不同孵化條件對豐年蟲卵孵化率的影響及孵化操作程序研究

胡志杰，王丹麗

(1.寧波大學(xué)海洋學(xué)院，浙江 寧波 315000；2.寧波神鳳海洋世界有限公司，浙江 寧波 315000)

豐年蟲俗名豐年蝦、豐年蟲，隸屬于節(jié)肢動物門、鰓足綱、無甲目、豐年蟲科，是生活在鹽度較高水域中的一種小型低等甲殼動物。豐年蟲不僅有較強的適應(yīng)能力、繁殖能力，而且休眠卵有較長的保存時間，卵孵化時間短，豐年蟲無節(jié)幼體含有豐富的蛋白質(zhì)和不飽和脂肪酸，另外還含有類胡蘿卜素、核黃素以及一些蛻皮激素類的物質(zhì)。也正是因為其較高的營養(yǎng)價值，使得當(dāng)前世界上有85%以上的水產(chǎn)動物育苗以豐年蟲作為餌料來源，全世界被報道的豐年蟲產(chǎn)地至少有500處。早在1930年，豐年蟲無節(jié)幼體便作為水產(chǎn)動物餌料被廣泛使用，因此國內(nèi)外有關(guān)豐年蟲卵的孵化以及使用有較多和較深的研究。國外最早見于美國、挪威等地用豐年蟲無節(jié)幼體養(yǎng)育魚苗，獲得了一定的成果。雖然我國對豐年蟲的研究起步較晚，但我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展帶動了豐年蟲卵的生產(chǎn)，其中最為有名且質(zhì)量好的有東部沿海鹽田、青海、西藏和新疆南部出產(chǎn)的豐年蟲卵。豐年蟲卵孵化率實驗大多在實驗室內(nèi)完成，密度比較低，環(huán)境比較好，孵化率在一定程度上有所保證，未能結(jié)合企業(yè)實際情況進行孵化情況說明。但企業(yè)在經(jīng)營生產(chǎn)過程中，豐年蟲作為基礎(chǔ)食物，其孵化率的高低決定著食物的干凈程度以及生產(chǎn)成本。因此，如何在高密度環(huán)境下提高豐年蟲卵的孵化率，滿足日常生產(chǎn)所需，一直為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者所追求。為此，筆者通過控制變量，綜合表面觀測(圖1)、鏡檢(圖2)及底部觀測(圖3)等定性方式來評定不同孵化條件對豐年蟲孵化率的影響，探究最適孵化操作程序，以期為豐年蟲卵高密度孵化提供一定的參考依據(jù)，同時匯總較適宜的孵化條件，以減少企業(yè)運營成本。

圖1 表面觀測

圖2 鏡檢

圖3 底部觀測

一、材料與方法

1.材料

豐年蟲卵(卵徑300微米，含水量20%～25%，產(chǎn)地西藏，圖4、圖5)、80升錐形缸體(實際水體量)、加熱棒、節(jié)能燈(20瓦)、氣泵、過濾沉淀后的天然海水(鹽度30)等。

圖4 豐年蟲卵外觀

圖5 鏡下豐年蟲卵

2.孵化方法

(1)用淡水(2升)浸泡豐年蟲卵(500克)1小時，均勻放入盛有水的兩個孵化缸(供1天生產(chǎn)使用，上、下午各250克)中(充氧、29℃、鹽度30)，燈光24小時常亮孵化。

(2)第2天上午9點、下午2點各沉淀20分鐘后，將孵化缸中沉淀的豐年蟲收集到2升的量杯中，沉淀5分鐘(拍表面照片)，然后倒去上清液，重復(fù)1次，留底部500毫升豐年蟲液，攪拌均勻。

(3)隨機吸取液體5次，每次1毫升，并將第1滴液體除去，然后隨機滴1滴到載玻片上鏡檢(上、下、左、右、中各取1個點)，以此得到5個數(shù)據(jù)，取平均數(shù)計算孵化率。

(4)用80～100目濾網(wǎng)過濾豐年蟲，留底部100毫升觀察底部黑卵的密集程度。

(5)分別設(shè)置不同孵化鹽度梯度(15、20、25、30)、不同浸泡時間梯度(0、20、40、60分鐘)、不同浸泡鹽度梯度(0、10、15、20、30)進行孵化實驗。

3.觀測

(1)表面觀測：將豐年蟲孵化缸中的氣泵以及加熱棒拿出，沉淀20分鐘后從孵化缸中收集到杯中至滿，等待5分鐘，看表面干凈程度(包括黑卵和半孵化狀態(tài)的豐年蟲)。半孵化豐年蟲為已經(jīng)孵化但不能自由游動的豐年蟲。

(2)底部觀測：將孵化后的豐年蟲進行沉底過濾，留底部100～200毫升，看底部沉卵的密度大小。

二、實驗結(jié)果

1.從冷庫中取出卵的時間對孵化率的影響

根據(jù)寧波神鳳海洋世界有限公司實際情況，4℃冰箱的容積僅能存放5天的用量，實驗從第1天到第6天的孵化率無顯著差異，同時筆者觀測到6天內(nèi)表面無漂浮過多黑卵、半孵化狀態(tài)卵，總體上從冷庫中取出卵后的4℃冷藏時間長短不影響其孵化率。

2.孵化鹽度對孵化率的影響

實驗設(shè)計孵化鹽度梯度為15、20、25、30，孵化結(jié)果顯示鹽度15和30組的表面較干凈；鹽度20和25組的表面較臟，其中一組黑卵較多，另一組半孵化豐年蟲較多；各鹽度組的底部均較干凈。鹽度15組的缸壁上粘有較多豐年蟲，因此可投喂的食物量有所減少，鹽度20組的缸壁較為干凈。鹽度30組的孵化率略低于鹽度15組(無顯著差異)，但可投喂量比鹽度15組要多。

3.浸泡時間對孵化率的影響

孵化前用淡水浸泡卵0、20、40、60分鐘再進行孵化，實驗結(jié)果顯示，沒有經(jīng)淡水浸泡的卵孵化率較其他組低；浸泡時間在0～40分鐘的孵化缸表面有較多半孵化狀態(tài)的豐年蟲，可投喂量有所減少，浸泡60分鐘組孵化缸表面并未出現(xiàn)此類情況。

筆者在實驗中發(fā)現(xiàn)，在一定時間內(nèi)隨著浸泡時間的延長，孵化缸表面由黑卵向半孵化狀態(tài)、再向干凈表面過渡；同時也發(fā)現(xiàn)隨著孵化時間的延長，孵化缸表面黑卵也逐漸減少。這說明浸泡時間的延長在一定程度上可縮短孵化時間并有助于孵化率的提高，節(jié)約一定的生產(chǎn)成本。

4.浸泡鹽度對孵化率的影響

不同鹽度(0、10、15、20、30)浸泡卵1小時后再孵化實驗結(jié)果顯示，卵用鹽度為0～15的水浸泡后，孵化率最高，但是綜合表面、鏡檢和底部干凈程度考慮，浸泡鹽度為10的組上午有半孵化豐年蟲，下午相對干凈；浸泡鹽度為15的組表面有少許半孵化豐年蟲，底部干凈；浸泡鹽度為20的組表面最臟，投喂時有大量的黑卵，不符合投喂標準；浸泡鹽度為30的組表面有半孵化的豐年蟲，底部較干凈，但是孵化出來的量較其他組少；用淡水浸泡的豐年蟲卵孵化的量正常，同時投喂也符合投喂標準，底部較干凈。因此，在0和15的浸泡鹽度下豐年蟲卵孵化情況較為理想。

經(jīng)過對比觀察發(fā)現(xiàn)，浸泡鹽度15組表面有部分半孵化豐年蟲，從此方面考慮，用淡水浸泡1小時組的孵化率最高，因為其表面未出現(xiàn)半孵化狀態(tài)豐年蟲，同時鏡檢發(fā)現(xiàn)“干凈”，底部也無較多黑卵。其他浸泡鹽度組上午基本可以看到表面有一層或多或少的半孵化狀態(tài)豐年蟲，下午此現(xiàn)象有所好轉(zhuǎn)。由于表面有過多的半孵化狀態(tài)豐年蟲會將其過濾，使得可投喂量減少，或者需增加一定的孵化量，因此孵化結(jié)果不如淡水組。

三、小結(jié)

由實驗可知，隨著孵化時間的延長，孵化率有一定程度的提高；從冷庫中拿出后短時間存放在4℃冰箱中不會降低豐年蟲卵的孵化率；浸泡豐年蟲卵受其孵化鹽度(15～30)的影響較小，均可投喂，結(jié)合豐年蟲卵孵化量的不同，筆者認為孵化鹽度30較好，用淡水浸泡1小時得到的孵化率最高。在一定程度下，隨著浸泡時間的延長，表面呈現(xiàn)出由黑卵向半孵化狀態(tài)再向干凈表面進行過渡。因此最適操作程序為：用淡水浸泡豐年蟲卵1小時，鹽度為30，溫度為28～30℃，持續(xù)光照、增氧、孵化24～36小時。