種眼影微生物檢驗(yàn)方法挑戰(zhàn)性試驗(yàn)研究

＊牟建平 滕寶霞 賀曉文 朱玲 肖靜 曾小梅

（甘肅省藥品檢驗(yàn)研究院 甘肅 730070）

《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015年版中對(duì)微生物檢驗(yàn)進(jìn)行方法和限值規(guī)定[1]，眼影由于含有著色顏料、珠光顏料、酯類基質(zhì)和抑菌劑等[2]，影響微生物的檢出，本文對(duì)4種眼影分別加入陽性指示菌[3]，進(jìn)行微生物檢驗(yàn)方法挑戰(zhàn)性試驗(yàn)，通過計(jì)數(shù)方法回收率、控制菌生長試驗(yàn)，建立4種眼影（NOVO鍵盤指尖酷潮眼影星辰11#、希貝單色鉆石眼影41#、希貝單色鉆石眼影14#和希貝單色鉆石眼影18#）的微生物檢驗(yàn)方法，為其他類別的眼影微生物檢驗(yàn)提供參考。

1.試驗(yàn)材料

(1)樣品

NOVO鍵盤指尖酷潮眼影星辰11#，批號(hào)：AL528001，規(guī)格1.8g；希貝單色鉆石眼影41#淺粉色，批號(hào)：XB17111685，規(guī)格1.8g；希貝單色鉆石眼影14#寶藍(lán)色，批號(hào)：XB18051 685，規(guī)格1.8g；希貝單色鉆石眼影18#綠色，批號(hào)：XB18 051685，規(guī)格1.8g。

(2)培養(yǎng)基

卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂，批號(hào)：190221；SCDLP液體培養(yǎng)基，批號(hào)：180202；孟加拉紅瓊脂，批號(hào)：180119；雙倍乳糖膽鹽培養(yǎng)基（含中和劑），批號(hào)：180609；Baird-Parker培養(yǎng)基基礎(chǔ)，批號(hào)：190122；甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基，批號(hào)：180811；伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB），批號(hào)：190827；十六烷三甲基溴化銨瓊脂，批號(hào)：190813；pH7.0氯化鈉—蛋白胨緩沖液，批號(hào)：20200312，均購于北京陸橋技術(shù)股份有限公司。

(3)菌種

大腸埃希菌（ATCC 8739）、銅綠假單胞菌（ATCC 278 53）、枯草芽孢桿菌（ATCC 6633）、金黃色葡萄球菌（ATCC 6538）、白色念珠菌（ATCC 10231）和黑曲霉（ATCC 16404）購于中國食品藥品檢驗(yàn)研究院。

(4)儀器設(shè)備

生物安全柜（ESCD、CLASS11BSC）、生化培養(yǎng)箱（上海一恒、BPMJ-250F）、壓力消毒器（松下、MSL-3781L-PC）、恒溫水浴鍋（杭州米歐儀器有限公司、WT100-2）、顯微鏡（奧林巴斯、BX53+DP74）。

2.方法與結(jié)果

(1)菌種

試驗(yàn)所用菌種為第3代，菌懸液為第4代。

(2)供試液制備

稱取眼影5g加到滅菌的三角瓶中，加入5ml滅菌吐溫-80，加入pH7.0氯化鈉—蛋白胨緩沖液至100ml，置于45℃水浴中，用勻漿儀混勻2分鐘，制成1:20供試液。……