基于DNA甲基化調(diào)控的中醫(yī)藥防治動(dòng)脈粥樣硬化的研究進(jìn)展*

肖 婷，何貴新，秦偉彬，莫霄云，林 琳，鄧學(xué)秋，陳天宇，任加以，玉黎燕，申永艷

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530299；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530022）

動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是心血管疾病常見(jiàn)的發(fā)病基礎(chǔ)，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，不僅與多基因遺傳相關(guān)，也受環(huán)境因素影響，盡管以調(diào)脂、抗血小板凝聚防治動(dòng)脈粥樣硬化的治療方法不斷推進(jìn)，但防治效果往往不理想，而中醫(yī)藥在臨床治療中具有多靶點(diǎn)和全方位的作用特征，新近研究發(fā)現(xiàn)中藥單體成分和復(fù)方通過(guò)作用于DNA甲基化可有效治療AS[1]。隨著現(xiàn)代研究技術(shù)的發(fā)展，從分子生物學(xué)角度研究中醫(yī)藥對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)鍵靶標(biāo)的甲基化調(diào)控作用也越來(lái)越受重視，這也有助于進(jìn)一步闡釋動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制、疾病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及發(fā)現(xiàn)早期診斷的新的分子標(biāo)志物，同時(shí)還能為疾病治療提供新的途徑。DNA甲基化的調(diào)控作用研究已成為生命科學(xué)中普遍關(guān)注的前沿領(lǐng)域。本文對(duì)近年來(lái)相關(guān)研究進(jìn)行如下綜述。

1 DNA甲基化

1.1 DNA甲基化：潛在的診斷標(biāo)志物或治療靶點(diǎn)DNA甲基化是一種已被廣泛研究的表觀遺傳調(diào)控機(jī)制，是后基因組時(shí)代生命科學(xué)領(lǐng)域的重要組成部分，在基因轉(zhuǎn)錄中扮演著重要角色。DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransterase，DNMT）的催化作用下激活胞嘧啶-磷酸鳥(niǎo)嘌呤雙核苷酸序列分布呈現(xiàn)高度密集狀態(tài)的基因CpG島，利用S-腺苷甲硫氨酸作為供體，將DNA甲基基團(tuán)轉(zhuǎn)移到胞嘧啶和鳥(niǎo)嘌呤（CG）二核苷酸的胞嘧啶中5位碳原子上，并與其3'端的鳥(niǎo)嘌呤形成mCpG，導(dǎo)致DNA結(jié)合蛋白與DNA主螺旋溝的結(jié)合能力降低，發(fā)生DNA甲基化，使某些區(qū)域DNA構(gòu)象變化，阻止轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子結(jié)合，進(jìn)而在不改變基因構(gòu)造的前提下，造成基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程受到抑制，使基因“沉默”。DNMTs是一種主要在大腦中存在的酶，DNMT家族在DNA甲基化修飾過(guò)程中起到了非常重要的調(diào)控作用，當(dāng)前發(fā)現(xiàn)中，DNMTs家族中主要是DNMTI、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3C和DNMT3L，但只有DNMT1、DNMT3A和DNMT3B具有甲基轉(zhuǎn)移活性[2]。如果在啟動(dòng)子區(qū)域發(fā)生DNA甲基化，導(dǎo)致染色體結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定甚至構(gòu)象發(fā)生變化、轉(zhuǎn)座子異常表達(dá)或基因表達(dá)活性下降甚至喪失[3]。

近年來(lái)，隨著DNA甲基化檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展和完善，人們逐步認(rèn)識(shí)到差異性DNA甲基化在基因調(diào)控、蛋白質(zhì)表達(dá)、胚胎發(fā)育、個(gè)體生長(zhǎng)中起重要作用，并且在各系統(tǒng)疾病中的研究也已得到認(rèn)可。DNA甲基化修飾通過(guò)多種途徑調(diào)控特定基因的表達(dá)，維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。反之，一旦甲基化修飾過(guò)程中的任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常，相應(yīng)疾病也隨之出現(xiàn)[4]。大量的研究表明，DNA異常基因甲基化與人類(lèi)衰老、心腦血管疾病、代謝異常疾病、各種腫瘤等關(guān)系密切，DNA基因甲基化是上述疾病發(fā)生發(fā)展的一個(gè)早期事件，并貫穿于整個(gè)疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程[5-6]。因此，可以通過(guò)檢測(cè)DNA基因的異常甲基化作為篩查疾病的生物標(biāo)志物，更好為疾病找到具體的治療靶點(diǎn)提供依據(jù)，為后期藥物開(kāi)發(fā)提供參考。

1.2 DNA甲基化在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用 動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是一種由多病因引起的慢性炎性疾病，以內(nèi)皮細(xì)胞損傷、脂質(zhì)浸潤(rùn)、血管平滑肌細(xì)胞發(fā)生遷移和增殖為主要特征，累及心腦等重要器官，是心腦血管疾病發(fā)生的主要因素[7]。但是關(guān)于AS的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，主要觀點(diǎn)為AS是由多種因素共同作用的結(jié)果，包括血流動(dòng)力學(xué)改變、脂質(zhì)代謝異常、血管內(nèi)皮損傷、物理化學(xué)因素及遺傳因素等[8]。當(dāng)前，基于AS發(fā)生發(fā)展的“炎癥”和“脂質(zhì)沉積”學(xué)說(shuō)而開(kāi)發(fā)的抗炎和降脂藥物已成為臨床上治療AS的基石。然而，單純的藥物抗炎和降脂作用越來(lái)越有限，而且一些患者已經(jīng)表現(xiàn)出耐藥性。因此，需要探究AS發(fā)生發(fā)展更深層次的影響機(jī)制調(diào)控過(guò)程，尋找能夠?yàn)榕R床提供更加有效的預(yù)防AS的方法。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)、基因組學(xué)及表觀遺傳學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，疾病的治療已不只局限于通路靶點(diǎn)的研究，而擴(kuò)展到微觀分子水平。當(dāng)前表觀遺傳學(xué)的調(diào)控作用成為新的治療靶點(diǎn)和熱點(diǎn)，AS機(jī)制研究也取得一些進(jìn)展。研究[9]發(fā)現(xiàn)，AS中出現(xiàn)異常DNA甲基化的異常表達(dá)，在AS的斑塊形成、調(diào)控單核/巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞（endothelial cell，EC）和血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）功能及AS的病變程度等中均具有重要的功能。目前很多研究發(fā)現(xiàn)，基因DNA甲基化的改變與AS關(guān)系密切。DNA甲基化通過(guò)調(diào)節(jié)某些被甲基化區(qū)域的基因表達(dá)和血管平滑肌細(xì)胞的分化，從而影響AS的形成。對(duì)AS相關(guān)基因甲基化的研究已成為當(dāng)今熱門(mén)趨勢(shì)，AS的發(fā)生發(fā)展是多個(gè)基因甲基化及不同基因不同甲基化水平聯(lián)合作用的結(jié)果。迄今為止，主要是關(guān)于雌激素受體相關(guān)基因、免疫相關(guān)基因、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、脂質(zhì)相關(guān)基因及其他影響因素的研究。具體如下：

1.2.1 DNA甲基化參與平滑肌細(xì)胞增殖 雌激素在未絕經(jīng)婦女中具有保護(hù)心血管的作用，原因是雌激素激活后，使一氧化氮合酶基因表達(dá)上調(diào)，可以很好地抑制血管平滑肌增殖和遷移，具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，也與調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝有關(guān)。有研究表明，AS患者體內(nèi)雌激素受體基因的啟動(dòng)子CpG島存在高甲基化現(xiàn)象，造成基因沉默，使其抗AS作用降低或喪失[10]。另外有研究發(fā)現(xiàn)，HILTUNEN M O等[11]在新西蘭兔的動(dòng)脈粥樣斑塊及增殖的血管平滑肌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，其基因組的甲基化水平較正常對(duì)照組普遍降低，同時(shí)發(fā)現(xiàn)基因組平滑肌細(xì)胞增生明顯，影響AS病變的發(fā)展過(guò)程。HUANG Y S等[12]研究發(fā)現(xiàn)，AS患者的雌激素受體啟動(dòng)子區(qū)發(fā)生甲基化為水平70.4%，而正常對(duì)照組僅為28.6%。可以證實(shí)的是，異常的DNA甲基化水平參與血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，進(jìn)而影響動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成。

1.2.2 DNA甲基化參與脂質(zhì)形成AS主要因膽固醇的長(zhǎng)期積累，血小板凝集，發(fā)生粥樣改變。有研究表明[13]，AS患者體內(nèi)白細(xì)胞中的三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A1基因啟動(dòng)子序列存在異常的高甲基化狀態(tài)，介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)膽固醇和磷脂流出并轉(zhuǎn)運(yùn)至載脂蛋白A-1（apolipoprotein-1），使血漿中高密度脂蛋白及膽固醇水平增高，證明了三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A1基因高甲基化參與脂質(zhì)代謝，從而與AS的形成具有密切關(guān)系。

1.2.3 DNA甲基化調(diào)控炎癥反應(yīng)AS是以巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，T細(xì)胞異常和血管內(nèi)皮功能受損為主要特點(diǎn)的多病因慢性炎癥反應(yīng)。AS可以導(dǎo)致血管的阻塞、心肌梗死、外周血管疾病、動(dòng)脈瘤和腦梗死等疾病[14]。AS的發(fā)生及發(fā)展與異常基因甲基化關(guān)系密切，而這些異常基因甲基化包括異常的高甲基化與低甲基化。基質(zhì)金屬蛋白酶9是一種重要的炎癥介質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)代謝酶，當(dāng)其發(fā)生異常高表達(dá)或者活性增強(qiáng)時(shí)，會(huì)影響AS病變進(jìn)展過(guò)程，甚至出現(xiàn)急性惡化。研究[15]表明，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病患者基質(zhì)金屬蛋白酶9基因啟動(dòng)子區(qū)域甲基化水平明顯低于正常對(duì)照組，該濃度也顯著升高，這提示基質(zhì)金屬蛋白酶9基因參與AS的形成機(jī)制。賈鐳等[16]研究發(fā)現(xiàn)，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）在抑制AS的形成和進(jìn)展中具有重要作用，隨著冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病變程度加劇，Treg水平也顯著降低。LI Z B等[17]研究表明，micro RNA-223基因低甲基化與腦梗死密切相關(guān)，在23例腦梗死患者中進(jìn)行microRNA-223基因啟動(dòng)子甲基化水平，結(jié)果顯示，與健康組比較，腦梗死患者microRNA-223基因啟動(dòng)子甲基化水平明顯降低。近期研究發(fā)現(xiàn)，micro RNA-223基因在AS等疾病中扮演重要角色。

1.2.4 DNA甲基化參與AS相關(guān)危險(xiǎn)因素 同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）是AS的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一，通過(guò)損害血管內(nèi)皮細(xì)胞、刺激平滑肌細(xì)胞增生、血脂異常及血管的氧化應(yīng)激反應(yīng)，對(duì)AS血管病變?cè)斐捎绊懀蔀樾难茱L(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)之一。研究證實(shí)，當(dāng)體內(nèi)缺少維生素B及葉酸時(shí)，血漿中的Hcy水平升高[18]。LI J J等[19]研究表明，高水平Hcy能降低AS患者體內(nèi)的總甲基化，參與炎癥介導(dǎo)引起的血管內(nèi)皮損傷。另外一項(xiàng)研究也證實(shí)了這一點(diǎn)，SHARMA P等[20]檢測(cè)137例冠心病患者和150名健康人外周血總DNA甲基化，發(fā)現(xiàn)冠心病患者總DNA甲基化水平明顯高于健康人，且與Hcy水平呈正相關(guān)。此外，吸煙是心血管疾病的重要危險(xiǎn)因素。ZHANG Y等[21]指出，吸煙與DNA甲基化密切相關(guān)，引起DNA甲基化的變化，使基因表達(dá)異常，參與疾病的發(fā)生，增加心血管疾病的全因死亡率。

2 DNA甲基化的“微觀”表象是中醫(yī)學(xué)研究的切入點(diǎn)

近年來(lái)，關(guān)于DNA甲基化的研究思路被逐漸應(yīng)用于中醫(yī)藥研究中，表觀遺傳學(xué)的“微觀”研究已成為中醫(yī)學(xué)研究的切入點(diǎn)，包括用于從微觀角度解釋中醫(yī)證候、中醫(yī)經(jīng)典理論、中藥的作用機(jī)制等方面。

2.1 “天人相應(yīng)”與DNA甲基化 用現(xiàn)代科學(xué)語(yǔ)言來(lái)闡釋中醫(yī)藥理論是非常困難的，這也是困擾現(xiàn)代中醫(yī)藥研究者的一大難題，隨著表觀遺傳學(xué)的發(fā)展及應(yīng)用，為中醫(yī)藥傳統(tǒng)理論提供了新的解讀。中醫(yī)學(xué)將人體與外部環(huán)境看成一個(gè)整體，即“天人相應(yīng)”，天人相應(yīng)與中醫(yī)學(xué)的整體觀密不可分。中醫(yī)注重整體辨證施治，主張“天人合一”，在《易經(jīng)》中[22]有“夫大人者，與天地合其德，與日月合其明，與四時(shí)合其序，與鬼神合其吉兇，先天而天弗違，后天而奉天時(shí)，天且弗違，而況于人乎”的論述，指出人不能與天道相違，要順應(yīng)自然。《三因極一病證方論》中提出“內(nèi)因、外因、不內(nèi)外因”致病學(xué)說(shuō)，均著力于人先天之質(zhì)與后天之邪產(chǎn)生疾病的關(guān)系。研究[23]發(fā)現(xiàn)，對(duì)雌性幼鼠進(jìn)行高糖牛奶飲食后，成年后可導(dǎo)致高胰島素血癥和肥胖，并且這些表現(xiàn)型可以遺傳給它的子代，但是通過(guò)相應(yīng)的飲食控制就可以再次改變，甚至可以在子代中得到預(yù)防，說(shuō)明表觀遺傳學(xué)是可逆的。表觀遺傳學(xué)強(qiáng)調(diào)遺傳因素和環(huán)境因素相互作用，與中醫(yī)學(xué)對(duì)人體內(nèi)外環(huán)境整合同一的重視，二者的理念漸趨一致，方法各異，可以互相借鑒，共同發(fā)展。這也是中醫(yī)的整體治療觀和單靶點(diǎn)療法在疑難雜病治療中比較，前者更具令人興奮的療效原因所在，也突出中醫(yī)學(xué)對(duì)疾病認(rèn)識(shí)的科學(xué)性。

DNA甲基化與地域密切相關(guān)。如《素問(wèn)·五常政大論篇》明確指出：“一州之氣，生化壽夭不同，其何故也?歧伯曰：高下之理，地勢(shì)使然，崇高則陰氣治之，污下則陽(yáng)氣治之。陽(yáng)勝者先天，陰勝者后天，此地理之常，生化之道也。……高者其氣壽，下者其氣夭，地之小大異也，小者小異，大者大異。”不同區(qū)域內(nèi)的氣候條件、地理環(huán)境、起居飲食習(xí)慣等因素對(duì)于生活在該區(qū)域內(nèi)的人和生物有著不同的影響，使該區(qū)域內(nèi)所有的人具有某些共同的體質(zhì)特點(diǎn)，這些體質(zhì)特點(diǎn)又進(jìn)一步?jīng)Q定了該區(qū)域內(nèi)群體的病理變化傾向。這些體質(zhì)特點(diǎn)、病變規(guī)律和治療方法就是這種群體特征與天相應(yīng)的反映所在。通過(guò)研究[24]發(fā)現(xiàn)，對(duì)60例母親妊娠早期經(jīng)歷過(guò)荷蘭饑荒所生的孩子與兄弟姐妹比較，發(fā)現(xiàn)胰島素樣生長(zhǎng)因子2甲基化區(qū)域位點(diǎn)存在顯著差異。這也說(shuō)明了環(huán)境的變化可以造成基因甲基化修飾的變化，這也與中醫(yī)學(xué)因地制宜的觀點(diǎn)不謀而合。

2.2 “陰陽(yáng)自和”與DNA甲基化《素問(wèn)·上古天真論篇》記載：“上古有真人者，提挈天地，把握陰陽(yáng)，呼吸精氣，獨(dú)立守神，肌肉若一，故能壽敝天地，無(wú)有終時(shí)。”中醫(yī)藥治療主張調(diào)和陰陽(yáng)，治病所求的根本即在于“陰陽(yáng)”。陰陽(yáng)是是對(duì)自然界相互關(guān)聯(lián)的某些事物或者現(xiàn)象對(duì)立雙方屬性的概括，在構(gòu)建中醫(yī)學(xué)理論體系、形成中醫(yī)學(xué)思維模式中發(fā)揮了不可替代的作用。從微觀角度看，陰陽(yáng)失調(diào)的部分現(xiàn)代生物學(xué)基礎(chǔ)在于DNA甲基化的失控（包括異常的高甲基化與低甲基化），通過(guò)調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄及其表達(dá)水平，“損其有余，補(bǔ)其不足”，使之重新恢復(fù)平衡狀態(tài)，是謂《素問(wèn)·至真要大論篇》中“謹(jǐn)察陰陽(yáng)所在而調(diào)之，以平為期”。中醫(yī)陰陽(yáng)自和的理論為治療心血管疾病提供了新的思路，也將為中醫(yī)學(xué)“治病求本”的研究開(kāi)辟了新的方向。

《素問(wèn)·生氣通天論篇》云：“凡陰陽(yáng)之要，陽(yáng)密乃固。兩者不和，若春無(wú)秋，若冬無(wú)夏。因而和之，是謂圣度”“內(nèi)外調(diào)和，邪不能害”，陰陽(yáng)是相對(duì)的，可以相互轉(zhuǎn)化。陰陽(yáng)的相互轉(zhuǎn)化是事物發(fā)展的又一過(guò)程，在一定的條件下可以向其各自相反的方面轉(zhuǎn)化，即陽(yáng)可以轉(zhuǎn)化為陰，陰也可以轉(zhuǎn)化為陽(yáng)，“物極謂之變”就是這個(gè)道理。《黃帝內(nèi)經(jīng)》把重和極概括為是引起陰陽(yáng)轉(zhuǎn)化的“拐點(diǎn)”，醫(yī)生要準(zhǔn)確地認(rèn)識(shí)、把握和利用陰陽(yáng)轉(zhuǎn)化的“拐點(diǎn)”，從而有效地防止疾病惡化，或使已經(jīng)惡化的病情得到逆轉(zhuǎn)，這種陰陽(yáng)轉(zhuǎn)化規(guī)律是廣泛存在的。表觀遺傳方面的可逆性和轉(zhuǎn)化性，如組蛋白在組蛋白乙酰基轉(zhuǎn)移酶（HATs）作用下發(fā)生乙酰化，而在組蛋白去乙酰化酶（HDACs）作用下又可以出現(xiàn)去乙酰化，乙酰化是組蛋白的重要修飾方式，受HATs和HDACs的共同調(diào)控，這一特性與陰陽(yáng)轉(zhuǎn)化之間的關(guān)系具有異曲同工之妙。現(xiàn)代研究[25]發(fā)現(xiàn)，異常的高甲基化與低甲基化基因之間的共存模式是眾多疾病共同的病理基礎(chǔ)。這與中醫(yī)學(xué)對(duì)疾病陰陽(yáng)失調(diào)的總體認(rèn)識(shí)極為相似，我們有理由相信，中醫(yī)陰陽(yáng)的分子生物學(xué)基礎(chǔ)可能在于DNA高甲基化與低甲基化。因此，從中醫(yī)“陰陽(yáng)自和”的角度出發(fā)，調(diào)節(jié)疾病異常的高甲基化基因與異常的低甲基化基因，使其恢復(fù)正常，對(duì)于疾病的治療具有重大意義。

3 中醫(yī)藥對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化DNA甲基化的作用

3.1 中醫(yī)學(xué)對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化的認(rèn)識(shí) 中醫(yī)學(xué)雖無(wú)“動(dòng)脈粥樣硬化”的病名，但有關(guān)其證候和病因病機(jī)在歷代文獻(xiàn)中早有記載，多見(jiàn)于中醫(yī)學(xué)的“胸痹”“脈痹”“中風(fēng)”等范疇。“脈痹”始見(jiàn)于《黃帝內(nèi)經(jīng)》。《黃帝內(nèi)經(jīng)》云：“經(jīng)脈者，所以能決死生，處百病，調(diào)虛實(shí)，不可不通。”大多數(shù)學(xué)者均認(rèn)為本病為本虛標(biāo)實(shí)之證，本虛病位主要在肝、脾、腎三臟，其虛主要指氣虛、陰虛、陽(yáng)虛，標(biāo)實(shí)即痰濁、瘀血、熱邪、毒邪等。《金匱要略》記載：“心下有支飲，其人苦冒眩，澤瀉湯主之。”基于痰濁致病的證候特點(diǎn)，由于機(jī)體功能失調(diào)導(dǎo)致產(chǎn)生致病產(chǎn)物引發(fā)疾病的產(chǎn)生，而致病產(chǎn)物又可以反過(guò)來(lái)作為新的致病因素加速病情的發(fā)展與惡化，造成更大的危害。另外有研究[26]證實(shí)，痰濁與血脂具有一定的相似性，高脂血癥、動(dòng)脈硬化指數(shù)、痰濁證及血脂指標(biāo)互相之間存在密切的關(guān)聯(lián)性。痰濁的致病機(jī)理與氧化應(yīng)激過(guò)程類(lèi)似。《素問(wèn)·痹論篇》指出：“痹在于脈則血凝而不流”。另外，《醫(yī)學(xué)綱目》記載：“中風(fēng)皆因脈道不利，血?dú)忾]塞也。”均表明“血瘀致經(jīng)脈閉阻”也是動(dòng)脈粥樣硬化的生物學(xué)基礎(chǔ)，引起相關(guān)血流動(dòng)力學(xué)障礙是發(fā)生AS的直接因素。

隨著眾多中醫(yī)學(xué)者對(duì)本病病因病機(jī)更深入的探討，對(duì)其也產(chǎn)生了許多新的認(rèn)識(shí)，如認(rèn)為“伏邪”“脈濁”是AS硬化的另外病因，參與AS的形成和發(fā)展[27]。人體內(nèi)的邪氣未能及時(shí)清除，或邪氣潛伏于脈府，日益積聚增多，待時(shí)而發(fā)，待機(jī)而作，即謂之“伏邪”，正虛之時(shí)導(dǎo)致脈府損傷。血中之脂質(zhì)為水谷精微中厚濁且富有營(yíng)養(yǎng)的部分所化，適當(dāng)則為身體所之需，過(guò)多則為邪為害。濁邪留滯脈道，積聚日久為痰、為瘀、為熱、為毒。現(xiàn)代研究認(rèn)為AS的病因及發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，高血脂是主要因素，通過(guò)損傷血管內(nèi)皮、刺激平滑肌細(xì)胞增生、致血管壁細(xì)胞凋亡等多種機(jī)制相互作用下?lián)p傷動(dòng)脈血管，同時(shí)中醫(yī)學(xué)的“脈”與西醫(yī)的循環(huán)系統(tǒng)也存在高度相關(guān)性。

因此，將“伏邪”“脈濁”與AS聯(lián)系起來(lái)，使之既與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的認(rèn)識(shí)互通，又符合傳統(tǒng)中醫(yī)理論，使臨床實(shí)踐中的辨證與辨病能夠更好地結(jié)合起來(lái)，從而可以更好地利用中醫(yī)方法對(duì)AS干預(yù)，解決目前臨床問(wèn)題。

3.2 中藥調(diào)控DNA甲基化防治動(dòng)脈粥樣硬化 動(dòng)脈粥樣硬化是威脅人類(lèi)生命及健康的嚴(yán)重疾病之一，是許多疾病的“罪魁禍?zhǔn)住保虼碎_(kāi)展針對(duì)AS防治研究具有重要意義。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)在AS防治方面效果往往不理想，降脂藥物常伴有明顯的毒副作用，甚至導(dǎo)致肝腎功能異常。與西藥比較，中藥具有作用多靶點(diǎn)、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)。中藥通過(guò)調(diào)節(jié)血脂、抗氧化應(yīng)激、抗血小板聚集、抗血栓及抗平滑肌細(xì)胞增殖等途徑，干預(yù)AS發(fā)生和發(fā)展的各個(gè)環(huán)節(jié)，在AS防治中具有較好的效果。中藥是我國(guó)傳統(tǒng)文化發(fā)展的重要醫(yī)藥歷史寶庫(kù)，然而臨床上中藥用于治療AS具體機(jī)制還需要進(jìn)一步探索，這將對(duì)促進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化發(fā)展有著重要的意義。隨著對(duì)中藥有效成分抗AS研究的不斷深入，其機(jī)制的研究也日趨廣泛，已從整體組織器官水平，深入到細(xì)胞、分子、基因表達(dá)與調(diào)控水平，當(dāng)前越來(lái)越多的研究表明，中藥通過(guò)調(diào)控DNA甲基化修飾過(guò)程，從而治療疾病[28]。

3.2.1 中藥單體成分調(diào)控DNA甲基化對(duì)AS的影響DNA甲基化作為表觀遺傳學(xué)的關(guān)鍵部分，其可通過(guò)調(diào)節(jié)特異性基因的表達(dá)，進(jìn)而干預(yù)AS的發(fā)生發(fā)展。KUMAR U等[29]研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素通過(guò)影響DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3b（DNA methyltrans-ferase 3b，DNMT3b）的轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而調(diào)控乳腺癌細(xì)胞SK-BR-3的DNA甲基化水平，從而抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)，這充分表明姜黃素在癌細(xì)胞中具有很好的去甲基化作用。姜黃素是從姜科植物的根莖姜黃中提取的一種酚類(lèi)色素，是一種很好的DNA甲基化抑制劑，其具有多種生物學(xué)活性，如抗氧化、抗炎、抗凝、抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖、抗動(dòng)脈粥樣硬化，還具有明顯的抗腫瘤作用。同時(shí)，研究[30]發(fā)現(xiàn)姜黃素與DNMT1發(fā)生共價(jià)結(jié)合來(lái)抑制DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的表達(dá)，使18 SRRNA基因啟動(dòng)子發(fā)生甲基化，影響核糖體DNA轉(zhuǎn)錄，抑制血管平滑肌細(xì)胞的增生，起到穩(wěn)定AS斑塊的作用。另一研究[31]發(fā)現(xiàn)中藥成分梔子苷可以調(diào)控ox-LDL誘導(dǎo)的泡沫細(xì)胞異常基因甲基化，使得泡沫細(xì)胞的增殖受到抑制，影響多個(gè)與AS相關(guān)功能通路，同時(shí)起到降脂作用，進(jìn)而發(fā)揮出抗AS作用。總之，中藥單體成分可以通過(guò)對(duì)DNA甲基化的調(diào)控作用影響AS的發(fā)展。

3.2.2 中藥復(fù)方成分調(diào)控DNA甲基化對(duì)AS的影響 目前中藥復(fù)方是動(dòng)脈粥樣硬化DNA甲基化的主要研究方向。例如，趙偉峰等[32]發(fā)現(xiàn)在通過(guò)中藥作用DNA甲基化穩(wěn)定粥樣斑塊的基礎(chǔ)研究中，血府逐瘀膠囊（主要由桃仁、紅花、赤芍、川芎等組成）、四季三黃膠囊（由大黃、黃芩、黃柏、梔子組成）二者聯(lián)合作用可使得體內(nèi)甘油三酯的含量降低，同時(shí)提高AS小鼠模型的整體血清DNA甲基化水平和DNMTS水平，增加斑塊的穩(wěn)定性。此外，中藥復(fù)方對(duì)血管平滑肌細(xì)胞DNA甲基化也具有調(diào)控作用。如程修平等[33]研究發(fā)現(xiàn)穩(wěn)斑湯（主要由全蝎、蜈蚣、地龍、水蛭等組成）聯(lián)合西醫(yī)常規(guī)治療可顯著降低冠心病患者血漿血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）基因啟動(dòng)子甲基化水平，促進(jìn)TM基因表達(dá)，增強(qiáng)抗凝作用，保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞，穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化斑塊。因此，中藥復(fù)方的有效作用可能是通過(guò)調(diào)控DNA甲基化來(lái)抑制動(dòng)脈粥樣硬化。積極發(fā)揮中醫(yī)藥的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，從分子水平深入研究中醫(yī)藥調(diào)控DNA甲基化干預(yù)動(dòng)脈粥樣硬化的作用機(jī)制，將是可行的。

4 展望與挑戰(zhàn)

隨著表觀遺傳學(xué)檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步及分子生物學(xué)等領(lǐng)域的拓展研究，中藥與DNA甲基化調(diào)控機(jī)制的具體靶點(diǎn)和相關(guān)機(jī)制會(huì)進(jìn)一步得以證實(shí)。深入探索疾病的DNA甲基化模式，以期發(fā)現(xiàn)新的動(dòng)脈粥樣硬化分子治療靶點(diǎn)及中醫(yī)藥作用機(jī)制，有望成為未來(lái)治療策略發(fā)展的基礎(chǔ)。