Xpert MTB/RIF 檢測技術用于肺結核病診斷的價值研究

高 波

（景泰縣人民醫院，甘肅 景泰 730400）

肺結核為傳染性疾病，患病群體數量日漸增多，危害性嚴重，而有效的抗結核治療依賴于診斷結果[1]。目前國內結核病實驗室診斷方法較多，包括涂片鏡檢法、固體培養法、比例法藥敏試驗等，以上方法在肺結核病診斷方面因敏感度低、耗時較長等限制，漏診、誤診情況頻頻發生[2]。分子生物學診斷技術不斷進步，逐漸發展出Xpert MTB/RIF 檢測技術，其在結核病、利福平耐藥檢測方面應用較廣，具有快速檢測、靈敏度高、特異度高等多重優勢[3]。因此，本研究將Xpert MTB/RIF 檢測技術用于肺結核病診斷過程，診斷結果報告如下。

1 臨床資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2019 年1 月～2020 年2 月期間于景泰縣人民醫院就診的疑似肺結核病患者178 例作為本次研究對象，男130 例，女48 例，年齡20～69 歲，平均年齡（51.38±8.96）歲。

1.2 方法

標本采集：收集178 例患者痰標本（清晨痰），及時送檢，標本采集時178 例患者均未開始抗結核治療。

涂片鏡檢法：參照《痰涂片鏡檢標準化操作及質量保證手冊》實施檢測。

固體培養法：參照《分枝桿菌分離培養標準化操作程序及質量保證手冊》實施檢測。

比例法藥敏試驗：參照《結核分枝桿菌藥物敏感性試驗標準化操作程序及質量保證手冊》實施檢測。

Xpert MTB/RIF 檢測技術：主要借助全自動Gene Xpert 儀器與配套試劑盒檢測。

以上檢測結果提示“無效”“錯誤”“無結果”等情況下，需再次留取標本實施檢測。

1.3 觀察指標

（1）不同檢測方法陽性檢出情況比較。統計涂片鏡檢法、固體培養法、Xpert MTB/RIF 檢測技術對痰標本的陽性檢出情況。

（2）不同檢測方法檢測結核分枝桿菌結果（以固體培養結果為金標準）。

（3）Xpert MTB/RIF 檢測技術檢測利福平耐藥性情況（以比例法藥敏試驗結果為金標準）。

1.4 統計學處理

數據分析使用SPSS23.0，計數資料用n（%）表示，組間比較行χ2檢驗。檢驗水準α=0.05，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同檢測方法陽性檢出情況比較

178 份痰標本均采用不同檢測方法實施檢測，涂片鏡檢法：陽性痰標本共48 份，陽性率26.97%；固體培養法：陽性痰標本共72 份，陽性率40.45%；Xpert MTB/RIF 檢測技術：陽性痰標本共98 份，陽性率55.06%。固體培養法痰標本陽性檢出率高于涂片鏡檢法（χ2=7.241，P=0.007）；Xpert MTB/RIF 檢測技術痰標本陽性檢出率高于涂片鏡檢法（χ2=29.028，P=0.000）；Xpert MTB/RIF 檢測技術痰標本陽性檢出率高于固體培養法（χ2=7.611，P=0.006）。

2.2 不同檢測方法檢測結核分枝桿菌結果（以固體培養結果為金標準）

以固體培養結果為金標準，Xpert MTB/RIF 檢測技術檢測的靈敏度94.44%（68/72）明顯高于涂片鏡檢55.56%（40/72），比較差異有統計學意義（χ2=29.037，P=0.000）；Xpert MTB/RIF 檢測技術與固體培養結果的一致性顯著高于涂片鏡檢法（Kappa=0.625vs 0.507，P＜0.05）。見表1。

表1 不同檢測方法檢測結核分枝桿菌結果（以固體培養結果為金標準）

2.3 Xpert MTB/RIF 檢測技術檢測利福平耐藥性情況（以比例法藥敏試驗結果為金標準）

固體培養結果顯示陽性菌株共72 份，行菌種初步鑒定，鑒定結果提示非結核分枝桿菌共4 份，結核分枝桿菌共68 份。采用Xpert MTB/RIF 檢測技術與比例法藥敏試驗對以上68 份進行利福平耐藥性檢測，結果提示，Xpert MTB/RIF 檢測技術檢測利福平耐藥率20.59%（14/68）與比例法藥敏試驗耐藥率22.06%（15/68）比較，差異無統計學意義（χ2=29.037，P=0.000）；Xpert MTB/RIF 檢測技術與比例法藥敏試驗符合率98.53%（67/68）。見表2。

表2 Xpert MTB/RIF 檢測技術檢測利福平耐藥性情況（以比例法藥敏試驗結果為金標準）

3 討論

Xpert MTB/RIF 檢測技術是半巢式實時熒光定量PCR 技術優化所得，靶基因為rpoB 基因，能依賴于自動化系統完成脫氧核糖核酸提取、rpoB 基因擴增、目標序列（位于rpoB 基因上的192bp 片段）檢測。另外，根據分子信標、探針等，同樣能輔助肺結核病診斷、利福平耐藥情況等[4]。研究表明，利福平耐藥情況與rpoB 基因存在關聯，若存在利福平耐藥情況，則rpoB 基因會發生相應突變[5-6]。

本研究結果顯示：①178 份痰標本均采用不同檢測方法實施檢測，涂片鏡檢法：陽性痰標本共48份，陽性率26.97%；固體培養法：陽性痰標本共72份，陽性率40.45%；Xpert MTB/RIF 檢測技術：陽性痰標本共98 份，陽性率55.06%。固體培養法痰標本陽性檢出率高于涂片鏡檢法；Xpert MTB/RIF 檢測技術痰標本陽性檢出率高于涂片鏡檢法；Xpert MTB/RIF 檢測技術痰標本陽性檢出率高于固體培養法。可見，Xpert MTB/RIF 檢測技術在提高痰標本陽性檢出率方面優勢突出，其應用價值明顯優于涂片鏡檢法、固體培養法。原因可能是，Xpert MTB/RIF檢測技術其是半巢式實時熒光定量PCR 技術優化所得，集脫氧核糖核酸提取、PCR 擴增、目標序列檢測等多個步驟于一體，具有檢測快、污染幾率低、靈敏度高等多重優勢。②以固體培養結果為金標準，Xpert MTB/RIF 檢測技術檢測的靈敏度94.44%（68/72）明顯高于涂片鏡檢55.56%（40/72），比較差異有統計學意義；Xpert MTB/RIF 檢測技術檢測的Kappa 值明顯優于涂片鏡檢。提示，與涂片鏡檢法相較，XpertMTB/RIF 檢測技術在肺結核病原學診斷方面能提供更有力的證據。③XpertMTB/RIF 檢測技術檢測利福平耐藥率20.59%（14/68）與比例法藥敏試驗耐藥率22.06%（15/68）比較，差異無統計學意義（χ2=29.037，P=0.000）；Xpert MTB/RIF 檢測技術與比例法藥敏試驗符合率98.53%（67/68），此結果進一步證實了Xpert MTB/RIF 檢測技術對利福平耐藥性情況的高診斷價值，其與金標準符合率較高。與劉揚等[7]研究結果相似。

綜上所述，Xpert MTB/RIF 檢測技術在肺結核病診斷、利福平耐藥性情況等方面均有著較高的可行性、可靠性。