大柴胡湯及其“方劑要素”對NAFLD模型大鼠“腸-肝軸”作用的相關分析

王敏 周璐 孫燕 陳琳 吳夢瑤 張鑫蕾 張淑靜 高譽珊 楊佳敏 鄭豐杰 李宇航

摘要 目的：對大柴胡湯及其“方劑要素”對NAFLD模型大鼠“腸-肝軸”作用機制進行相關分析，揭示大柴胡湯的配伍規律。方法：105只大鼠分為正常組、模型組、鹽酸吡格列酮組、疏肝利膽組、健脾化痰組、通腑泄濁組、大柴胡湯組，按照方法造模及給藥，檢測“肝軸”及“腸軸”相關指標，采用Critic法進行綜合評價。結果：與正常組比較，模型組“肝軸”以及“腸軸”各個指標權重之和Z總1、Z總2差異均有統計學意義（P<0.05）;與模型組比較，鹽酸吡格列酮組、疏肝利膽組、通腑泄濁組以及大柴胡湯組“肝軸”各個指標權重之和Z總1差異均有統計學意義（P<0.05），鹽酸吡格列酮組、健脾化痰組、通腑泄濁組以及大柴胡湯組“腸軸”各個指標權重之和Z總2差異有統計學意義（P<0.05）。腸道菌群分析顯示，通腑泄濁方劑要素對改善NAFLD模型大鼠腸道菌群優勢顯著，能提高NAFLD大鼠腸道菌群中擬桿菌屬、薩特氏菌屬、假丁酸弧菌屬細菌和Akkermansia muciniphila等有益菌的相對豐度。結論：大柴胡湯中疏肝利膽方劑要素主要通過疏利肝膽作用顯著調節肝臟脂質代謝以及肝臟免疫功能，即調節“肝軸”;大柴胡湯中健脾化痰方劑要素主要通過健運脾胃、化痰作用改善腸黏膜屏障功能，即調節“腸軸”;大柴胡湯中通腑泄濁方劑要素主要調節腸道菌群;大柴胡湯全方則可同時作用于“肝軸”和“腸軸”，對NAFLD模型大鼠起治療作用。

關鍵詞 非酒精性脂肪性肝病;大柴胡湯;方劑要素;疏肝利膽;健脾化痰;通腑泄濁;腸-肝軸;CRITIC法;綜合評價

Relevant Analysis of Dachaihu Decoction and its “Formula Elements” on the “Intesine-liver axis” in the NAFLD Model

WANG Min，ZHOU Lu，SUN Yan，CHEN Lin，WU Mengyao，ZHANG Xinlei，ZHANG Shujing，GAO Yushan，YANG Jiamin，ZHENG Fengjie，LI Yuhang

（School of Traditional Chinese Medicine，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China）

Abstract Objective：To observe the effects of Dachaihu Decoction and various “formula-factors” on action mechanism of “Intestine-liver axis” of NAFLD model and to reveal the compatibility rule of Dachaihu Decoction.Methods：A total of 105 rats were divided into a normal group，a model group，a Western medicine group，a Shugan Lidan Decoction group，a Jianpi Huatan group，a Tongfu Xiezhuo group and a Dachaihu decoction group.According to the method of modeling and administration，the relevant indexes of“liver axis”and“gut axis”were detected，and the comprehensive evaluation was carried out by the Critic method.Results：Compared with the normal group，in the model group，Z總1 、Z總2 of the sum of the weights of each index of“liver axis”and“gut axis”is statistically significant（P<0.05）.Compared with the model group，there were significant differences in the sum weight of Z總1 in liver axis in the Pioglitazone hydrochloride group，dispersing stagnated liver qi for promoting bile flow group，catharis and dispel turbidity group and the Dachaihu Decoction group.And there were significant differences in the sum weight of Z總2 in the Pioglitazone hydrochloride group，dispersing stagnated liver qi for promoting bile flow group，Catharis and dispel turbidity group and the Dachaihu Decoction group.The analysis of intestinal flora showed that Tongfu Xiezhuo Formula have significant advantages in improving intestinal flora of NAFLD model rats.It can increase the relative abundance of beneficial bacteria in intestinal flora of NAFLD rats，such as Bacteroides，Sartoria，Vibrio pseudobutyricum and Akkermansia muciniphila.Conclusion：Formula factors of“Shugan Lidan formula”mainly regulate lipid metabolism of liver and liver immune function，namely，regulating“liver axis”.The Jianpi Huatan Formula factors of the prescription mainly improves intestinal mucosal barrier function-that is，regulating the“intestinal axis”.The Tongfu Xiezhuo formula factors of the Dachaihu Decoction can regulate intestinal flora; Dachaihu Decoction can act on both“liver axis”and“intestinal axis”at the same time，and has therapeutic effects on NAFLD model rats.

Keywords Nonalcoholic fatty liver disease; Dachaihu Decoction; Formula factors; Dispersing stagnated liver qi for promoting bile flow; Invigorate the spleen and dissapte phlegm; Catharis and dispel turbidity; Intestinal-liver shaft; CRITIC method; Comprehensive evaluation

中圖分類號：R242文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.03.012

非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic Fatty Liver Disease，NAFLD）是一種與胰島素抵抗（IR）和遺傳易感密切相關的代謝應激性肝臟損傷，其病理學改變與酒精性肝?。ˋLD）相似，但患者無過量飲酒史，疾病譜包括非酒精性單純性脂肪肝（NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）及其相關肝硬化和肝細胞癌[1]。隨著人們生活方式和飲食結構的改變，NAFLD的患病率呈現逐年上升趨勢，全球NAFLD患病率約為25.24%。其中北美洲24.1%、歐洲23.7%、亞洲27.4%、中東31.8%、非洲13.5%、南美洲30.5%[2]。雖然NAFLD由單純脂肪肝發展為非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化的時限很長，但由于其代謝紊亂、血脂升高，與心腦血管疾病的發展密切相關，對人類健康構成嚴重威脅，現在也越來越引起人們的重視，成為21世紀我國乃至全球重要的公共健康問題之一。

NAFLD在單純脂肪肝或肝炎早期多無明顯癥狀，現代臨床多采用調節生活節奏，調整飲食習慣以及加強鍛煉等方式加以干預，中醫藥在其治療上有明顯優勢。大柴胡湯是《傷寒論》經典方劑，具有和解少陽、內瀉熱結之功效，符合臨床上大多數NAFLD患者肝膽氣機不利，脾虛痰濕中阻，陽明濁氣不降的證候特點，而廣泛應用于臨床治療NAFLD，療效確切。

現代臨床上應用大柴胡湯治療NAFLD的效應研究較多，但其作用機制及作用靶點的基礎研究甚少，藥理機制不能用線性邏輯關系去推理，影響了該方臨床治療NAFLD療效的進一步提高及化裁應用。證候要素、方劑要素的提出以及對中醫復方靶點認識的不斷加深為我們提供了一個研究思路[3]，“方-證要素對應”不僅用來研究中醫方劑的組方原理[4-9]，也越來越多被用來研究中藥方治療疾病的現代作用機制[10]?；凇胺?證要素對應”的關系，我們從大柴胡湯方劑要素的角度出發，以腸-肝軸為切入點，研究大柴胡湯及其拆方—即各個”方劑要素”對NAFLD模型大鼠腸-肝軸上多靶點的作用，從而為中藥復方治療疾病的多靶點作用機制研究提供一種方法。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物

SPF級健康SD大鼠，雄性，56只，體質量（180±20）g，購于斯貝福（北京）生物技術有限公司，許可證號：SCXK（京）2016-0002。大鼠于SPF級動物房內飼養，室溫為22 ℃，濕度為50%。適應性喂養7 d以后開始造模，整個過程中自由進食、飲水。

1.1.2 藥物

鹽酸吡格列酮片（杭州中美華東制藥有限公司，生產批號：170102）。疏肝利膽藥物組成：柴胡15 g、黃芩9 g、白芍9 g;健脾化痰藥物組成：法半夏9 g、生姜15 g、大棗12 g;通腑泄濁藥物組成：生大黃6 g、燙枳實9 g;大柴胡湯藥物組成：柴胡15 g、黃芩9 g、白芍9 g、法半夏9 g、生姜15 g、大棗12 g、生大黃6 g、燙枳實9 g。以上中藥飲片均購自北京同仁堂藥房。

1.1.3 試劑與儀器

大鼠TNF-α Elisa試劑盒（欣博盛生物科技有限公司，貨號：ERC102a.96）;大鼠TGF-β1Elisa試劑盒（欣博盛生物科技有限公司，貨號：ERC107B.96）;大鼠TLR4 Elisa試劑盒（武漢優爾生科技股份有限公司，貨號：SEB824Ra）;大鼠NF-кB Elisa試劑盒（武漢優爾生科技股份有限公司，貨號：SEA753Ra）;BCA法蛋白定量試劑盒（北京普利萊基因技術有限公司，貨號：P1511）;Occludin抗體（英國abcam公司，貨號：ab167161）;ZO-1抗體（美國proteintech公司，貨號：21773-1-AP-50）;引物[英濰捷基（上海）貿易有限公司，訂單號：4378367];大鼠sIgA試劑盒（欣博盛生物科技有限公司，貨號：ERC015）。

全自動生化分析儀（美國貝克曼庫爾特有限公司，美國，型號：au5800）;小型臺式高速冷凍離心機[德國艾本德股份公司（Eppendorf AG），德國，型號：5417R];臺式恒溫振蕩器（太倉實驗設備廠，型號：THZ-D）;超聲波細胞粉碎機（寧波新芝生物科技股份有限公司，型號：JY96-IIN）;電泳儀（美國BIO-RAD公司，美國，型號：Mini-PROTEAN）;脫色搖床（太倉實驗設備廠，型號：TS-1）;生物分子成像儀（美國BIO-RAD公司，美國，型號：LAS-4000MINI）;紫外可見分光光度計（尤尼柯（上海）有限公司，型號：UV-2600型）;MyCyclerPCR儀（美國BIO-RAD公司，美國，型號：T100）;熒光定量PCR儀（美國應用生物系統（ABI）公司，美國，型號：stepone-plus）;全波長酶標儀（美國賽默飛世爾科技公司，美國，型號：MultiskanMK3）。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備

105只大鼠按隨機數字表法分為正常組、模型組、鹽酸吡格列酮組、疏肝利膽組、健脾化痰組、通腑泄濁組、大柴胡湯組，其中每組7只用于電鏡取材，其余8只大鼠血清、肝、腸組織用于指標檢測。

參照文獻[11]選高脂高糖飼料配方，通過預實驗驗證后選定高脂高糖飼料配方為：52.5%維持飼料+30%蔗糖+10%豬油+2%膽固醇+5%蛋黃粉+0.5%膽酸鈉。所有大鼠適應性喂養7 d以后，除正常組大鼠外均給予高脂高糖飼料喂養16周建立NAFLD模型，正常組給予維持飼料喂養。所有組大鼠均自由飲食、飲水。

1.2.2 給藥方法

實驗用陽性對照藥選取鹽酸吡格列酮片，所用藥物購自京東大藥房（中美華東制藥，批號：170102）。藥物劑量參照文獻[12]為10 mg/（kg·d），按大鼠體質量折算，將片劑研為粉末，溶于蒸餾水做成懸濁劑放入4 ℃冰箱備用。

實驗用方大柴胡湯為《傷寒論》經典原方，所用中藥全部購自于北京同仁堂藥房，經北京中醫藥大學中醫藥基礎理論與關鍵技術研究中心鑒定為正品。生藥劑量比例參《方劑學》[13]大柴胡湯全方（柴胡15 g、黃芩9 g、白芍9 g、法半夏9 g、生姜15 g、大棗12 g、生大黃6 g、燙枳實9 g），按照體表面積法[14]換算求得大鼠單位體質量生藥量8.64 g/kg。疏肝利膽藥物組成為柴胡15 g、黃芩9 g、白芍9 g，由體表面積法算得大鼠單位體質量生藥量為3.39 g/kg;健脾化痰藥物組成為法半夏9 g、生姜15 g、大棗12 g，由體表面積法算得大鼠單位體質量生藥量，并擴大10倍后為3.70 g/kg;通腑泄濁藥物組成為生大黃6 g、燙枳實9 g，由體表面積法算得大鼠單位體質量生藥量為1.54 g/kg。用蒸餾水將藥物浸泡30 min，武火煮沸后文火煎煮30 min，倒出，加蒸餾水再煎取一遍，將兩次所得煎液合并，用雙層紗布過濾，水浴蒸發濃縮，分別標記后貯存于冰箱備用。

第13～16周，分別給鹽酸吡格列酮組、疏肝利膽組、健脾化痰組、通腑泄濁組、大柴胡湯組大鼠灌胃相應藥液，3 mL/只，1次/d，正常組及模型組于相同時間給予同等劑量蒸餾水灌胃。

1.2.3 檢測指標與方法

實驗第16周，末次灌胃給藥后12 h（禁食水12 h），稱量大鼠體質量，詳細記錄一般情況，后采用10%水合氯醛（0.3 mL/100 g）腹腔注射麻醉各組大鼠，仰位固定，開胸，腹主動脈取血，采集肝臟、回腸組織凍存備用。同時，剖開大腸，取糞便分裝于事前高壓滅菌過的無菌凍存管，液氮凍存后轉移至-80 ℃冰箱待送深圳華大基因科技服務有限公司進行檢測。整個操作過程嚴格按照無菌操作進行，避免樣本污染，避免反復凍融。

本動物實驗過程均遵守美國國立衛生院倡導的實驗動物關懷、使用指導原則，及以減少、替代和優化為核心的動物實驗“3R”原則。本研究通過了北京中醫藥大學醫學與實驗動物倫理委員會的批準（編號：BUCM-1-2017051030-2030）。

血清三酰甘油（Triacylglycerol，TG）、總膽固醇（Total Cholesterol，TC）、高密度脂蛋白（High-density Lipoprotein，HDL），低密度脂蛋白（Low-density Lipoprotein，LDL）及谷丙轉氨酶（Alanine Aminotransferase，ALT）、谷草轉氨酶（Aspartate Aminotransferase，AST）由全自動生化儀（北京中醫藥大學科研中心）測定。Elisa法測定大鼠肝組織中TNF-α、TLR4、NF-кB、TGF-β以及腸組織sIgA含量。Western Blot法測定大鼠腸組織Occludin、ZO-1蛋白表達。RT-qPCR法測定大鼠腸組織Occludin mRNA、ZO-1 mRNA表達。

1.3 統計學方法

1.3.1 無量綱化處理

在運用Critic法對腸-肝軸指標進行分析時，由于指標間的單位不同，需進行無量綱化處理，消除單位不同的影響。同時，由于指標中存在高優指標（指標值越高則結果越優：HDL-C，sIgA，Occludin mRNA，ZO-1 mRNA，Occludin蛋白，ZO-1蛋白）與低優指標（指標值越低則結果越優：ALT，AST，TC，TG，LDL-C，NF-кB，TGF-b1，TLR4，TNF-α），因此需分別進行無量綱化處理，公式如下：

高優指標無量綱化處理：Zij=xijmax（xij）

低優指標無量綱化處理：Zij=max（xij）xij

1.3.2 計算指標間的相關性與沖突系數

利用pearson相關系數，對無量綱化后的指標計算指標間的相關性，公式如下：

rij=Cov（Zi，Zj）D（Zi）D（Zj）

沖突性系數與指標的相關性相反，相關性越高則沖突性越低，其公式如下：

Rj=i=1（1-rij）

以上公式中Cov（Zi，Zj）為Zi，Zj的協方差，D（Zi）、D（Zj）分別為Zi、Zj的方差。rij代表第i個指標與第j個指標的相關性。Rj表示第j個指標的沖突性。

1.3.3 計算客觀權重

指標的客觀權重通過如下公式進行求解：

Cj=σjRj

wj=Cjj=1Cj

公式中σj代表第j個指標的標準差即沖突性。Cj為指標j的信息量。

2 結果

2.1 各指標的變異性、沖突性、信息量、客觀權重值見表1。

2.2 肝軸指標、腸軸指標綜合評價 見表2。

2.3 各組腸道菌群中起重要作用的微生物 見表3。

3 討論

NAFLD是指除外一些明確損肝因素所導致的主要以肝細胞內脂肪過度沉積為特征的臨床病理綜合征，屬于中醫學“脅痛”“痞滿”“肝脹”“肝痞”“肝癖”“肝著”“積聚”“痰證”“痰濁”“濕阻”“瘀證”“肥氣”“積證”等疾病范疇。NAFLD的發病機制并不十分明確，對其的研究大多處于假說階段，“二次打擊”學說占據主導地位，隨著1998年Marshall正式提出“腸-肝軸”概念，腸道因素在疾病發生發展中的作用越來越引起人們的重視。

腸-肝軸的“肝軸”主要包括脂質代謝以及氧化應激反應。肝臟為脂質代謝中心，脂質代謝過程中任何一個小環節異常均會改變正常情況下的動態平衡[15]，從而導致肝臟內脂肪堆積等一系列變化[16]。TC、TG、HDL、LDL反應脂質代謝情況，而ALT、AST反映肝細胞炎性反應、受損以及肝臟損害程度的指標。胰島素抵抗、脂質過氧化反應是NAFLD發病的重要環節，TNF-α通過降低胰島素受體-酪氨酸激酶的活性[17]、介導肝臟損傷的重要炎性反應因子[18]、減弱線粒體的呼吸功能[19]等參與NAFLD的發生發展。NF-кB作為一種核轉錄因子，在肝細胞凋亡的中心環節-線粒體損傷中發揮重要作用，NF-кB活化后作用于TNF-α，產生大量炎性遞質，激活bax等線粒體上的促凋亡蛋白，導致肝細胞凋亡，參與NAFLD發展進程[20]，TNFα/NF-κB信號通路在各種信號刺激的條件下促進了NAFLD的發展[21]。TGF-β1通過誘導肝細胞凋亡和激活肝星狀細胞促進細胞外基質的形成，孫丹莉等人研究發現，TGF-β1隨脂肪肝程度加重而升高，并且與肝活檢所見肝組織炎性反應改變密切相關[22]。TLR4信號途徑的激活，還可通過促進促炎性反應細胞因子的合成與釋放，增強胰島素受體底物（IRS）中絲氨酸發生磷酸化，進一步調控下游酪氨酸激酶的活性下調，并且能夠阻斷下游胰島素信號的遞增傳遞。同時，TLR4信號途徑的激活，還可以通過抑制胰島素受體有效結合IRS-1，進一步誘發機體內部葡萄糖轉運體（Glucose-transporter，GLUT）4的表達水平降低，最終誘發肝臟胰島素抵抗的發生[23]。TLR4作為Toll樣受體家族中的重要環節，在各種肝臟細胞中廣泛表達，其介導的信號通路參與胰島素抵抗，引起氧化應激，誘發炎性反應[24]?？偠灾?，TNF-α、NF-кB、TGF-β1和TLR4在NAFLD的發病機制中發揮作用，TC、TG、HDL、LDL、TNF-α、NF-кB、TGF-β1和TLR4是反應NAFLD發生發展在腸-肝軸中“肝軸”的體現。

腸道黏膜不僅承擔著消化、吸收營養物質的功能，同時也是機體最大的儲存細菌器官和阻擋毒素、病原微生物侵入的主要門戶[25]，腸道黏膜屏障包括生物屏障、機械屏障、免疫屏障和化學屏障，腸道黏膜屏障功能在NAFLD發病中占有重要作用[26]。腸黏膜通透性主要與機械屏障相關，腸黏膜機械屏障主要由腸頂端膜腸上皮細胞（Intestinal Epithelial Cells，IECs）和上皮緊密連接蛋白（Tight Junction Protein，TJP）與菌膜三者組成，緊密連接作為腸黏膜機械屏障最重要的連接方式，由Occludin蛋白、Claudin蛋白、ZOs等結構蛋白及各類連接蛋白分子共同組成[27]?！澳c-肝軸”與NAFLD發生密切相關，NAFLD發生時腸黏膜機械屏障破壞，通透性增加。Xin D[28]通過對28名轉氨酶升高的NAFLD患者、30名轉氨酶正常的NAFLD患者以及34名健康志愿者進行研究發現，在NAFLD患者中，ZO-1和Occludin表達水平與轉氨酶水平呈負相關，說明了腸上皮細胞緊密連接蛋白的表達與NAFLD發生密切相關。腸黏膜的屏障作用還包括免疫屏障，在腸黏膜免疫屏障中起主導作用的是以sIgA為主的體液免疫，防御病原菌在腸黏膜黏附和定植[29]。最主要的體液免疫防御因子sIgA，通過包裹、封閉外來的病菌與IEC的特異結合位點，能夠讓其喪失黏附IEC的能力。此外，sIgA不僅能夠阻止腸黏膜上皮細胞識別及攝取細菌、毒素和其他有害分子，依靠腸道機械蠕動對病原體和毒素的清除，而且能夠減弱外部抗原刺激所引起的免疫耐受的形成，阻止腸道共棲的有益菌群對腸黏膜免疫屏障系統產生的免疫應答[30]。李生[31]通過動物實驗研究發現，非酒精性脂肪性肝炎形成過程中小腸分泌液中sIgA含量顯著降低，說明腸道免疫屏障受到損害，并且其損害可能與腸道脂質過氧化增強相關。總言之，Occludin、ZO-1、sIgA是評價腸黏膜屏障功能的重要指標，是反應NAFLD發生發展在腸-肝軸中“腸軸”的體現。

Critic賦權法結合了無量綱化與協方差矩陣統一度量以借助比較評價確定客觀權重，具體到本研究，權重值的大小則表示其對疾病的貢獻度大小。實驗結果顯示，與正常組比較，模型組“肝軸”以及“腸軸”各個指標權重之和Z總1、Z總2比較差異均有統計學意義（P<0.05），說明NAFLD模型大鼠出現了肝臟以及腸黏膜屏障的病理變化。與模型組比較，鹽酸吡格列酮組、疏肝利膽組、通腑泄濁組以及大柴胡湯組“肝軸”各個指標權重之和Z總1比較差異有統計學意義（P<0.05），說明鹽酸吡格列酮、疏肝利膽方劑要素、通腑泄濁方劑要素以及大柴胡湯可以顯著調節NAFLD模型大鼠的肝臟脂質代謝以及肝臟免疫，而健脾化痰方劑要素調節“肝軸”效應不顯著。鹽酸吡格列酮組、健脾化痰組、通腑泄濁組以及大柴胡湯組“腸軸”各個指標權重之和Z總2比較差異有統計學意義（P<0.05），說明鹽酸吡格列酮、健脾化痰方劑要素、通腑泄濁方劑要素以及大柴胡湯可以顯著調節NAFLD模型大鼠腸黏膜屏障功能，而疏肝利膽方劑要素調節“腸軸”的效應不顯著。

腸道菌群由大約1 014種微生物構成，共同參與宿主的代謝和免疫，可以應對機體受外部刺激所產生的各種適應性反應[32-35]。肝臟和胃腸道在解剖、功能上關系密切，近些年國外研究[36-37]顯示，肝臟疾病的發生、發展與機體腸道微生態變化密切相關，腸道菌群失調及內源性內毒素血癥在NAFLD發病過程中發揮重要作用[38-40]，通過調節腸道菌群，恢復腸道微生態平衡，對延緩乃至阻止NAFLD的進展可能有重要的作用，成為預防及治療該病的新方法[41]。本實驗結果顯示通腑泄濁方劑要素對改善NAFLD模型大鼠腸道菌群優勢顯著，其通過提高NAFLD大鼠腸道菌群中擬桿菌屬、薩特氏菌屬、假丁酸弧菌屬細菌和Akkermansia muciniphila等有益菌的相對豐度，改善NAFLD大鼠的糖脂質代謝，減少肝臟中脂肪沉積，抑制腸道內炎性反應，維持腸黏膜屏障的完整性。

中醫學中，肝脾密切相關，尤其在病理方面，肝病傳脾，脾病及肝?！端貑枴び駲C真臟論》云：“肝受氣于心，傳之于脾”，《素問·寶命全形論》云：“土得木而達”?！峨y經·七十七難》說：“所謂治未病者，見肝之病，則知肝當傳之于脾，故先實脾氣，無令得受肝之邪”。《金匱要略》更是說：“夫治未病者，見肝之病，知肝傳脾，當先實脾，四季脾旺不受邪，即勿補之;中工不曉其傳，見肝之病，不解實脾，惟治肝也”。NAFLD為中醫肝、脾同病之典范，其中醫病機為肝膽氣機不利，脾虛痰濕中阻，陽明濁氣不降，大柴胡湯通過將有疏利肝膽作用的藥物—柴胡、黃芩、白芍，有健脾化痰作用的藥物—半夏、生姜、大棗以及具有通腑泄濁作用的藥物—大黃、枳實配伍，達到肝、脾、大腸同治的作用，并且通過與NAFLD西醫學病理機制進行研究，發現方中各方劑要素與“腸-肝軸”病機軸上靶點的對應關系，體現了大柴胡湯配伍的科學性。

中醫復方治病具有多種配伍組合形式及“多靶點”的特點，采用證候靶點與疾病靶點（作用環節）相結合的研究模式，將是破解中醫復方配伍規律的重要途徑之一。本實驗研究即是采用此種研究模式，證實了大柴胡湯及其各方劑要素在治療高脂高糖飼料喂養的NAFLD模型大鼠中，對應“肝膽氣機不利”證候的方劑要素—疏肝利膽方劑要素主要對應西醫學中“腸-肝軸”作用機制中的“肝軸”，而對應“脾虛痰濕中阻”證候的方劑要素—健脾化痰方劑要素主要對應“腸-肝軸”作用機制中的“腸軸”，對應“陽明濁氣不降”證候的方劑要素—通腑泄濁方劑要素，主要調節腸道菌群，而同時也對肝臟脂質代謝、肝臟免疫以及腸黏膜屏障有調節作用。通過各方劑要素配合，全方大柴胡湯亦對應西醫“腸-肝軸”中的“肝軸”和“腸軸”。本研究證實了大柴胡湯配伍方法的西醫病理機制規律，為開展中藥復方的靶點作用機制研究提供了思路和方法。

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（2019-07-09收稿 責任編輯：徐穎）