血清Obestatin、nesfatin-1水平與腦卒中合并糖尿病患者認知功能的相關性分析*

張素娥，何金花，李 娜，高麗娟，馬紅敏，鄭 韜

石家莊市第二醫院：1.神經內二科；2.內分泌科，河北石家莊 050051；3.河北省人民醫院肝膽外科，河北石家莊 050051；4.石家莊辛集鑫苑中西醫結合醫院內科，河北石家莊 050051

腦卒中是臨床上較常見的一種腦血管疾病，該病多發生于中老年人群，且已成為造成該人群死亡的首要原因，嚴重威脅患者的生活質量[1-2]。有研究顯示，糖尿病是腦卒中的危險因素之一[3]。腦卒中合并糖尿病可造成患者水腫加重、梗死灶擴大，極大地增加了治療的難度，且患者雖進行有效治療，但預后不佳[4]。肥胖抑制素(Obestatin)是近年來在血液循環中發現的一種活性多肽，研究發現Obestatin具有降低胰島素抵抗、刺激胰島素分泌等多重生物學作用[5]。攝食抑制因子1(nesfatin-1)是一種多效能細胞因子，在調節能量代謝、糖脂代謝、減輕體質量等方面發揮重要作用[6]。然而，目前血清Obestatin和nesfatin-1的表達水平與腦卒中合并糖尿病的發病機制及其與患者認知功能的關系尚不完全清楚。基于此，本研究擬通過檢測腦卒中合并糖尿病患者血清Obestatin和nesfatin-1的表達情況，探討其水平與腦卒中合并糖尿病患者認知功能的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年11月至2020年5月在石家莊市第二醫院確診的腦卒中患者100例為研究對象，并根據是否合并糖尿病分為糖尿病組和非糖尿病組。糖尿病組43例，其中男25例、女18例，年齡35～65歲。非糖尿病組57例，其中男35例、女22例，年齡36～67歲。糖尿病組和非糖尿病組的性別構成、平均年齡、體質量指數(BMI)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平、高脂血癥和高血壓患者比例之間比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；糖尿病組總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平顯著高于非糖尿病組(P<0.05)。見表1。

糖尿病組患者納入標準：(1)確診為腦卒中，并符合《中國2型糖尿病防治指南(2017年版)》中的相關診斷標準[7]；(2)患者及家屬選擇在本院接受治療；(3)臨床資料齊全者。非糖尿病組患者納入標準：(1)符合《中國各類主要腦血管病診斷要點2019》中有關腦卒中的相關診斷標準[8]；(2)患者及家屬選擇在本院接受治療者；(3)臨床資料齊全者。排除標準：(1)同時患有心、腎等臟器功能不全者；(2)同時患有嚴重內分泌疾病者；(3)同時患有其他系統性疾病者。本研究經本院倫理委員會批準通過，所有標本采集均取得患者及家屬知情并簽署同意書。

1.2試劑與儀器 Obestatin和nesfatin-1酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒均購自上海通蔚生物科技有限公司(批號YB-K2807、YB-K2705)；TGL20M型離心機購自湖南凱達科學儀器設備有限公司；7180型全自動生化分析儀購自日本日立公司；本研究中其他化學藥品均購自北京甘棠飛華生物科技有限公司。

1.3方法

1.3.1標本采集及保存 于清晨抽取所有受試者空腹狀況下的靜脈血5 mL，3 000 r/min(4 ℃)離心10 min分層后收集上層血清，置于-80 ℃冰箱中保存待測。

1.3.2血清Obestatin、nesfatin-1水平的檢測 采用ELISA法檢測各組研究對象血清Obestatin、nesfatin-1水平。嚴格按照各試劑盒使用說明書進行測定，其具體操作步驟如下：將已配制好的100 μL標準樣品分別加入標準孔和空白孔中，37 ℃溫育30 min后洗滌。然后將酶標板內液體棄去，拍干后向其中加入酶標試劑，在37 ℃溫育30 min，洗滌后加入顯色劑并混合均勻，使其進行顯色。最后加入終止液，并測定其吸光度。

1.3.3生化指標檢測 取出待測血清，在實驗室用全自動生化分析儀測定TC、TG、HDL-C、LDL-C。

表1 兩組一般資料的比較

組別nTC(mmol/L,x±s)TG(mmol/L,x±s)LDL-C(mmol/L,x±s)HDL-C(mmol/L,x±s)糖尿病組435.23±1.153.67±1.543.02±0.561.28±0.25非糖尿病組574.51±0.802.35±1.292.81±0.511.36±0.18t/χ23.6914.6591.9541.861P<0.001<0.0010.0540.066

1.4認知功能評定 采用蒙特利爾認知評估量表(MoCA)對受試者進行評價[9]。所有研究對象入院后由經過專業培訓的神經內科醫師對其進行問卷調查，該量表主要包括命名、視空間及執行能力、注意力、記憶、定向力、抽象、語言、延遲回憶8個維度，總分為30分，<26分為認知功能障礙，≥26分為正常，分數越高表示患者認知功能越好。

2 結 果

2.1各組血清Obestatin、nesfatin-1水平比較 糖尿病組血清Obestatin水平顯著低于非糖尿病組(P<0.05)；血清nesfatin-1水平顯著高于非糖尿病組(P<0.05)；MoCA評分顯著低于非糖尿病組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組血清Obestatin、nesfatin-1水平的比較

2.2不同血清Obestatin、nesfatin-1水平患者認知功能的比較 分別以血清Obestatin、nesfatin-1的平均值(30.83 ng/L、6.89 mg/mL)將腦卒中合并糖尿病患者分組，其中高Obestatin組19例，低Obestatin組24例；高nesfatin-1組23例，低nesfatin-1組 20例。高Obestatin組患者MoCA評分顯著高于低Obestatin組(P<0.05)；高nesfatin-1組患者MoCA評分顯著低于低nesfatin-1組(P<0.05)。見表3。

表3 各組患者認知功能的比較(分，

2.3血清Obestatin、nesfatin-1與MoCA評分的相關性 Spearman相關分析結果顯示，腦卒中合并糖尿病患者血清Obestatin水平與MoCA評分呈正相關，nesfatin-1水平與MoCA評分呈負相關(r=0.599，r=-0.358，P<0.05)。

2.4腦卒中合并糖尿病患者發生認知功能障礙的影響因素分析 以腦卒中合并糖尿病患者是否發生認知功能障礙為因變量(0=否，1=是)，血清Obestatin、nesfatin-1及TC、TG水平為自變量，采用多因素Logistic回歸進行分析，結果顯示，血清Obestatin低表達、nesfatin-1高表達均是影響腦卒中合并糖尿病患者發生認知功能障礙的獨立危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 腦卒中合并糖尿病患者發生認知功能障礙的危險因素分析

3 討 論

腦卒中是由腦血管病變或大腦內血液循環出現障礙所致的一種慢性疾病，糖尿病是腦卒中發病的重要影響因素，研究顯示，糖尿病患者腦卒中發病率是非糖尿病患者的2～5倍[10]。腦卒中合并糖尿病的主要臨床表現為偏癱、癡呆等，且患者認知功能障礙發生率較高，若未得到及時有效的治療，對患者的康復造成極大影響[11-12]。流行病學研究顯示，隨著中國人口老齡化速度的加快，近年來腦卒中合并糖尿病的發病率呈逐年升高趨勢，嚴重影響患者的生命健康安全[13]。因此，尋找新的疾病標志物并研究其對患者認知功能的影響具有重要的臨床意義。

Obestatin是一種由23個氨基酸組成的多肽，該物質主要是由Ghrelin基因經翻譯及修飾后產生[13]。相關研究顯示，Obestatin的功能廣泛，在全身各個系統中均可發揮作用，具有促進脂肪細胞分化、抑制食物攝取、抗炎等作用，并對神經系統、心血管系統具有重要影響[14]。有研究顯示，Obestatin與多種疾病的發生、發展有關。王鍵等[15]研究發現，Obestatin在老年糖尿病胃輕癱患者血清中表達水平升高，且與胃排空的時間密切相關，其表達水平可作為評估老年糖尿病胃輕癱患者病情嚴重程度的臨床指標。TOOSI等[16]研究發現，使用Obestatin可改善因酒精引起的后代空間記憶障礙，調節神經炎性反應，增加谷胱甘肽和總超氧化物歧化酶活性，保護神經功能等作用。本研究結果顯示，糖尿病組血清Obestatin水平顯著低于非糖尿病組(P<0.05)，提示血清Obestatin可能參與腦卒中合并糖尿病的發展進程。

nesfatin-1是一種分泌性多肽，主要來源于核組蛋白2，該物質廣泛存在于腦干、下丘腦及脊髓的神經核團中，在能量代謝及攝食等方面具有重要作用[17-18]。有研究顯示，nesfatin-1與多種疾病的發生及發展有關。徐海波等[19]研究發現，nesfatin-1在新診斷的2型糖尿病患者血清中表達水平升高，并可通過胰島素信號通路影響糖脂代謝，進而參與該疾病的病理過程。石杰等[20]研究發現，腦卒中患者血漿nesfatin-1水平及神經功能缺損程度與其抑郁程度密切相關。本研究結果顯示，糖尿病組血清nesfatin-1水平顯著高于非糖尿病組(P<0.05)，提示血清nesfatin-1可能參與腦卒中合并糖尿病的發展進程。進一步分析顯示，糖尿病組MoCA評分顯著低于非糖尿病組(P<0.05)，且腦卒中合并糖尿病患者血清Obestatin水平與MoCA評分呈正相關(P<0.05)，nesfatin-1水平與MoCA評分呈負相關(P<0.05)。糖尿病患者機體內各生化指標常伴有異常，且其水平變化與患者病情有關。因此檢測腦卒中合并糖尿病患者LDL-C、HDL-C、TC、TG水平具有重要意義。本研究結果顯示，糖尿病組TC、TG水平顯著高于非糖尿病組(P<0.05)，提示TC、TG水平異常與腦卒中合并糖尿病有關。本研究還發現，高Obestatin組患者MoCA評分顯著高于低Obestatin組(P<0.05)，高nesfatin-1組患者MoCA評分顯著低于低nesfatin-1組(P<0.05)，提示血清Obestatin、nesfatin-1水平與腦卒中合并糖尿病患者認知功能密切相關。上述分析顯示，Obestatin、nesfatin-1及TC、TG水平與腦卒中合并糖尿病密切相關，多因素Logistic回歸分析結果顯示，血清Obestatin低表達、nesfatin-1高表達均是影響腦卒中合并糖尿病患者發生認知功能障礙的獨立危險因素，提示監測兩者表達水平，對評估腦卒中合并糖尿病患者認知功能有一定的臨床價值。

綜上所述，Obestatin水平在腦卒中合并糖尿病患者中明顯降低，nesfatin-1水平明顯升高，兩者參與腦卒中合并糖尿病的發生及發展，且其表達情況與患者認知功能密切相關，提示血清Obestatin和nesfatin-1可用于腦卒中合并糖尿病患者病情的評估，但其具體的作用機制還有待深入研究。