雙歧桿菌對支氣管哮喘兒童肺功能及血清IFN-γ、IL-4的影響

陳 琳 龍麗娜 陳露露

(廣州市增城區人民醫院兒科 廣州 511300)

支氣管哮喘是兒童常見的慢性呼吸系統疾病，隨著環境問題的加劇，越來越多的兒童出現支氣管哮喘的癥狀，嚴重影響了兒童的身心健康。近年來大量研究發現人體腸道菌群與免疫系統密切相關，支氣管哮喘患者體內存在腸道菌群失衡[1]。因此通過尋找哮喘兒童腸道菌群中減少的益生菌并及時給予干預，為哮喘的預防及治療提供了新思路。而雙歧桿菌被認為是人類最常見的益生菌，故本研究通過針對哮喘患兒補充雙歧桿菌，探索其在哮喘治療中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年7月～2020年2月期間廣州市增城區人民醫院就診的72例支氣管哮喘急性發作期患兒為研究對象。納入標準：(1)符合2016年中華醫學會兒科學分會呼吸學組制定的兒童支氣管哮喘診斷標準[2]；(2)年齡≥5歲；(3)入組前未予ICS等長期控制用藥，未予益生菌類制劑治療。排除標準：(1)患心功能不全、氣管腫瘤等其他可能引起喘息的疾病及免疫系統疾病；(2)近1個月內服用免疫調節劑或糖皮質激素。所有患兒隨機分為對照組和觀察組，每組36例。所有患兒及其家屬均自愿參加本研究，已簽署知情同意書，本研究已通過本院醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

所有患兒嚴格遵循《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》進行哮喘管理，根據病情予糖皮質激素、解痙、平喘、化痰等哮喘常規治療，并根據病情調整治療方案。觀察組口服雙歧桿菌三聯活菌片(內蒙古雙奇藥業股份有限公司，生產批號201709217)1.0 g/次，3 次/d，連用30d。記錄患兒臨床癥狀體征消失時間，在治療初始及治療30d后檢查肺功能及血清IFN、IL-4水平。

1.3 觀察指標

1.3.1肺功能檢測

采用美國偉亞安醫療器械提供的MasterScreen肺功能儀測定患兒肺功能。包括1秒用力呼氣量(FEV1)、1s用力呼氣量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、用力呼氣25%時瞬間流速(MEF25%)、用力呼氣50%時瞬間流速(MEF50%)。

1.3.2血清IL-4、IFN-γ檢測

分別于治療前后空腹采集患兒靜脈血，靜置離心后酶聯免疫吸附法(ELISA)法測定血清IL-4、IFN-γ水平，試劑盒均購自武漢默沙克生物科技有限公司，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 一般情況比較

共納入研究對象72例。其中觀察組36例，男19例，女17例，年齡5～10歲，平均年齡(6.4±1.4)歲，根據相關指南進行哮喘急性發作嚴重度分級為重度發作者7例(21.88%)；對照組36例，男22例，女14例，年齡5～9歲，平均年齡(6.2±1.3)歲，重度發作者6例(18.6%)。各組患兒性別、年齡、病情嚴重程度等無明顯差異(P>0.05)。

2.2 臨床癥狀與體征消失時間

在治療過程中,兩組患兒喘息、咳嗽、胸悶氣短癥狀和肺內哮鳴音的平均消失時間差異無統計學意義(P>0.05),見表1。

表1 兩組患兒臨床癥狀與體征消失時間對比

2.3 兩組患兒治療前后肺功能比較

治療前,兩組患兒肺功能指標FEV1、FEV1/FVC、MEF25%及MEF50% 差異無統計學意義(P>0.05)；治療后,兩組 FEV1、FEV1/FVC、MEF25% 及 MEF50% 較治療前均顯著升高,且觀察組上升幅度高于對照組,差異具有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩組患兒治療前后肺功能比較

2.4 兩組患兒治療前后血清IFN-γ、IL-4水平比較

兩組患兒治療后血清IFN-γ水平均明顯升高、IL-4水平均明顯下降，差異有統計學意義(P<0.05)；治療后兩組組間比較，血清IFN-γ、IL-4水平差異無統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 兩組患兒治療前后血清IFN-γ、IL-4水平比較

3 討論

支氣管哮喘是常見的兒童呼吸系統疾病，20余年來我國兒童患病率呈明顯上升趨勢。患兒可有不同程度的呼吸道癥狀(如咳嗽、喘息、胸悶、呼吸困難等)，其主要病理特征為可逆性的呼吸道阻塞、氣道高反應、氣道炎性反應及氣道重塑。目前哮喘的發病機制尚不清楚，研究認為其發病與輔助性T淋巴細胞亞群Th1/Th2功能失衡有關，Th2細胞過度反應是哮喘發生的免疫學基礎，主要表現為機體對各種變應原的免疫應答向Th2型偏移，破壞了原先的機體體內Th1細胞和Th2細胞的動態平衡。Th1細胞被認為能夠產生IL-2、IFN-γ和TNF-β，而Th2細胞被認為能夠產生IL-4、IL-5、IL-9和IL-13，而不能產生IFN-γ和TNF-β。因此，這種向Th2型的偏移將導致IL-4、IL-5、IL-9和IL-13分泌增高，故血清IFN-γ和IL-4水平可作為反映機體Th1/Th2細胞因子的平衡指標。研究證明，IL-4過量產生和INF-γ產生減少可誘發哮喘的發生[3]。

雙歧桿菌是由法國學者Tissier等從母乳喂養兒的糞便中分離出的一種厭氧的革蘭陽性桿菌。一系列研究表明，過敏性疾病患兒與正常兒童之間的腸道菌群有明顯差異。過敏性疾病患兒腸道內乳酸桿菌及雙歧桿菌較正常嬰兒少，而存在更多的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌[4]。同時一項前瞻性研究表明，在出現皮膚點刺試驗陽性之前，過敏和非過敏嬰兒在新生兒期的糞便菌群已存在差異。過敏患兒在新生兒期的糞便中梭狀芽孢桿菌較高，而雙歧桿菌減少。過敏患兒可發生食物不耐受、濕疹、支氣管哮喘等過敏性疾病。有動物研究提示雙歧桿菌及其完整肽聚糖可影響過敏小鼠模型的樹突狀細胞的成熟狀態并刺激其分泌細胞因子，調節Th1/Th2之間的平衡。但是在防治哮喘的研究上，Magnus和Janq SO等[5～6]得出不同的結論，目前其在預防及治療哮喘的效應上還存在爭議。

本研究采用雙歧桿菌調節腸道菌群，針對支氣管哮喘初診患兒進行干預。雙歧桿菌乳桿菌三聯活菌片是臨床常見益生菌制劑之一，口服后可直接補充體內益生菌，調節腸道菌群，清除并抑制腸道中潛在致病菌；同時還可通過調整腸道微生態系統而調控宿主全身免疫系統，最終達到防治過敏性疾病的目的。肺功能檢測是大多數指南推薦用于診斷和監測兒童哮喘的主要客觀指征，本研究結果顯示，雙歧桿菌輔助治療組患兒肺功能指標 FEV1、 FEV1 / FVC、MEF25% 及MEF50% 較對照組明顯改善，故雙歧桿菌在哮喘患兒急性發作時肺功能的恢復及小氣道阻塞的改善中具一定的效應。本研究還發現雙歧桿菌輔助治療對哮喘患兒急性發作臨床癥狀和體征的改善無明顯影響，可能是因為患兒哮喘急性發作數天內得以控制，時間較短尚不足以使雙歧桿菌對腸道微環境及機體免疫狀況產生較大影響，可對患兒進行長期隨訪了解其哮喘再次發作時的情況進一步判斷。同時本研究還發現雙歧桿菌對血清IFN-γ、IL-4水平無明顯影響，此與Huang等[7]的研究結果相一致。對于該結果筆者考慮，雖然血清IFN-γ和IL-4水平可作為反映機體Th1/Th2細胞因子的平衡指標，但是除上述兩者外，IL-5、IL-9、IL-13、Th17細胞等與哮喘亦關系密切。如Round JL等[8]研究發現脆弱擬桿菌和梭狀芽孢桿菌可刺激調節性T細胞(Treg)，一方面產生IL-10，抑制IL-17的分泌，另一方面直接減少免疫球蛋白IgE的分泌從而對哮喘產生抑制作用。Sagar等[1]通過動物實驗發現短雙歧桿菌與非消化性寡糖可以抑制肺的氣道炎癥，降低T細胞活化和肥大細胞脫顆粒，這些均利于支氣管哮喘等慢性炎癥的治療。故雙歧桿菌可能通過其他免疫細胞或者細胞因子對支氣管哮喘產生效應。

綜上所述，雙歧桿菌輔助治療兒童支氣管哮喘可有效改善兒童肺功能，且安全性較高。但本研究樣本量較小，且觀察時間較短，其長期療效及具體作用機制等仍需進一步深入研究。今后將進一步研究雙歧桿菌對哮喘影響的可能機制，為哮喘的預防和治療提供新思路。