兩種敵敵畏乳油對家蠶的毒性和殘毒期比較＊

陳偉國，戎鳳鳴，趙明珠，楊一平，戴建忠，錢秋杰

（1.海寧市經濟作物技術服務站，浙江 海寧 314400； 2.浙江雅云生態農業有限公司，浙江 海寧 314407）

敵敵畏（Dichlorvos）是一種高效、廣譜有機磷殺蟲劑，具有熏蒸、觸殺、胃毒作用，對害蟲的擊倒力強，速效性好。施藥后易分解，殘毒期短，特別適合對農殘要求嚴格的作物害蟲的防治。高純度敵敵畏更被廣泛用于桑葉害蟲的防治［1］。在NY/T 1027-2006《桑園用藥技術規程》中，77.5%敵敵畏乳油用于防治鱗翅目、鞘翅目、半翅目、雙翅目、纓翅目、同翅目等多種桑樹害蟲，推薦濃度為1000倍稀釋液［2］。

敵敵畏常規劑型是以苯類為溶劑的乳油，為降低成本、減輕溶劑對環境的污染，近年來研發高含量、新劑型敵敵畏產品逐漸受到重視［1，3］，賓榮佩等［4］報道了90%敵敵畏可溶液劑應用于桑樹害蟲的防治效果。目前，江蘇省南通江山農藥化工股份有限公司的90%敵敵畏乳油已取得農藥登記［5］，為掌握敵敵畏高含量新產品在桑樹上使用的安全性，測定比較了90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油對家蠶的急性食下毒性及其在桑葉上的殘毒期，現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試農藥

供試農藥90%敵敵畏乳油（農藥登記證號PD20150856）、對照農藥77.5%敵敵畏乳油（農藥登記證號PD85105-2），均由江蘇省南通江山農藥化工股份有限公司生產。

1.1.2 供試家蠶

供試家蠶品種為“白玉×秋豐”，由浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產。飼養至3齡起蠶備用。

1.1.3 供試桑園及桑樹品種

浙江雅云生態農業有限公司桑園，強桑1號，2年生，中干偏低樹型養成，每667 m2桑園栽植750株。

1.2 試驗方法

1.2.1 兩種敵敵畏乳油對家蠶急性食下毒性試驗

經預備試驗，將77.5%敵敵畏乳油和90%敵敵畏乳油按質量濃度分別稀釋成5個濃度梯度，供試桑葉浸入不同濃度的稀釋液中1 min，取出后自然晾干，放置于保鮮盒內，每個濃度處理小區給入20頭3齡起蠶，以清水處理為空白對照，重復3次，在溫度（26.5±1.0）℃、相對濕度75%～85%的恒溫室內飼養，24 h后更換成新鮮無毒桑葉繼續飼養，直至4齡起蠶，每天調查幼蟲中毒死亡率。采用DPS統計軟件對藥液質量濃度對數與幼蟲死亡率概率值進行線性回歸分析［6］，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

1.2.2 兩種敵敵畏乳油在桑葉上的殘毒期試驗

將90%敵敵畏乳油稀釋成500倍、1000倍和1500倍液（敵敵畏質量濃度分別為1800 mg/L、900 mg/L、600 mg/L），77.5%敵敵畏乳油稀釋成1000倍液（敵敵畏質量濃度為775 mg/L）。將各濃度藥液均勻噴灑于供試桑樹，桑葉正反葉面噴濕為度，處理間設保護行隔離。噴藥后每天采摘不同濃度藥液噴灑的桑葉，以新鮮無毒桑葉為對照，每處理小區30頭3齡起蠶，重復3次，飼養至4齡起蠶結束，逐日調查記載各處理區中毒死亡蠶頭數，計算中毒死亡率。

1.2.3 避光冷藏對兩種敵敵畏乳油處理桑葉的殘毒期影響

將1.2.2噴藥處理的桑葉在藥液晾干后連同枝條剪下，用塑料袋封裝后置于5℃的冷庫中冷藏，間隔不同時間采摘桑葉喂蠶，飼養方法同1.2.2。

2 結果與分析

2.1 兩種敵敵畏乳油對家蠶3齡起蠶的急性食下毒性

采用浸葉法測定2種濃度敵敵畏乳油對3齡起蠶的急性食下毒性，添毒24 h的致死中濃度（LC50）分別為90%敵敵畏乳油17.6212 mg/L和77.5%敵敵畏乳油16.1004 mg/L（表1），兩者對家蠶的急性食下毒性差異很小。參照2014年發布的GB/T 31270.11-2014《化學農藥環境安全評價試驗準則第11部分：家蠶急性毒性試驗》附錄A“農藥對家蠶的毒性等級劃分”［7］，90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油對家的毒性等級均為高毒（0.5＜LC50≤20 mg/L）。

表1 90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油對3齡起蠶的急性食下毒性Table 1 Acute Ingestion Toxicity of 90%Dichlorvos EC and 77.5%Dichlorvos EC to Newly Exuviated Silkworms of 3rd Instar

2.2 兩種敵敵畏乳油在桑葉上的殘毒期

由表2可見，90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油稀釋液噴于桑葉后2 h采葉飼喂3齡起蠶，中毒死亡率均達到100%；噴藥后1 d采葉喂蠶，90%敵敵畏乳油500倍液的死亡率為41.11%，90%敵敵畏乳油1000倍和1500倍液均無中毒和死亡，對照農藥77.5%敵敵畏乳油1000倍液的死亡率為40.00%；噴藥后2 d采葉喂蠶，90%敵敵畏乳油500倍液的死亡率下降到5.56%，90%敵敵畏乳油1000倍和1500倍液均無中毒和死亡，對照農藥77.5%敵敵畏乳油1000倍液的死亡率為10.00%；噴藥后3 d～5 d，90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油各濃度藥液處理的桑葉飼喂3齡起蠶均無中毒和死亡。試驗結果表明：90%敵敵畏乳油500倍與77.5%敵敵畏乳油1000倍的殘毒期相似，90%敵敵畏乳油1000倍和1500倍的殘毒期短于77.5%敵敵畏乳油1000倍。

表2 90%敵敵畏乳油和77.50%敵敵畏乳油在桑葉上的殘毒期測定結果Table 2 Residual Toxicity of 90%Dichlorvos EC and 77.50%Dichlorvos EC on Mulberry Leaves

2.3 兩種敵敵畏乳油處理桑葉在避光冷藏條件下的殘毒期

由表3可見，90%敵敵畏乳油500倍、1000倍、1500倍和77.5%敵敵畏乳油1000倍液處理的桑葉在5℃環境中避光冷藏，間隔1 d、2 d、3 d后飼喂3齡起蠶，死亡率均為100%；間隔4 d后，90%敵敵畏乳油1500倍液的死亡率下降到87.78%，其余處理的死亡率均為100%；間隔5 d后，90%敵敵畏乳油500倍液的死亡率100%，90%敵敵畏乳油1000倍、1500倍和77.5%敵敵畏乳油1000倍液的死亡率分別下降到75.56%、18.89%和35.56%；間隔8 d后，90%敵敵畏乳油500倍液的死亡率仍達100%，90%敵敵畏乳油1000倍、1500倍和77.5%敵敵畏乳油1000倍液的死亡率則下降到5.56%、3.33%和1.11%。

表3 兩種敵敵畏乳油處理桑葉在避光冷藏下的殘毒期測定結果Table 3 Residual Toxicity Period of Mulberry Leaves Preserved Low Temperature and Dark Condition after Treated with the Two Kinds of Dichlorvos EC

對比表2和表3可見，90%敵敵畏乳油和77.5%敵敵畏乳油稀釋液處理的桑葉，在田間生長條件下的毒性降解很快，但在避光冷藏條件下的毒性降解很慢。

3 小結與討論

試驗結果表明，90%敵敵畏乳油對家蠶3齡起蠶的急性食下毒性（LC50）為17.6212 mg/L，略低于77.5%敵敵畏乳油的16.1004 mg/L，但差異很小，均屬于高毒級；兩種敵敵畏乳油在桑葉上的毒性殘留都很短，90%敵敵畏乳油1000倍和1500倍稀釋液噴藥后1 d的桑葉、90%敵敵畏乳油500倍和77.5%敵敵畏乳油1000倍稀釋液噴藥后3 d的桑葉，飼喂3齡起蠶無中毒癥狀和死亡蠶；但兩種敵敵畏乳油稀釋液處理桑葉在避光冷藏條件下，殘毒期比田間環境中的農藥處理桑葉大大延長，說明光照和溫度會顯著影響敵敵畏的降解。

幾十年來，敵敵畏是最常用農藥之一［8］，目前登記在桑樹上使用的有50個敵敵畏乳油制劑產品，其中77.5%（80%）的有39個，48.0%（50%）的有11個［5］。需要說明的是至今敵敵畏乳油含量規格標注值尚未完全統一，是因為敵敵畏乳油的生產工藝和有效成分含量檢測技術發生變化所致。敵敵畏乳油最初采用敵百蟲堿解法的生產工藝，在原中華人民共和國化學工業部標準HG 2-297-65《敵敵畏乳油》中，敵敵畏有效成分含量應用堿解分析法檢測；1981年制訂的中華人民共和國國家標準GB 2548-81《敵敵畏乳油》取代了原化工部標準HG 2-297-65，應用敵百蟲堿解法生產的敵敵畏乳油僅1種80%的規格，在技術指標要求中使用堿解法測定敵敵畏含量應≥80.0%，以氣相色譜法為仲裁法，測得的敵敵畏含量應≥77.5%；上世紀九十年代逐漸開始應用產品質量更高、生產成本更低的亞磷酸三甲酯法工藝路線直接合成敵敵畏，堿解分析法已不適用于敵敵畏含量檢測，且隨著氣相色譜測定方法的普及，在第一次修訂的國家標準GB 2548-1993《敵敵畏乳油》中規定，敵百蟲堿解法和亞磷酸三甲酯法兩種工藝路線生產的敵敵畏含量測定采用氣相色譜法，盡管取消了堿解分析法，但仍然沿用了兩種檢測法的數據，在技術指標要求中80%敵敵畏乳油的敵敵畏含量≥77.5%，另外還新增了50%敵敵畏乳油的規格（敵敵畏含量≥48.0%），這種規格和含量不一致現象困擾了推廣使用；因此，在第二次修訂的國家標準GB 2548-2008《敵敵畏乳油》中將規格由80%和50%分別改為77.5%和48.0%，從而使規格和含量實現了統一［9～11］。

90%敵敵畏乳油相比于77.5%敵敵畏乳油，有效成分含量增加，相應減少了輔劑用量，感觀上農藥的刺鼻臭味也有所減輕，符合農藥產品更加環保的發展趨勢。

雖然本試驗結果和賓榮佩等［4］報道的2種90%敵敵畏制劑在桑葉上的殘毒期均很短，但目前取得正式登記證號的3個90%敵敵畏制劑（1個乳油、2個可溶液劑），僅登記在水稻、十字花科蔬菜和觀賞菊花等作物上使用。因此，在桑園害蟲防治時應謹慎推薦未登記在桑樹上使用的產品，如生產上無其他替代藥劑或需要緊急防治的，應當與生產廠家簽訂質量保證協議并向農業主管部門報備，以規避技術推廣部門和使用者的風險。