 矢狀位Figure 1 An 11-year-old boy was diagnosed as the lesion located in the fourth ventricle,and underwent the tumor resection via posterior-middle approach.The pathological diagnosis was medulloblastoma.Preoperative head axial(Panel 1a)and sagittal(Panel 1b)enhanced T1WI showed the lesion was located in the fourth ventricle with heterogeneous enhancement(arrows indicate). Figure 2 A 15-year-old boy was diagnosed as the lesion located in the fourth ventricle,and underwent the tumor resection via posteriormiddle approach.The pathological diagnosis was medulloblastoma.Axial(Panel 2a)and sagittal(Panel 2b)enhanced T1WI 3.50 years after operation showed that solid-cystic lesion in the right hemisphere of cerebellum with heterogeneous enhancement(arrows indicate),which suggested tumor recurrence.

2.病理學檢查 術后均行組織病理學檢查，參照2016年WHO中樞神經系統腫瘤分類第四版修訂版［7］，根據組織學定義將其分為經典型（CMB）、促纖維增生/結節型（DNMB）、廣泛結節型（MBEN）、大細胞型/間變性（LC/AMB）；所有腫瘤標本均行基因檢測，并根據基因定義分為WNT活化型、SHH活化型、3組型、4組型，其中，WNT活化型的標志性突變基因為CNTTB1，SHH活化型的標志性突變基因為MYCN、Gli2和MATH1，3組型的標志性突變基因為MYC、NRP3和OTX2，4組型的標志性突變基因為MYCN、PRDM6和KDM6A。

3.腫瘤復發和預后判斷 所有患者均采用電話隨訪，包括術后并發癥和治療措施、輔助治療方法、放化療方案、腫瘤復發、病死率等。腫瘤復發指治療期間或停止治療后，復查全腦全脊髓MRI顯示新發腫瘤灶［8］。

4.統計分析方法 采用SPSS 26.0統計軟件進行數據處理與分析。計數資料以相對數構成比（%）或率（%）表示，采用χ2檢驗或Fisher確切概率法；呈非正態分布的計量資料以中位數和四分位數間距［M（P25，P75）］表示，采用Wilcoxon秩和檢驗。總生存率以病死為終點，無進展生存率以手術切除腫瘤為起點、腫瘤復發為終點，繪制Kaplan-Meier生存曲線，比較兩組患者生存期。髓母細胞瘤復發相關危險因素的篩查采用單因素和多因素Cox回歸分析（α入=0.05，α出=0.05）。以P≤0.05為差異具有統計學意義。

結 果

本組67例患者，腫瘤部位為中央型56例（83.58%），外側型11例（16.42%）；27例（40.30%）存在第四腦室底部浸潤（圖1）；16例（23.88%）圍手術期出現腫瘤播散（圖2）；腫瘤分期M0期51例（76.12%），M1～M4期16例（23.88%）；手術全切除61例（91.04%），未全切除6例（8.96%）。術后病理學檢查，根據組織學分型經典型45例（67.16%），促纖維增生/結節型14例（20.90%），廣泛結節型3例（4.48%），大細胞型/間變性5例（7.46%）；根據基因檢測分型分為WNT活化型6例（8.96%），SHH活化型13例（19.40%），3組型16例（23.88%）以及4組型32例（47.76%）。術后有7例（10.45%）并發緘默癥，6例未予特殊處理，1例行高壓氧治療，均恢復至術前狀態；62例（92.54%）術后輔以放療；29例（43.28%）術后輔以化療。根據是否腫瘤復發分為復發組（22例）和未復發組（45例），兩組一般資料、影像學和病理學資料比較，差異均無統計學意義（P＞0.05，表1）。

本組患者術后隨訪13～61個月，中位時間為34個月。截至末次隨訪時（2016年2月），48例生存，總生存率為71.64%（48/67）；45例無復發，無進展生存率為67.16%（45/67）；19例死亡，病死率為28.36%，復發組18例、未復發組1例，復發組與未復發組病死率差異有統計學意義［81.82%（18/22）對2.22%（1/45）；χ2=46.078，P=0.000］。

Kaplan-Meier生存曲線顯示，根據腫瘤部位，中央型患者中位生存期51個月，外側型患者為18個月，組間差異有統計學意義（P=0.000，圖3a）；根據組織學分型，經典型患者中位生存期50個月，促纖維增生/結節型為44個月，廣泛結節型為31個月，大細胞型/間變性為10個月，組間差異有統計學意義（P=0.000，圖3b）；根據分子分型，WNT活化型中位生存期32個月，SHH活化型為19個月，3組型為33個月，4組型為57個月，組間差異有統計學意義（P=0.003，圖3c）；未復發患者中位生存期60個月，復發患者為19個月，組間差異有統計學意義（P=0.000，圖3d）。

表1 復發組與未復發組患者臨床資料的比較Table 1. The clinical information of medulloblastoma patients in recurrence group and non-recurrence group

單因素Cox回歸分析顯示，外側型（P=0.023）、大細胞型/間變性（P=0.000）、SHH活化型（P=0.032）和3組型（P=0.024）是髓母細胞瘤復發的相關危險因素（表2，3）。根據單因素Cox回歸分析結果，將上述危險因素以及組織學分型和分子分型均納入多因素Cox回歸模型，結果顯示，外側型（RR=3.514，95%CI：1.262～9.781；P=0.016）、大細胞型/間變性（RR=6.452，95%CI：1.320～31.537；P=0.021）和3組型（RR=4.289，95%CI：1.359～13.533；P=0.013）是髓母細胞瘤復發的危險因素（表4）。

討 論

髓母細胞瘤起源于小腦原始神經外胚葉，是兒童期最為常見的中樞神經系統惡性腫瘤［9］。惡性程度高，5年生存率低，是兒童癌癥相關死亡的主要原因［10］。盡管近年隨著醫學技術的革新，患兒預后有所改善，但治療方法仍十分有限，腫瘤呈浸潤性生長，鄰近腦干，手術全切除難度較大，且腫瘤細胞極易沿軟腦膜播散［11］；腫瘤對放射線和化療藥物耐受且血-腦屏障通透性較低，大劑量放化療可造成患兒多系統不可逆性功能損害，生活質量顯著降低［12］。2016年WHO中樞神經系統腫瘤分類第四版修訂版根據髓母細胞瘤遺傳學特點和基因型，分為4種分子分型，即WNT活化型、SHH活化型、3組型和4組型［13］，其中SHH活化型約占1/3，與3組型預后相近，均較差［14-15］。2021年WHO中樞神經系統腫瘤分類第五版將3組型和4組型合并為非WNT/非SHH型［16-19］，這是由于這兩種亞型區分較困難，且單細胞組學研究提示可能二者來源于同一種類型的不同時期或不同狀態。

髓母細胞瘤的治療方法主要為外科手術輔以術后放化療［20-21］。應在保護重要神經功能的前提下，最大限度安全切除腫瘤，并恢復正常腦脊液循環，同時術后輔以放化療。目前針對原發性髓母細胞瘤的治療已達成共識并取得一定效果［1］，但復發性髓母細胞瘤的治療效果仍較差，尚未形成標準治療方案，此類患兒生存期明顯縮短［22］。本研究截至末次隨訪時，總生存率為71.64%（48/67），無進展生存率為67.16%（45/67），病死率為28.36%（19/67），其中復發組病死率顯著高于未復發組［81.82%（18/22）對2.22%（1/45）；χ2=46.078，P=0.000］。

圖3 Kaplan-Meier生存曲線所見 3a 外側型患者中位生存期短于中央型（P=0.000） 3b 大細胞型/間變性患者中位生存期短于經典型、促纖維增生/結節型和廣泛結節型（P=0.000） 3c SHH活化型患者中位生存期短于WNT活化型、3組型和4組型（P=0.003） 3d 復發患者中位生存期短于未復發患者（P=0.000）Figure 3 Kaplan-Meier survival curves findings The median survival time of patients with lateral medulloblastoma was poorer than those with middle medulloblastoma(P=0.000,Panel 3a).The median survival time of patients with LC/AMB was poorer than those with other three histopathological subgroups(P=0.000,Panel 3b).The median survival time of patients with SHH subgroup was poorer than those with other three molecular subgroups(P=0.003,Panel 3c).The median survival of patients with recurrence of medulloblastoma was poorer than those without recurrence of medulloblastoma(P=0.000,Panel 3d).

Sabel等［23］對338例標危組髓母細胞瘤患者進行為期10年的隨訪，72例復發，復發率為21.30%，平均復發時間為32個月、中位復發時間為26個月。髓母細胞瘤是放射敏感性腫瘤，雖然全腦放射治療（WBRT）可導致較嚴重的不良反應或遠期并發癥，但目前認為仍應堅持盡量完成全腦放射治療［24］。藥物化療亦是髓母細胞瘤治療方案中必不可少的環節［1］。本研究納入67例髓母細胞瘤患兒，62例（92.54%）完成放射治療，29例（43.28%）完成藥物化療。目前關于藥物化療在髓母細胞瘤治療中的重要作用尚未獲得充分重視，也是導致腫瘤復發的可能因素。本研究Kaplan-Meier生存曲線顯示，外側型患者中位生存期短于中央型（18個月對51個月，P=0.000），外側型、大細胞型/間變性患者中位生存期短于經典型、促纖維增生/結節型和廣泛結節型（10個月對50、44和31個月，P=0.000），SHH活化型患者中位生存期短于WNT活化型、3組型和4組型（19個月對32、33和57個月，P=0.003），復發患者中位生存期短于未復發患者（19個月對60個月，P=0.000）；進一步行單因素和多因素Cox回歸分析顯示，外側型、大細胞型/間變性和3組型是髓母細胞瘤復發的危險因素。對于此類患者應在臨床診療中高度重視，給予更積極的治療措施。危險分層治療是目前的主流治療方案。

對于危險分層，Zeltzer等［20］在Chang氏分期系統的基礎上結合患者年齡和腫瘤切除程度，提出新的臨床分期：（1）根據是否發生蛛網膜下腔轉移，伴蛛網膜下腔轉移為高危組、不伴蛛網膜下腔轉移為低危組。（2）根據患者年齡，＜3歲為高危組、≥3歲為低危組。（3）根據術后腫瘤殘留，術后腫瘤殘留≥1.50 cm2為高危組、＜1.50 cm2為低危組。Juraschka和Taylor［25］通過整合臨床信息、分子分型和主要分子事件，提出低危組、標危組、高危組和極高危組共4種最新危險分層，針對不同層級給予不同治療措施是未來臨床研究的重點。

表2 髓母細胞瘤復發相關危險因素變量賦值表Table 2. Variable values of risk factors for medulloblastoma recurrence

表3 髓母細胞瘤復發相關危險因素的單因素Cox回歸分析Table 3. The Cox regression analysis of risk factors for medulloblastoma recurrence

表4 髓母細胞瘤復發相關危險因素的多因素Cox回歸分析Table 4. Multivariate Cox regression analysis of risk factors for medulloblastoma recurrence

綜上所述，外側型、大細胞型/間變性組織學亞型、SHH型分子亞型和復發性髓母細胞瘤患者的生存期更短，并且外側型、大細胞型/間變性組織學亞型和3組型分子亞型髓母細胞瘤更易復發，對于此類患者應予以高度關注和更積極的治療措施。

利益沖突無