陳祥宇 朱亞昊 劉 萌 張 丞 郝二英 王德賀 陳一凡 周榮艷 邸科前 陳 輝*
(1.河北農業大學動物科技學院,保定071001;2.河北大學基礎醫學院,保定071001)
抗生素濫用所導致的耐藥性、環境污染以及食品安全等問題,已經嚴重影響到畜牧業的健康發展,我國農業農村部已發布194號公告,公告稱,自2020年1月1日起,我國飼料中全面禁止添加抗生素。因此,尋找抗生素替代品已經成為目前的研究熱點。植物提取物是一類來源于天然植物且具有1種或多種生物學功效的活性物質[1]。植物提取物的活性成分差別很大,其活性成分基本可以分為生物堿類、植物多酚、揮發油類、有機酸類和多糖類等[2]。近年來關于植物提取物全部或部分替代抗生素的試驗研究中,大多表現為正效果,其抗菌與抑菌能力及促進動物生長、提高動物免疫力的作用已被畜牧業廣泛接受和認同[3]。大蒜素是從百合科植物大蒜的球形鱗基中提取出來的一種化學名稱為二烯丙基三硫的化合物,具有“通五臟、達諸竅、去寒濕、避邪惡、消臃腫、化積食”等功能[4-5]。研究顯示,飼糧中添加大蒜素可提高蛋雞的免疫功能及生產性能[6]。菊粉是一種水溶性膳食纖維[7],研究表明,菊粉具有促進礦物質吸收、改善腸道功能、降低血糖和控制血脂等功效[8]。研究表明,在飼糧中添加菊粉可提高動物機體免疫能力[9],改善雞蛋蛋品質[10],延緩蛋雞衰老,延長蛋雞產蛋期。目前,大多研究針對的是單一植物提取物對畜禽生產性能、繁殖性能和腸道形態等的影響,關于同時含有大蒜素與菊粉的復合植物提取物對蛋雞影響的研究較少。因此,本試驗通過在飼糧中添加不同水平的復合植物提取物(主要成分是大蒜素和菊粉),探討其對蛋雞生產性能、蛋品質、免疫功能和抗氧化能力的影響,以期為該復合植物提取物在蛋雞生產中的應用提供參考依據。
試驗選用960只健康狀況良好、體重及產蛋率相近的42周齡海蘭灰蛋雞,試驗在河北省邢臺市威縣德青源蛋雞場進行。試驗所用復合植物提取物由大蒜提取物、蒲公英提取物組成,輔料為沸石粉,水分含量在7%~12%。該產品成分分析保證值(每千克最低含量):大蒜素≥70 g、菊粉≥10 g。
將960只體重及產蛋率相近的42周齡海蘭灰蛋雞隨機分為4組,每組5個重復,每個重復48只雞。對照組飼喂基礎飼糧,3個試驗組分別飼喂在基礎飼糧中添加150、300和450 mg/kg復合植物提取物的試驗飼糧。試驗期共66 d,其中預試期10 d,正試期56 d。蛋雞采用4層疊層籠養,每天分6次定時飼喂,自由采食,充足飲水。光照強度為15 lx,光照時間為16 h,雞舍溫度在24 ℃左右。每天觀察蛋雞的采食、糞便和健康狀況,按正常免疫程序進行免疫接種。試驗期間蛋雞所飼喂基礎飼糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養水平(風干基礎)
1.3.1 生產性能
在相同管理條件下,以重復為單位,記錄每天的產蛋總數和總蛋重;每隔2周測定飼料消耗量;計算平均蛋重、產蛋率、平均日采食量和料蛋比。
1.3.2 蛋品質
在試驗第4周和第8周末,各組隨機選取20枚雞蛋進行蛋品質測定。采用蛋殼強度分析儀(EFR-01,以色列)測定蛋殼強度;使用羅氏比色扇測定蛋黃顏色;采用游標卡尺測定蛋殼厚度,剝離蛋殼膜后,取鈍端、銳端、中間部位3點進行測定,取平均值;采用蛋形指數測定儀(NFN385,以色列)測量雞蛋長徑和短徑,長徑與短徑之比即為蛋形指數;采用蛋品質分析儀(EA-01,以色列)測定蛋白高度及哈氏單位。
1.3.3 血清指標
在試驗第4周和第8周末,各組隨機抽取10只蛋雞進行翅下采血,血樣在3 000 r/min下離心15 min,分離血清,-20 ℃保存,用于血清指標的測定。采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法測定血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白細胞介素-2(IL-2)、干擾素-γ(IFN-γ)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性。上述指標測定所用試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司,按照說明書進行操作。
先用Excel 2016對試驗數據進行整理,再采用SPSS 22.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA),并用Duncan氏法進行組間多重比較,以P<0.05表示差異顯著,P>0.05表示差異不顯著,結果用平均值±標準差來表示。
由表2可知,第1~28天時,與對照組相比,各試驗組的料蛋比無顯著差異(P>0.05),但產蛋率和平均蛋重均顯著升高(P<0.05);同時,飼糧中添加450 mg/kg復合植物提取物組的平均日采食量顯著增加(P<0.05)。第29~56天時,與對照組相比,各試驗組的平均蛋重、平均日采食量和料蛋比無顯著差異(P>0.05);飼糧中添加300和450 mg/kg復合植物提取物組的產蛋率顯著升高(P<0.05)。第1~56天時,與對照組相比,各試驗組的平均蛋重和料蛋比無顯著差異(P>0.05);飼糧中添加300和450 mg/kg復合植物提取物組的產蛋率顯著升高(P<0.05);飼糧中添加450 mg/kg復合植物提取物組的平均日采食量顯著升高(P<0.05)。

表2 復合植物提取物對蛋雞生產性能的影響
由表3可知,第28天時,與對照組相比,飼糧中添加不同水平復合植物提取物對蛋重、蛋殼強度、蛋黃顏色、蛋形指數和哈氏單位均無顯著影響(P>0.05);飼糧中添加300 mg/kg復合植物提取物可顯著提高蛋殼厚度(P<0.05)。第56天時,與對照組相比,飼糧中添加不同水平復合植物提取物對蛋殼強度、蛋黃顏色和蛋形指數均無顯著影響(P>0.05);飼糧中添加300 mg/kg復合植物提取物可顯著提高蛋重(P<0.05);飼糧中添加300和450 mg/kg復合植物提取物可顯著提高哈氏單位(P<0.05)。

表3 復合植物提取物對蛋雞蛋品質的影響
由表4可知,第28天時,飼糧中添加復合植物提取物可顯著影響蛋雞血清IgM含量(P<0.05),對蛋雞血清IgA、IgG、IFN-γ和IL-2含量均無顯著影響(P>0.05);飼糧中添加300 mg/kg復合植物提取物組的血清IgM含量顯著高于其他各組(P<0.05)。第56天時,飼糧中添加復合植物提取物可顯著影響蛋雞血清IgM、IgG和IL-2含量(P<0.05),對蛋雞血清IgA和IFN-γ含量均無顯著影響(P>0.05);飼糧中添加300 mg/kg復合植物提取物組的血清IgM、IgG和IL-2含量顯著高于對照組和飼糧中添加150 mg/kg復合植物提取物組(P<0.05)。

表4 復合植物提取物對蛋雞血清免疫指標的影響

續表4時間Time指標 Index對照組Control group復合植物提取物添加水平Compound plant extract added levels/(mg/kg)150300450P值P-value第56天 Day 56免疫球蛋白A IgA/(μg/mL)191.20±40.63181.01±38.75209.14±31.60187.06±28.580.331免疫球蛋白M IgM/(μg/mL)615.36±90.40b582.81±33.02b711.43±104.57a648.21±88.92ab0.011免疫球蛋白G IgG/(μg/mL)1 913.40±277.97b1 860.78±131.85b2 192.34±270.03a1 985.82±226.71ab0.017干擾素-γ IFN-γ/(pg/mL)37.07±6.1843.92±10.2046.06±9.7941.92±11.760.214白細胞介素-2 IL-2/(pg/mL)211.69±25.19b206.75±34.06b248.72±33.36a229.22±30.68ab0.019
由表5可知,第28天時,與對照組相比,飼糧中添加150和300 mg/kg復合植物提取物組蛋雞血清SOD活性顯著升高(P<0.05);飼糧中添加450 mg/kg復合植物提取物組蛋雞血清GSH-Px活性顯著升高(P<0.05)。第56天時,與對照組相比,飼糧中添加300和450 mg/kg復合植物提取物組蛋雞血清SOD和GSH-Px活性均顯著升高(P<0.05)。

表5 復合植物提取物對蛋雞血清抗氧化指標的影響
在蛋雞養殖過程中,提升生產性能是提高經濟效益的關鍵。陳帆[11]研究表明,在飼糧中添加大蒜和辣椒粉等復合添加劑可顯著提高28周齡蘇禽青殼蛋雞的產蛋率、平均蛋重及平均日采食量。王文利等[12]研究表明,在蛋雞飼糧中添加大蒜素可極顯著提高海蘭白商品蛋雞的產蛋率及平均蛋重。本試驗結果顯示,在基礎飼糧中添加復合植物提取物可顯著提高海蘭灰蛋雞的產蛋率和平均蛋重,與上述研究結果一致。趙姝嫻等[13]研究表明,在產蛋后期海蘭褐蛋雞飼糧中添加菊粉會顯著提高其產蛋率、平均蛋重及料蛋比。而在本試驗條件下,飼糧中添加復合植物提取物對蛋雞的料蛋比沒有產生顯著影響。這可能是因為大蒜素具有誘食效果,能夠加快腸道蠕動,提高蛋雞采食量[14],同時飼糧中添加的復合植物提取物能夠顯著提高蛋雞產蛋率,所以飼糧中添加復合植物提取物對料蛋比沒有顯著影響。
蛋殼質量對雞蛋的保存、運輸等具有重要意義[15]。在蛋雞養殖過程中,蛋殼破損影響種蛋孵化和商品蛋銷售,給養殖場造成一定的經濟損失[16]。而一般情況下,隨著蛋雞周齡的增長,蛋殼質量會有所下降。哈氏單位是表示蛋的新鮮程度和蛋白質量的指標[17]。韓璐璐[6]研究發現,在飼糧中添加大蒜素能改善蛋雞的蛋殼品質,降低畸形蛋率,這是由于大蒜素提高了蛋雞的采食量,使鈣、磷等微量元素的攝入量相應增加所致。于慧等[18]研究表明,在飼糧中添加菊粉和中鏈脂肪酸可顯著提高羅曼褐殼蛋雞的蛋殼質量。在本試驗條件下,飼糧中添加300 mg/kg復合植物提取物可顯著提高雞蛋的蛋殼厚度及哈氏單位,這表明在蛋雞飼糧中添加復合植物提取物可提高蛋品質。
血清中的免疫球蛋白是體液免疫的主要抗體,主要包括IgA、IgG和IgM,免疫球蛋白含量能夠在一定程度上反映機體的免疫水平[19]。炎性細胞因子是指參與炎癥反應的各種細胞因子,主要的炎性細胞因子包括IFN-γ和IL-2等[20]。IFN-γ是在機體免疫網絡中起調節作用的重要因子,IL-2含量可反映機體免疫功能的強弱[17,21]。SOD能消除機體在新陳代謝過程中產生的有害物質,GSH-Px是體內重要的抗氧化劑和自由基清除劑,具有抗氧化、抗衰老的作用[22-23]。徐靜等[24]研究表明,在飼糧中添加大蒜精油可顯著提高蛋雞的免疫功能及血清SOD活性。王凡等[25]研究表明,在飼糧中添加大蒜素可顯著提高蛋雛雞血清SOD和GSH-Px活性。魏軼男等[26]研究表明,在飼糧中添加菊粉可顯著提高肉仔雞血清SOD和GSH-Px活性。徐騰騰等[27]研究表明,在飼糧中添加復合植物提取物可使奶牛血清IgA含量顯著增加,血清IgM含量顯著降低,血清SOD和GSH-Px活性顯著升高。在本試驗條件下,飼糧中添加300 mg/kg復合植物提取物能夠提高試驗期內蛋雞血清IgM與IgG含量及SOD與GSH-Px活性,與前人研究結果基本一致。這說明以大蒜素和菊粉為主要成分的復合植物提取物可提高蛋雞的免疫功能和抗氧化能力,這可能與大蒜素和菊粉具有增加巨噬細胞、淋巴細胞的免疫調節以及對自由基不同程度的清除作用有關[28-29]。
綜上所述,在本試驗條件下,飼糧中添加300 mg/kg復合植物提取物(主要成分是大蒜素和菊粉)能夠提高蛋雞的產蛋率,改善蛋品質,并能增強機體的免疫功能及抗氧化能力。