初診2 型糖尿病患者血清PAI- 1、NO、3- NT 與FMD 的相關性研究

唐芳，蔣鐵建

1.深圳市第三人民醫院內分泌科，廣東深圳 518000；2.中南大學湘雅醫院內分泌科，湖南長沙 410008

血管內皮功能障礙是一種全身性的病理狀態，亦是一種臨床綜合征，是血管疾病發生的始動環節和早期標記物[1]，其發病的病理生理機制與血管內皮細胞受損、血小板的激活、纖溶異常和凝血異常有密切關系[2]。 大量研究表明[3]采用超聲檢測肱動脈血流介導的內皮依賴性血管舒張功能 （FMD） 可在早期發現內皮功能障礙，是較為理想的評價血管內皮的方法。 由于糖尿病多種并發病的病變基礎主要在于糖尿病微血管病變且內皮功能障礙與糖尿病微血管病變密切相關[4]，而內皮功能障礙主要表現為內皮依耐性舒張功能障礙。PAI-1 作為一種血栓前狀態分子標記物可促進血栓形成，3-NT可直接損傷血管內皮，而NO 可舒張血管，改善內皮功能，但對3 者的之間的相關性缺較少報道。 故該研究擬通過選取2012 年7 月—2013 年3 月收治的初診T2DM 患者144 例， 探討初診2 型糖尿病患者血清PAI-1、NO 和3-NT 水平及其與FMD 之間的關系及相關性， 以期進一步明確早期糖尿病階段血管內皮功能紊亂狀態及其影響因素， 為臨床早期保護血管內皮功能從而延緩糖尿病慢性并發癥的發生發展提供臨床參考依據。 現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

收集該院內分泌科收治的初診T2DM 患者144例，設為觀察組，其中，男性84 例，女性60 例；年齡42~61 歲，平均年齡（50.72±9.54）歲。同期健康72 名為對照組，該研究經該院倫理委員審批通過。 納入標準：①患者首次確診為T2DM，并在該院接受檢查與治療；②患者對該研究知情同意。 排除標準：①出現糖尿病急慢性并發癥；②合并有嚴重心、肝、腎功能不全。

選取同期該院體檢科收集的72 名健康體檢者，設為對照組。 其中，男性42 例，女性30 例；年齡40~59歲，平均年齡（48.57±8.61）歲。 組內成員均無血糖異常、無糖尿病家族史。

兩組對象在性別、年齡、基礎疾病方面差異無統計學意義（P＞0.05）。 具有可比性。

1.2 研究方法

一般資料的測定： 測量所有研究對象的體重、身高、血壓，計算體重指數（BMI）和平均動脈壓（MAP）。

生化指標的測定：所有研究對象均清晨采集空腹靜脈血，檢測空腹血糖（FPG）、血脂、糖化血紅蛋白（HbA1c，采用離子交換高壓液相色譜分析法）、胰島β 細胞功能指數（HOMA-β）、胰島素抵抗指數（HOMA-IR）。留血樣待測PAI-1、NO、3-NT（ELISA 法， 1 h 內，3 600 r/min，離心10 min， 提取血清置-70℃冰箱保存統一待測，試劑盒由上海聯碩公司提供）。

FMD 的測定[5]：采用高分辨率超聲儀（Sonoline adara B 型超聲儀）和10 MHz 線陣探頭，同時監測心電圖。 檢測前，受試者先休息15 min。 將10 MHz 探頭置于肘上2～3 cm 處，固定測量部位，探測深度4 cm，以心電圖R波為準，測量其舒張末期內徑，測量3 個心動周期后取其平均值，記為D0，標記檢測部位。 之后套入充氣止血帶，在肘關節以下加壓300 mmHg，保持4 min 后迅速放氣，放氣后2 min 內，在標記的檢測部位按前述方法再次測定肱動脈內徑，記為D1。計算肱動脈反應性充血增長百分率[FMD=（D1-D0）/D0×100%]。

1.3 統計方法

應用SPSS 18.0 統計學軟件進行統計分析。 計量資料采用（±s）表示，組間比較采用獨立樣本t 檢驗，兩因素相關分析采用直線相關， 多因素相關采用多元逐步回歸分析。 P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象一般資料、生化資料情況

兩組研究對象在年齡、性別、BMI 方面差異無統計學意義 (P＞0.05)。 觀察組MAP、TC、TG、FPG、HbA1c、HOMA-IR 高于對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)；觀察組HOMA-β 低于對照組， 差異有統計學意義 (P＜0.05)。 見表1。

表1 兩組研究對象一般資料、生化資料比較

2.2 兩組對象血清PAI-1、NO、3-NT 和FMD 情況

與對照組比較，觀察組PAI-1、3-NT 明顯增高，NO、FMD 明顯降低，差異有統計學意義(P＜0.05)。 見表2。

表2 兩組對象血清PAI-1、NO、3-NT 和FMD 比較(±s)

表2 兩組對象血清PAI-1、NO、3-NT 和FMD 比較(±s)

項目 觀察組（n=144） 對照組（n=72） t 值 P 值FMD（%）3-NT（nmol/L）PAI-1（ng/mL）NO（μmol/L）6.6±1.7 167.93±29.29 2.30±0.28 150.88±31.42 8.6±1.9 134.34±29.63 1.96±0.36 179.40±14.20 7.834 7.915 7.627 7.330＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05

2.3 觀察組相關觀察指標與FMD 的相關性分析

相關分析顯示，觀察組血清PAI-1、3-NT 與FMD呈負相關；而NO 與FMD 呈正相關。 見表3。

表3 相關觀察指標與FMD 的相關性分析

2.4 觀察組相關觀察指標與FMD 的多元逐步回歸分析

以FMD 為因變量，以與對照組對比有差異的主要指標為自變量，進行多元線性回歸分析，由標準化回歸系數可知， 在影響FMD 的因素中， 主要因素依次是NO、PAI-1、MAP、HbA1c、3-NT、HOMA-IR、TG，其中決定系數為0.823。 進行多元線性逐步回歸分析得方程（按P ≤0.05 進 方 程，P ≥0.1 出 方 程）FMD=19.278+0.034NO -3.072PAI-1-0.053MAP，決定系數R2=0.626，提示NO 是血管內皮功能的保護因素， 而PAI-1、MAP是血管內皮功能的危險因素。

3 討論

內皮功能障礙時，舒縮血管活性物質不平衡，常表現為內皮細胞損傷性物質增多， 是血管受損的早期指標和動脈粥樣硬化的始動環節及心血管事件的預測指標[6]。 如NO 的下降可導致內皮依賴性的血管舒張功能減低，影響血管壁的代謝與功能，而活性氧的過度產生則是導致內皮功能障礙的重要因素之一[7]。 NO 是血管內皮細胞在一氧化氮合酶的作用下產生的， 可通過作用于胞質上鳥苷酸環化酶 （GC）， 激活cGMP-PKG 途徑，促使機體發生一系列生物學改變，主要是促使血管擴張，其他還有抗炎、抗血栓形成等[8]。 PAI-1 是纖溶系統的重要調節因子，其主要來自脂肪組織、血管內皮細胞以及肝臟組織[9]，其水平的升高是內皮細胞損傷或激活的重要標志。 PAI-1 作為一種血栓前狀態分子標記物， 可與組織型纖溶酶原激活物和尿激酶型纖溶酶原激活物結合，形成無活性的穩定物質，減慢纖維蛋白降解，促進血栓形成[10]。有研究指出[11]，糖尿病患者的PAI-1 水平顯著高于健康人群， 且合并動脈粥樣硬化時，PAI-1 水平升高更為顯著，這也是導致糖尿病患者心血管疾病高發的原因之一。 另有研究表明[12]，PAI-1 水平與血管粘附分子表達水平呈正相關， 其還可加速高血糖導致的內皮功能損傷以及動脈硬化等。 3-NT 是一種可直接損傷血管內皮的活性物質， 來源于酪氨酸的硝基化反應[13]， 也是糖尿病相關血管病變的危險因素之一。 FMD 測量時，對患者的前臂進行加壓，進而刺激血管內膜反生反應，釋放出可引起血管舒張的NO，通過高分辨率彩超測量肱動脈血管內徑的改變來評價血管內皮舒縮功能，進而實現血管疾病的早發現、早治療。

該研究發現，與對照組相比，觀察組PAI-1、3-NT水平明顯升高，FMD、NO 水平明顯下降，提示糖尿病早期便已存在明顯纖溶異常、氧化應激及內皮功能紊亂。相關分析及多元逐步回歸分析顯示， 觀察組FMD 與PAI-1、3-NT 呈負相關， 提示內皮功能障礙與PAI-1、3-NT 表達水平的升高有關，即與纖溶異常和氧化硝基化水平相關。 同時，隨著年齡的增長，糖尿病心血管疾病發生率迅速上升， 肥胖和高血壓亦是糖尿病發生心腦血管并發癥的重要危險因素。 該文結果也顯示，FMD與年齡、BMI、MAP 呈負相關，與NO 呈正相關，故在臨床工作中， 防治糖尿病血管并發癥的發生發展除早期積極控制血糖外，還要積極有效控制體重、血壓，減輕氧化硝基化水平，改善纖溶異常狀況。

綜上所述，初診T2DM 患者存在明顯的纖溶異常、氧化硝化反應和血管內皮依賴性血管舒張功能障礙，在糖尿病早期治療中關注改善纖溶異常和減輕氧化硝化反應在一定程度上可保護血管內皮功能， 延緩糖尿病血管并發癥的發生發展。