高效液相色譜法同時測定飲料中幾種甜味劑的研究分析

蘇進姬

廣東省陽春市食品藥品檢驗檢測站 廣東陽春 529600

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

試劑：糖精鈉、甜蜜素、安賽蜜、乙腈、硫酸銨。

儀器：HP1100高效液相色譜儀、超聲波振蕩器、超聲波振蕩器、離心機、電子天平、固相萃取柱。

1.2 色譜條件

色譜柱：ODS-C18；流動相：20mmol/L硫酸銨-乙腈；流速/mL/min：0.8；柱溫/℃：30；檢測波長/nm：200、226；進樣量/μL：20。

1.3 樣品前處理

（1）介質為液體的樣品。如碳酸飲料，分別稱取10g（±0.001g），放在25毫升的玻璃器皿中，使用超純水進行定容至25毫升，搖勻，使用0.45μm的濾膜進行過濾，放置等待測定。

（2）介質為固體的樣品。把樣品分別粉碎，各稱取2g（±0.001g），放置在25毫升的玻璃器皿中，加水，并持續20分鐘的超聲震蕩后加入超純水進行定容至25毫升，然后取上層的清液，放置等待測定。

（3）含乳飲料和植物蛋白飲料。分別取樣品6 g（±0.001g），放置在25毫升的玻璃器皿中，按照順序加入2毫升的0.08mol/LK4[Fe（CN）6]溶液和2毫升的0.25mol/LZn（CH3COO）2溶液，并持續2分鐘的震蕩后，沉淀蛋白質，加入超純水進行定容至25毫升，然后取上層的清液，放置等待測定[1]。

1.4 試樣的凈化

分別取3毫升上層清清液，使用固相萃取柱進行萃取，然后再按照順序使用3毫升20mmol/L的（NH④2SO4和3毫升的乙腈進行洗脫，再把洗脫的溶液分別取10毫升放置在容量瓶中，使用超純水進行定容至25毫升，并混合均勻，使用0.45μm濾膜進行過濾，放置等待測定[2]。

1.5 測定

分別取20μL的混合標準溶液和處理液放入高效液相色譜分析儀中進行分離，以保留時間定性，峰面積進行外標法定量。

1.6 計算公式

按照以下公式進行計算。

公式中：

X——糖精鈉、甜蜜素、安賽蜜含量/（mg/kg）或/（mg/L）；

A2——樣品峰面積；

A1——標液峰面積；

K——稀釋倍數；

C——標液質量濃度/（μg/mL）；

M——樣品質量/g；

V——樣品洗脫液濃縮定容體積/mL。

2 結果與分析

2.1 檢測波長的選擇

在本文中使用的是二極管陣列檢測器，在190-400nm的范圍中對所需要分析的物質進行有效的光譜掃描，經過掃描可以看出，文中的3種甜味劑最大的吸收波長如表1所示。其中除了安賽蜜是按照按226nm波長進行測定，其余的都是按照200nm波長進行測定，在此色譜條件下，3種甜味劑的標準物質色譜圖見圖1。

表1 3 種甜味劑最大的吸收波長

圖1 標準混合溶液的色譜圖

2.2 線性范圍、精密度和檢出限

在檢驗線性關系、相關系數、檢出限和相對標準偏差，見表2。根據相關的結果可以看出，分析物在0.4-120mg/L范圍之內都有著比較好的線性關系，能夠充分地滿足于定量分析的需求[3]。

2.3 實際樣品中甜味劑含量及加標回收率的測定

在如表5種測定結果的基礎上，加入一定的標準品進行加標回收試驗，每種樣品都需要進行三次的平行測定，最終的測定結果如表所示。

表2 線性關系與檢出限

表3 實際樣品的測定結果（n=3）

表4 實際樣品的加標回收率結果

相對標準偏差 安賽蜜 0.71% 2.69% 1.99% 1.5% 1.46%糖精鈉 0.86% 3.02% 2.32% 3.12% 2.12%甜蜜素 1.41% 1.15% 1.57% 1.97% 0.92%

3 結語

總而言之，通過本文對3種飲料中甜味劑進行高效液相色譜法的實驗分析中可以看出，糖精鈉、甜蜜素、安賽蜜在4.0-20.0mg/kg的范圍之內，且在加標回收率方面為百分之88到107，相對標準偏差＜百分之3.12，此種方法簡單、容易操作，且具有比較好的凈化效果，能夠使用在飲料中多種調味劑同時檢測的方法，且還可以有效消除對飲料中單一甜味劑檢測過程中而出現其他甜味劑漏檢的狀況。